二香活心軟膠囊對犬冠狀動脈結(jié)扎犬所致心肌缺血的保護(hù)作用

周 越 胡麗萍* 秦 芳 張 博 史妍婷

(1 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110032；2 山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355)

二香活心軟膠囊是源于古代醫(yī)藥文獻(xiàn)并應(yīng)用現(xiàn)代提取技術(shù)制備而成，其主要成分是蘇合香和降香提取物。本實(shí)驗(yàn)用冠狀動脈結(jié)扎造成犬心肌缺血模型來研究二香活心軟膠囊對心肌缺血的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑

二香活心軟膠囊由沈陽藥科大學(xué)藥劑教研室提供（批號：20110324）；蘇合香丸為北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠生產(chǎn)（批號：20101010）；氯化硝基四氮唑藍(lán)（N-BT），中國醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司（批號：F20110128）；戊巴比妥鈉，中國醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司分裝（批號：F20060816）。

1.1.2 動物與儀器

健康成年beagle犬，雌雄兼用，體質(zhì)量11.0～13.0kg，康平實(shí)驗(yàn)動物中心提供（實(shí)驗(yàn)動物許可證號：SCXK2009-0005）；EK10型單道自動心電圖機(jī)，上海伯迪克醫(yī)療儀器有限公司；DH-1型動物人工呼吸機(jī)，浙江醫(yī)科大學(xué)儀器實(shí)驗(yàn)廠。

1.2 方法

1.2.1 分組與劑量

25只beagle犬，隨機(jī)分為5組，每組5只，分別為模型組（灌胃給予大豆油）；DIV經(jīng)十二指腸給藥高中低劑量組，給藥劑量分別為60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg及蘇合香丸組（SHW）75mg/kg。各給藥組給藥前均用豆油（陽性藥用0.5%CMC-Na）配制成所需濃度藥液，各組給藥容積均為1mL/kg。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法[1-2]

在戊巴比妥鈉（30mg/kg）靜脈麻醉下，右側(cè)臥位正壓人工呼吸下（頻率為30次/分，呼吸時比1.5∶1，潮氣量為300mL），在左4～5肋間開胸，在距迷走神經(jīng)2cm處，沿迷走神經(jīng)剪開心包壁層做懸床（縫于胸壁）暴露心臟，在冠狀動脈左前降支近1/3處，從冠狀動脈下引線備結(jié)扎用。將心外膜電極縫于心外膜上，經(jīng)波段開關(guān)連于EK10型單道自動心電圖機(jī)上，記錄心外膜電圖，計算30個導(dǎo)聯(lián)ST移位的總和（Σ-ST）及ST移位超過1mV的導(dǎo)聯(lián)數(shù)（N-ST）。以結(jié)扎后15分鐘時為給藥前值，同時記錄給藥后30、60、120、180min心外膜電圖，計算Σ-ST、N-ST及其變化率。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，迅速取出心臟并稱全心重，剪除心房及右室，稱左室重，冷凍30min，于冠狀動脈結(jié)扎點(diǎn)下、與冠狀動脈溝平行，將心左室肌切成等厚的5片，將5片心肌置于37℃N-BT染液中、振搖染色15分鐘后取出，梗死區(qū)染成淺紅色，非梗死區(qū)為暗紅色。計算梗死面積百分比。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

表1 DIV對麻醉結(jié)扎犬心外膜電圖ST移位總和Σ-ST（mV）的影響（±s）

表1 DIV對麻醉結(jié)扎犬心外膜電圖ST移位總和Σ-ST（mV）的影響（±s）

注：各給藥組與模型組同時間點(diǎn)給藥前后變化率比較 變化率=（給藥后值－給藥前值）/ 給藥前值×100% △△P＜0.01，△P＜0.05

組別 統(tǒng)計指標(biāo) 給藥前 給藥后(min)0 30 60 120 180模型組 ±s ±s 46.4±9.5 49.1±11.1 51.3±9.5 52.6±12.0 53.2±10.7變化率(%) 5.5±2.9 10.9±4.5 13.1±6.4 14.7±7.4 DIV高劑量組 ±s ±s 49.5±10.5 47.0±10.8 48.7±10.2 46.8±9.8 50.5±12.2 60mg/kg 變化率(%) -5.3±4.5△△ -1.4±4.6△△ -5.2±5.5△△ 1.8±5.6△DIV中劑量組 ±s ±s 46.4±12.5 45.3±12.4 46.0±12.4 45.6±11.7 47.5±12.6 30mg/kg 變化率(%) -2.5±2.6△△ -0.7±2.5△△ -1.5±2.4△△ 2.4±4.0△DIV低劑量組 ±s ±s 50.2±13.2 48.8±11.4 49.3±10.9 49.8±9.8 50.3±11.5 15mg/kg 變化率(%) -2.2±3.5△△ -0.1±7.4△ 0.5±7.8△ 1.0±7.8△SHW組 ±s ±s 50.4±9.9 48.7±10.4 53.6±10.3 47.7±12.7 51.5±10.7 75mg/kg 變化率(%) -3.6±2.9△△ -0.1±4.3△△ -6.4±6.1△△ 2.2±9.1△

表2 DIV對麻醉結(jié)扎犬心外膜電圖N-ST（mV）的影響（±s）

表2 DIV對麻醉結(jié)扎犬心外膜電圖N-ST（mV）的影響（±s）

注：各給藥組與模型組同時間點(diǎn)給藥前后變化率比較 變化率=（給藥后值－給藥前值）/ 給藥前值×100% △△P＜0.01，△P＜0.05

組別 統(tǒng)計指標(biāo) 給藥前 給藥后(min)0 30 60 120 180模型組 ±s ±s 16.8±2.3 18.0±2.2 19.6±2.5 19.8±3.6 18.6±4.2變化率(%) 7.5±5.8 17.0±7.2 17.3±7.8 10.1±13.7 DIV高劑量組 ±s ±s 15.6±2.2 14.8±2.8 15.0±3.1 12.6±3.4 14.0±3.1 60mg/kg 變化率(%) -5.3±9.0△ -4.4±9.5△△ -17.9±23.7△△ -8.2±24.9 DIV中劑量組 ±s ±s 17.8±2.6 16.4±3.9 18.2±2.9 17.4±4.8 15.6±3.9 30mg/kg 變化率(%) -8.7±10.6△ 2.3±6.0△△ -3.6±13.2△ -12.4±15.7△DIV低劑量組 ±s ±s 16.2±3.1 15.0±1.9 15.4±2.9 15.4±3.0 16.6±4.4 15mg/kg 變化率(%) -6.1±9.4△ -3.2±18.1△ -4.6±7.7△△ 1.4±12.2 SHW組 ±s ±s 19.2±3.9 17.6±3.5 17.0±3.3 17.2±4.0 16.2±2.9 75mg/kg 變化率(%) -7.9±8.9△ -10.7±13.7△△ -10.3±11.4△△ -14.0±17.2△

2 結(jié)果

2.1 二香活心軟膠囊對麻醉犬冠狀動脈結(jié)扎所致心肌梗塞的影響

結(jié)扎冠狀動脈動脈前降支后，心電圖ST段明顯抬高，隨缺血時間延長而愈高，Σ-ST增加，經(jīng)十二指腸給予二香心軟膠囊后，高劑量組藥后30min的Σ-ST（表1）和N-ST（表2）分別為（47.0±10.8）、（14.8±2.8），與模型組比較顯著降低，藥物發(fā)揮作用持續(xù)至藥后180min；中劑量組藥后30min的Σ-ST和N-ST分別為（45.3±12.4）、（16.4±3.9），與模型組比較顯著降低，藥物發(fā)揮作用持續(xù)至藥后180min；低劑量組藥后30min的Σ-ST和N-ST分別為（48.8±11.4）、（15.0±1.9），與模型組比較顯著降低，藥物發(fā)揮作用持續(xù)至藥后180min。

2.2 梗死范圍影響的定量組織學(xué)檢測

與模型組相比，除DIV低劑量組外，DIV高、中劑量組與SHW組梗死心肌重/左心室重（%）的值顯著下降（P＜0.05）；而DIV高、中、低劑量組與SHW組的梗死心肌重/全心重（%）值均顯著下降（P＜0.05或P＜0.01）。見表3。

表3 DIV對結(jié)扎冠狀動脈犬心肌梗死范圍的影響（±s，n=5）

表3 DIV對結(jié)扎冠狀動脈犬心肌梗死范圍的影響（±s，n=5）

注：與模型組比較 △P＜0.05，△△P＜0.01

組別 劑量（mg/kg） 梗死心肌重/左心室重（%）梗死心肌重/全心重（%）模型組 - 26.49±1.96 16.82±2.05 DIV高劑量組 60 20.81±3.62 △ 11.54±1.66 △△DIV中劑量組 30 19.44±5.39 △ 11.95±2.77 △DIV低劑量組 15 23.07±4.41 13.44±1.88 △SHW組 75 19.77±4.51 △ 11.71±2.61 △△

3 討論

心肌缺血，是指心臟的血液灌注減少，導(dǎo)致心臟的供氧減少，心肌能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)。心肌缺血主要的原因是冠狀動脈粥樣硬化，其次還有痙攣、栓塞等多種。

心外膜心電圖指標(biāo)可反映心肌缺血程度與心肌缺血范圍[3]。二香活心軟膠囊能降低由冠狀動脈結(jié)扎所致的Σ-ST和N-ST值升高，減小心肌缺血的程度和范圍。經(jīng)十二指腸給予二香活心軟膠囊后可縮小心肌缺血所造成的心肌梗死面積，減少梗死范圍占心臟和心室的比重。綜上所述，二香活心軟膠囊對犬冠狀動脈結(jié)扎犬所致心肌缺血有很好的保護(hù)作用。

[1] 李蓮靜,李七一,朱萱萱,等.冠心平對麻醉犬冠脈結(jié)扎致心肌缺血的保護(hù)作用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,20(34):4337-4338.

[2] 阮鳴.心安靈對麻醉犬心肌缺血的保護(hù)作用[J].南京曉莊學(xué)院學(xué)報,2006(4):115-117.

[3] 唐志書,郭立瑋,王斌,等.三七總皂苷/山茱萸總皂苷組分對犬冠狀動脈結(jié)扎缺血心肌的保護(hù)作用研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2011,22(1):72-74.