銀杏達(dá)莫對(duì)大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后癥狀性腦血管痙攣的影響

張 揚(yáng) 張曉娜 韓志國(guó) 朱曉波 (吉林大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)外科，吉林 長(zhǎng)春 300)

癥狀性腦血管痙攣(SCV)是指自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)引起的腦血管痙攣，是SAH后嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，對(duì)患者臨床經(jīng)過(guò)和預(yù)后具有重大影響。血管痙攣也是SAH病人致死、致殘的主要原因，本文觀察銀杏達(dá)莫對(duì)大鼠SAH后SCV的臨床效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組 將80只大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎后，將很快死亡和出現(xiàn)嚴(yán)重神經(jīng)功能缺損的23只大鼠排除本實(shí)驗(yàn)。將無(wú)癥狀和輕微神經(jīng)功能缺損的57只大鼠在結(jié)扎頸總動(dòng)脈后隨機(jī)分為三組:假手術(shù)組，SAH組，SAH+銀杏達(dá)莫組。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物模型的制備 參照Roux等〔1〕的方法制備大鼠SAH模型。10%水合氯醛(400 mg/kg)腹腔注射麻醉后，大鼠頭部及左側(cè)股動(dòng)脈區(qū)備皮，常規(guī)消毒鋪巾;大鼠仰臥位，手術(shù)顯微鏡下暴露左側(cè)股動(dòng)脈備用;然后改俯臥位，取枕外隆凸以下約2.0 cm正中直切口，暴露枕骨、環(huán)椎及環(huán)枕膜，用5 ml注射器針頭刺破環(huán)枕膜并稍稍推進(jìn)到達(dá)枕大池;有腦脊液流出后，用1 ml注射器抽取股動(dòng)脈血0.3 ml，在2 min之內(nèi)注入枕大池;注血后環(huán)枕膜穿刺處填塞可吸收性明膠海綿一塊，俯臥位頭低30°約30 min，以利血液沉積在腦底血管周圍，縫合頭部及股部切口。48 h后同法抽取右側(cè)股動(dòng)脈血0.3 ml注入枕大池，制成大鼠SAH動(dòng)物模型。假手術(shù)組兩次均注入0.3ml生理鹽水。

1.2.2 給藥方式 SAH+銀杏達(dá)莫組大鼠在第一次注血后30 min經(jīng)靜脈給0.4 ml/kg體重銀杏達(dá)莫(用生理鹽水稀釋)，此后每日按同樣的方式分別給藥至SAH第4天實(shí)驗(yàn)結(jié)束。每次注藥時(shí)間為10 min。假手術(shù)組，SAH組大鼠以同樣的方式分別經(jīng)靜脈給予同量的生理鹽水。

1.2.3 神經(jīng)癥狀的觀察 神經(jīng)功能缺損癥狀通過(guò)觀察大鼠的

運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行分級(jí)描述。采用1998年Endo神經(jīng)癥狀分級(jí)法:1級(jí)，無(wú)神經(jīng)功能缺損;2級(jí)，輕微或者可疑神經(jīng)功能缺損;3級(jí)，輕度神經(jīng)功能缺損，不伴有異常運(yùn)動(dòng);4級(jí)，嚴(yán)重神經(jīng)功能缺損，伴有異常運(yùn)動(dòng)。

1.2.4 血液流變學(xué)檢查 用一次性2 ml注射器采頸靜脈血2 ml注入含1.019 mol/L的枸櫞酸鈉抗凝無(wú)菌試管內(nèi)，用日本SysmexCA-500全自動(dòng)血凝分析儀處理標(biāo)本，取樣、檢測(cè)及結(jié)果打印均自動(dòng)完成。各組在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)采血。

1.2.5 基底動(dòng)脈形態(tài)學(xué)檢查 每組各取8只，取出基底動(dòng)脈后立即放入預(yù)冷的2.5%戊二醛磷酸緩沖液中固定，并且用1%鋨酸磷酸緩沖液后固定。丙酮酸逐級(jí)脫水，環(huán)氧樹脂包埋，半薄切片，次甲基藍(lán)天青Ⅱ染色光鏡下觀察并定位，超薄切片機(jī)切片，用枸櫞酸鉛和醋酸鈾雙重電子染色，在H-600透射電鏡下觀察。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料以±s表示，組內(nèi)計(jì)數(shù)資料采用方差分析，組間比較采用兩樣本均數(shù)的t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 大體觀察 SAH后第4天取腦組織，血液分布于腦底，以橋腦前池和基底池量最多，有血塊形成，腦底池呈暗紅色。

2.2 神經(jīng)功能缺損觀察 假手術(shù)組神經(jīng)功能缺損分級(jí)13只為1級(jí)，6只為2級(jí);其余兩組在向蛛網(wǎng)膜下腔注血前每組分別有13只為1級(jí)，6只為2級(jí)。在SAH后第3天SAH組2級(jí)4只，3級(jí)12只，4級(jí)3只;SAH+銀杏達(dá)莫組分別為10只、7只、2只。SAH組在SAH后第4天最為嚴(yán)重，其中6只為4級(jí)，10只為3級(jí)，3只為2級(jí)，SAH+銀杏達(dá)莫組在SAH第0～4天神經(jīng)功能缺損癥狀較SAH組，第4天有3只表現(xiàn)為4級(jí)，8只表現(xiàn)為3級(jí)，8只表現(xiàn)為2級(jí)。

2.3 各組血液流變學(xué)變化 SAH組全血比黏度與其他兩組比較顯著增高(P＜0.01)。SAH組血漿比黏度與假手術(shù)組顯著增高(P＜0.01)，與SAH+銀杏達(dá)莫組比較，其血漿比黏度明顯增高(P＜0.05)。SAH組纖維蛋白原(Fbg)含量與假手術(shù)組相比顯著增高(P＜0.01)，與SAH+銀杏達(dá)莫組比較明顯增高(P＜0.05)。見表1。

2.4 基底動(dòng)脈形態(tài)學(xué)觀察 SAH+銀杏達(dá)莫組與SAH組可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)空泡，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，內(nèi)彈力膜皺折;且SAH組還可見內(nèi)皮細(xì)胞脫落。假手術(shù)組未見明顯變化。見圖1，圖2。

表1 各組血液流變學(xué)變化(±s，n=14)

表1 各組血液流變學(xué)變化(±s，n=14)

與假手術(shù)組比較:1)P＜0.05;與SAH+銀杏達(dá)莫組比較:2)P＜0.05

組別 全血比黏度(ηb)(Mpa·s)血漿比黏度(ηp，Mpa·s)纖維蛋白原(FbG，g/L)假手術(shù)組3.95±0.29 1.53±0.09 3.15±0.60 SAH 組 8.34±0.461) 1.89±0.151)2)5.05±0.621)2)SAH+銀杏達(dá)莫組 5.89±0.471)1.53±0.06 3.32±0.44

圖1 光鏡下各組基底動(dòng)脈形態(tài)學(xué)觀察(×400)

圖2 電鏡下各組基底動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變

3 討論

銀杏達(dá)莫具有良好的藥物作用:①調(diào)節(jié)血流動(dòng)力學(xué):擴(kuò)張動(dòng)脈血管，降低血管壁通透性，改善水腫;②血液流變學(xué)的改善:降低缺血黏度、抑制血小板和紅細(xì)胞的高聚集性、增加紅細(xì)胞的變形性;③改善組織代謝:穩(wěn)定細(xì)胞膜、維持正常的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能;④神經(jīng)保護(hù)作用:直接保護(hù)神經(jīng)元，加強(qiáng)神經(jīng)傳導(dǎo)、加快神經(jīng)遞質(zhì)的更新。

研究證明〔2〕，銀杏達(dá)莫可以增加紅細(xì)胞變形能力和攜氧能力，從而改善缺血細(xì)胞的氧供，促進(jìn)大腦循環(huán)、代謝，改善記憶功能;銀杏內(nèi)酯特異性拮抗血小板活化因子，抑制血小板的活化與聚集，降低血液黏度;雙嘧達(dá)莫雙重阻斷血小板聚集，抑制中性粒細(xì)胞的趨化和聚集，增加缺血區(qū)的血流灌注;銀杏黃酮甙與銀杏內(nèi)酯雙向調(diào)節(jié)血管張力，糾正病理性毛細(xì)血管高滲透性，可清除自由基，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，提高超氧化物歧化酶的活性，拮抗內(nèi)皮素，抑制毛細(xì)血管通透性，抑制炎癥與過(guò)敏反應(yīng)，從而保護(hù)腦組織，改善腦缺血;白果內(nèi)酯直接保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，抑制自由基誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，加強(qiáng)神經(jīng)傳導(dǎo)，加快神經(jīng)遞質(zhì)更新，促進(jìn)神經(jīng)功能的回復(fù)。

銀杏達(dá)莫內(nèi)的各種有效成分決定了其具有多方面生物效能〔3〕，可糾正病理性毛細(xì)血管的高滲性，雙向調(diào)節(jié)血管張力，減輕血管源性及細(xì)胞性腦水腫;抗血小板活化因子，減少血小板的高聚集性;改善細(xì)胞能量代謝及末梢血液循環(huán);清除自由基，保護(hù)細(xì)胞膜，直接保護(hù)神經(jīng)元;增加毒蕈堿型膽堿能受體密度，對(duì)抗興奮性氨基酸的神經(jīng)毒性作用，從而減輕或改善腦缺血、缺氧及腦水腫的發(fā)生發(fā)展，改善腦組織的血氧供應(yīng)，減輕病損程度，促進(jìn)病變區(qū)神經(jīng)功能恢復(fù)和臨床癥狀好轉(zhuǎn)。本文證實(shí)其有效率高，顯效率顯著，且無(wú)明顯毒副作用，安全性高，故值得臨床應(yīng)用。

1 Roux S，Lofflor BM，Gray GA，et al.The role of endothelin in experimental cerebral vasospasm〔J〕.Neurosurgery，1995;37(1):78-85.

2 蔡 鴻，桂薌湘，向道康，等.杏丁與金納多對(duì)急性腦梗死患者血液流變學(xué)影響的臨床研究〔J〕.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002;12(8):484-5.

3 王筠默.銀杏的藥理研究〔J〕.中草藥，1999;29(2):9-10.