陳亞平
尿液中有形成分的檢測,是用來診斷各種腎臟疾病、泌尿系疾病的主要手段,并可以用于對疾病進行鑒別。其中白細胞是一項重要的檢測內(nèi)容,其具有吞噬、產(chǎn)生抗體、抵御病原菌等能力,很多疾病均有白細胞數(shù)量的改變[1]。本研究分析干化學(xué)法和尿沉渣鏡檢法在檢測尿液中白細胞的差異,研究干化學(xué)法的假陽性和假陰性原因,現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料 本研究標本為2010~2011年870例門診尿常規(guī)標本。其中男性410例,女性460例,年齡在7~69歲之間,平均(33.87±7.95)歲。
1.2 方法 儀器和試劑:干化學(xué)法儀器采用H-300尿液分析儀(長春瑞迪公司生產(chǎn)),試劑為原廠配套試劑。尿沉渣鏡檢法儀器采用奧林巴斯CX31顯微鏡,802臺式離心機(上海)。檢驗前首先進行實驗室質(zhì)控。實驗室工作人員嚴格按照儀器的說明書及其操作規(guī)程進行檢驗。
首先,取新鮮的尿液標本約10mL,進行干化學(xué)法檢驗,將試紙的試劑部分均進入到尿液中,靜待2s后,取出試紙,使用濾紙將多余尿液輕輕吸除,在傳輸盤上進行檢測。
隨后,使用高速離心機以1500r/min離心5min,將上清液去除,留取沉渣進行尿沉渣鏡檢。將沉渣放于載玻片,先使用低倍鏡觀察尿液中有形成分的全貌,再使用高倍鏡觀察不同視野的白細胞值,一般選擇10個視野,準確記錄。
1.3 白細胞判定標準 尿沉渣鏡檢法:每高倍視野下有5個以上白細胞為陽性;干化學(xué)分析法:白細胞在70/U以上為陽性。
假陰性:經(jīng)過干化學(xué)檢測為陰性,但鏡檢結(jié)果為陽性。假陽性:干化學(xué)法檢測為陽性,尿沉渣鏡檢法為陰性[2]。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)均錄入SPSS18.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。干化學(xué)法與鏡檢法比較采用例數(shù)(n)、百分數(shù)(%)表示,組間比較采用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05,當P<0.05時,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
以尿沉渣鏡檢法作為檢驗標準,干化學(xué)法檢測結(jié)果中,有20例假陽性,占2.29%;假陰性68例,占7.82%。2種方法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 干化學(xué)法及尿沉渣鏡檢法檢驗白細胞的比較分析[例(%)]
尿沉渣鏡檢法與干化學(xué)分析法的檢驗原理不同。干化學(xué)法對尿液中白細胞進行檢測的原理在于白細胞(粒細胞)中含有一定的酯酶,其作用在試劑帶模塊內(nèi)部的吲哚酚酯,使之產(chǎn)生吲哚酚。而吲哚酚在與試劑中的重氮鹽相結(jié)合后,可以形成紫色的縮合物。標本中白細胞越多,其顏色越深。
3.1 干化學(xué)分析法假陰性 假陰性一般與以下幾點因素有關(guān):⑴患者尿液中有較多的淋巴細胞,如腎移植患者出現(xiàn)排斥反應(yīng)時,即會有淋巴細胞在尿液中[3],而淋巴細胞內(nèi)也含有使吲哚酚酯發(fā)生反應(yīng)的酯酶,導(dǎo)致試紙變色;⑵尿液中如果有先鋒、慶大霉素等藥物,也能夠與重氮鹽結(jié)合;⑶尿液濃度過高,高蛋白尿等患者,也會出現(xiàn)假陰性。臨床研究發(fā)現(xiàn),當尿蛋白在++以上時,白細胞即為假陰性出現(xiàn),而尿糖在+++以上也可以導(dǎo)致白細胞下降。此外,當標本內(nèi)含有亞硝酸鹽也可以導(dǎo)致試紙不變色而出現(xiàn)假陰性。另外,研究認為,當檢驗溫度偏低時,也可能導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)[4]。
針對假陰性情況,醫(yī)生要注意患者是否有泌尿系感染,泌尿系感染的細菌是否含有硝酸鹽還原酶;患者尿液是否在膀胱內(nèi)停留在4h以上,且是否服用了如抗生素、維生素C等會導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)的藥物。
本次實驗結(jié)果中,有68例假陰性出現(xiàn),經(jīng)分析,42例患者尿液中存在淋巴細胞,7例患者有泌尿系感染,15例患者為高蛋白和高尿糖,4例患者在檢查前服用了抗生素類藥物。
3.2 干化學(xué)分析法假陽性 假陽性一般與以下幾點有關(guān):⑴尿液如果在膀胱內(nèi)儲存的時間較長,或者標本放置的時間較長,可能會導(dǎo)致白細胞被破壞,進而將酯酶釋放到尿液中,造成干化學(xué)分析法檢測為陽性,但是鏡檢結(jié)果卻為陰性。⑵在尿液中如果混有甲醛、膽紅素或者呋喃啶等,也會產(chǎn)生假陽性。⑶女性尿液標本容易受到各種陰道分泌物的感染,如果有扁平上皮細胞、鱗狀上皮細胞的污染[5],可能會造成干化學(xué)法檢驗陽性。
本次實驗結(jié)果中,有20例假陰性出現(xiàn),其中15例標本為女性,有較多分泌物混入,鏡檢發(fā)現(xiàn)有大量的上皮細胞,而上皮細胞有類似顆粒細胞的功能,可能導(dǎo)致其與白細胞的模塊發(fā)生反應(yīng);其余5例原因不明。
經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢法對尿液標本內(nèi)白細胞的檢驗結(jié)果盡管存在一定差異,但差異不存在統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
盡管如此,使用干化學(xué)分析法檢驗?zāi)蛞簶吮救菀资艿礁鞣N因素的影響,并可能導(dǎo)致出現(xiàn)白細胞檢測結(jié)果的假陽性和假陰性,在臨床檢驗工作中,要注意盡量避免各種干擾因素,對可疑患者,當出現(xiàn)干化學(xué)法檢測為陰性時,為了避免誤診和漏診,需要給予尿沉渣鏡檢法檢驗,不能單純依賴干化學(xué)法對患者進行診斷。
[1]Neumuller,J,Neumuller-Guber,SE,Lipovac,M et al.Immunological and ultrastructural characterization of endothelial cell cultures differentiated from human cord blood derived endothelial progenitor cells[J].Histochemistry and cell biology,2006,126(6):649-664.
[2]梁偉明,陳志偉,梁再玲,等.干化學(xué)法與沉渣鏡檢法對比檢測尿中紅細胞和白細胞[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(14):855-855,857.
[3]顧文剛,陳激揚.尿干化學(xué)法與沉渣鏡檢聯(lián)合檢測尿紅細胞及白細胞的臨床意義[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(10):1127-1128.
[4]薛冰蓉,楊渝偉,陳曦,等.UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿紅細胞、白細胞影響因素的探討[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(11):1223-1225.
[5]姜玲,程光敏,姜淑慧,等.沉渣鏡檢法和干化學(xué)法檢測尿液紅細胞和白細胞結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2011,8(21):53-55.