健心膠囊的制備及質(zhì)量控制

劉喬明，劉躍林

健心膠囊(蘇藥制字204001612)是醫(yī)院制劑，長(zhǎng)期應(yīng)用于臨床，主要用于病毒性心肌炎、心律失常等心血管疾病?，F(xiàn)將健心膠囊的制備及質(zhì)量控制方法報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

CS－9301型薄層掃描儀(日本島津公司);硅膠G、硅膠H(青島海洋化工廠(chǎng));聚酰胺－66薄膜(上海試劑四廠(chǎng))。黃芪甲苷對(duì)照品、苦參堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);健心膠囊(本院中藥制劑，批號(hào)分別為060110，060311，060530);其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

處方:黃芪 6.0 kg，苦參 2.4 kg。

制備:取黃芪1.2 kg，粉碎備用，余藥與苦參共煎2次，每次1 h，合并濾液，取上清液濃縮至稠膏狀，加入黃芪粉末，烘干，粉碎，裝0號(hào)膠囊(每粒重0.5 g)，分裝即得。

2.2 一般質(zhì)量控制項(xiàng)目

2.2.1 性狀

本品為膠囊劑，內(nèi)容物為紅棕色粉末。

2.2.2 檢查

應(yīng)符合2010年版《中國(guó)藥典(一部)》膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)各項(xiàng)規(guī)定。

2.2.3 鑒別

黃芪:取本品內(nèi)容物9 g，研細(xì)，加甲醇50 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液;加氨試液3倍量，搖勻，放置分層，取正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取缺黃芪的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液各5μL、對(duì)照品溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(13∶7∶2)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜中則無(wú)此斑點(diǎn)，見(jiàn)圖1 A。

苦參:取本品2 g，加水25 mL，超聲處理30 min，于10℃以下放置30 min使基質(zhì)凝固，濾過(guò)，取濾液5 mL，置分液漏斗中，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH至11，用三氯甲烷振搖提取3次，每次20 mL，合并三氯甲烷液，置水溶上蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含苦參的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。另取苦參對(duì)照品，加三氯甲烷制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯－丙酮－乙酸乙酯－濃氨試液(2 ∶3 ∶4 ∶0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜中則無(wú)此斑點(diǎn)。見(jiàn)圖1 B。

圖1 薄層色譜圖

2.3 黃芪甲苷含量測(cè)定

2.3.1 測(cè)定條件

薄層板:硅膠H－0.1%羧甲基纖維素鈉板，105℃活化1 h;展開(kāi)劑:氯仿－甲醇－丙酮(2∶1∶2);顯色劑:5%硫酸乙醇溶液，105℃烘5 min。單波長(zhǎng)線(xiàn)性?huà)呙?，根?jù)光譜圖確定 λS=510 nm，散射參數(shù)為 S x=3。

2.3.2 溶液制備

取本品20粒，傾出內(nèi)容物，精密稱(chēng)定，混勻，稱(chēng)取約4 g，精密稱(chēng)定，置索氏提取器中，加甲醇40 mL，加熱回流4 h，回收甲醇至近干，殘?jiān)铀?5 mL溶解，用水飽和正丁醇萃取5次(20，20，15，15，10 mL)，合并提取液，以正丁醇飽和的氨試液洗滌3次(20，20，15 mL)，棄去洗液，回收正丁醇液至干，殘?jiān)铀? mL使溶解，加至D101型大孔吸附樹(shù)脂柱上，用水50 mL洗滌，繼用70%乙醇洗脫，收集洗脫液50 mL，蒸干，殘?jiān)芗蛹状? mL溶解，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇精密制成每1 mL中約含1 mg的溶液，即得對(duì)照品溶液。

2.3.3 方法學(xué)考察

線(xiàn)性關(guān)系考察:精密吸取對(duì)照品溶液 0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 μL，分別點(diǎn)于同一薄層板上，依法展開(kāi)、測(cè)定。繪制積分值－濃度關(guān)系線(xiàn)，得一未通過(guò)原點(diǎn)的良好直線(xiàn)，得線(xiàn)性回歸方程Y=825.3+3 866.2X(r=0.999 1)，線(xiàn)性范圍為 0.54 ～5.4 μg。

穩(wěn)定性試驗(yàn):吸取同一供試品溶液5μL，點(diǎn)于薄層板上，展開(kāi)，噴霧顯色，每隔15 min測(cè)定1次斑點(diǎn)峰面積積分值。結(jié)果表明2 h內(nèi)峰面積積分值基本穩(wěn)定，RSD為2.12%(n=9)。

精密度試驗(yàn):精密吸取對(duì)照品溶液5μL，分別點(diǎn)于同一薄層板上，依法展開(kāi)掃描測(cè)定。結(jié)果平均積分值為7 754.3，RSD為2.73%(n=5)，表明具有良好的精密度。

重現(xiàn)性試驗(yàn):依法對(duì)同一批樣品進(jìn)行5次獨(dú)立測(cè)定。結(jié)果的RSD為3.82%，表明該法重現(xiàn)性良好。

回收率試驗(yàn):取已知含量樣品適量，精密稱(chēng)定，精密加入黃芪甲苷對(duì)照品適量，依法測(cè)定含量，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果平均回收率為 97.6%，RSD 為 2.1%(n=3)。

2.3.4 樣品含量測(cè)定

精密吸取供試品溶液4μL，對(duì)照品溶液2μL和3μL，分別交叉點(diǎn)于同一薄層板上，以確定的展開(kāi)劑展開(kāi)(展距8 cm)，取出，晾干，噴霧顯色。測(cè)定了6批樣品中黃芪甲苷的含量，結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果表明，健心膠囊每粒含黃芪甲苷的量應(yīng)不小于0.2 mg。

表1 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

依據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，建議健心膠囊除符合《中國(guó)藥典》有關(guān)各項(xiàng)規(guī)定外，應(yīng)采用薄層色譜法對(duì)方中黃芪、苦參進(jìn)行定性鑒別;用薄層掃描法測(cè)定健心膠囊中黃芪甲苷的含量，每粒中含黃芪甲苷應(yīng)不少于0.2 mg。所建立的質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可作為本制劑的內(nèi)在質(zhì)量控制方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄31.

[2]陳發(fā)奎.常用中草藥有效成分含量測(cè)量[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:41.