氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖力的影響

馬 沖， 路興濤， 劉 震， 馬士仲， 張?zhí)锾?/p>

（山東省泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，泰安 271000）

甜菜夜蛾［Spodoptera exigua（Hübner）]是世界性農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，主要為害花生、大豆、大蔥、甘藍(lán)等多種作物［1]。近年來(lái)該蟲(chóng)在我國(guó)多次暴發(fā)為害，2011年甜菜夜蛾在安徽蕭縣花生田嚴(yán)重發(fā)生，作物葉片平均受害率65.4%，百株平均蟲(chóng)口數(shù)68頭［2]。目前，甜菜夜蛾的田間防治主要依賴化學(xué)殺蟲(chóng)劑，殺蟲(chóng)劑釋放到田間后，除直接殺死大部分害蟲(chóng)外，隨著時(shí)間的推移，藥劑在田間降解到一定水平還會(huì)對(duì)害蟲(chóng)及天敵產(chǎn)生亞致死效應(yīng)，造成害蟲(chóng)生態(tài)學(xué)和生物學(xué)行為的改變、生殖力變化、抗藥性發(fā)展［3－4]，進(jìn)而影響害蟲(chóng)在田間的種群發(fā)展。

殺蟲(chóng)劑亞致死劑量對(duì)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響較為復(fù)雜，因殺蟲(chóng)劑種類、亞致死劑量高低及殺蟲(chóng)劑作用對(duì)象的不同而有所不同。一方面，殺蟲(chóng)劑對(duì)某些昆蟲(chóng)的增殖具有抑制作用，對(duì)害蟲(chóng)種群的增長(zhǎng)產(chǎn)生一定的影響，另一方面，一些殺蟲(chóng)劑亞致死劑量作用于昆蟲(chóng)后有刺激增殖的作用，延長(zhǎng)雌成蟲(chóng)壽命，增加產(chǎn)卵量，提高孵化率，造成害蟲(chóng)的再猖獗［5]。目前，關(guān)于氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育影響和繁殖力的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，研究氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖力的影響，可為指導(dǎo)合理利用氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱防治甜菜夜蛾，延緩甜菜夜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱抗藥性的產(chǎn)生提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試?yán)ハx(chóng)：2011年8月于泰安市范鎮(zhèn)大蔥田采集甜菜夜蛾老熟幼蟲(chóng)，室內(nèi)飼養(yǎng)3代，分別在人工飼料上飼養(yǎng)直至化蛹。將蛹放入養(yǎng)蟲(chóng)籠中羽化交配產(chǎn)卵，籠中培養(yǎng)皿內(nèi)放蘸有復(fù)合維生素糖水的脫脂棉供成蟲(chóng)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，在籠中吊掛白紙條供成蟲(chóng)產(chǎn)卵，每天將有卵塊的白紙條取出放入磨口玻璃缸中待孵化。初孵幼蟲(chóng)用毛筆挑入加有人工飼料的24孔養(yǎng)蟲(chóng)板內(nèi)飼養(yǎng)至4齡用于試驗(yàn)。各蟲(chóng)態(tài)均在溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度為50%～75%，光周期為L(zhǎng)∥D＝14h∥10h的養(yǎng)蟲(chóng)間內(nèi)飼養(yǎng)［6]。

供試藥劑及試劑：95.3%氯蟲(chóng)苯甲酰胺（chlorantraniliprole）原藥，上海杜邦農(nóng)化有限公司；97%毒死蜱（chlorpyrifos）原藥，山東勝邦魯南農(nóng)藥有限公司；吐溫－80（Tween－80），邢臺(tái)藍(lán)星助劑廠；99%丙酮，天津大茂化學(xué)試劑廠。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定

浸蟲(chóng)法：將殺蟲(chóng)劑用清水稀釋成5～6個(gè)濃度，選取生長(zhǎng)整齊一致的4齡幼蟲(chóng)浸漬，每濃度重復(fù)4次，每重復(fù)24頭試蟲(chóng)。將試蟲(chóng)在處理藥液中浸漬3s后置吸水紙上吸去多余藥液，然后放入裝有人工飼料的24孔盒內(nèi)，于溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度為50%～75%，光周期為L(zhǎng)∥D＝14h∥10h的養(yǎng)蟲(chóng)間內(nèi)正常飼養(yǎng)，處理72h后檢查結(jié)果，用鑷子輕觸無(wú)反應(yīng)者視為死亡［7]。

1.2.2 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育的影響測(cè)定

采用上述浸蟲(chóng)法分別以氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱LC10、LC30、LC50劑量處理甜菜夜蛾4齡幼蟲(chóng)，然后將處理過(guò)的幼蟲(chóng)放入裝有人工飼料的24孔盒內(nèi)，每處理重復(fù)4次，每重復(fù)24頭，于溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度為50%～75%，光周期為L(zhǎng)∥D＝14h∥10h的養(yǎng)蟲(chóng)間內(nèi)正常飼養(yǎng)，觀察并記錄幼蟲(chóng)化蛹率、蛹重、羽化率等。

1.2.3 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾繁殖力的影響測(cè)定

成蟲(chóng)羽化后，取同日羽化成蟲(chóng)按雌雄比1∶1配對(duì)，每5對(duì)置于一500mL燒杯內(nèi)作為1次重復(fù)，每處理重復(fù)4次，燒杯內(nèi)懸掛蘸有營(yíng)養(yǎng)液的棉球，懸掛白紙條供甜菜夜蛾產(chǎn)卵，用醫(yī)用紗布覆蓋燒杯口，用橡皮筋固定，置于溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度為50%～75%，光周期為L(zhǎng)∥D＝14h∥10h的養(yǎng)蟲(chóng)間內(nèi)正常飼養(yǎng)。開(kāi)始產(chǎn)卵后每天更換紗布和白紙條，記錄產(chǎn)卵量、卵塊孵化量及子代幼蟲(chóng)存活率。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用DPS7.05軟件計(jì)算氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾的亞致死劑量。不同處理間幼蟲(chóng)化蛹率、蛹重、羽化率，成蟲(chóng)產(chǎn)卵量、卵塊孵化率及子代幼蟲(chóng)存活率均采用Duncan方法進(jìn)行差異顯著性分析。校正死亡率用Abbott公式計(jì)算。

2 結(jié)果與分析

2.1 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾室內(nèi)毒力

采用浸蟲(chóng)法測(cè)定氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾4齡幼蟲(chóng)毒力，結(jié)果表明氯蟲(chóng)苯甲酰胺毒力顯著高于毒死蜱（95%置信限無(wú)交叉），就LC50來(lái)看，氯蟲(chóng)苯甲酰胺毒力為毒死蜱毒力的665.61倍；計(jì)算所得LC10、LC30、LC50值作為低劑量氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育和生殖力影響的濃度。

2.2 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育的影響

由圖1、2、3可知，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量處理甜菜夜蛾4齡幼蟲(chóng)后對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生明顯影響，化蛹率、蛹重、羽化率均隨著處理濃度的升高而下降。氯蟲(chóng)苯甲酰胺LC10、LC30、LC50劑量處理后，化蛹率分別為81.26%、70.40%、55.50%，分別低于毒死蜱的83.41%、70.84%、57.87%，且差異不顯著。除毒死蜱LC10劑量處理甜菜夜蛾化蛹率與對(duì)照差異不顯著外，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱各處理甜菜夜蛾化蛹率與對(duì)照差異均顯著（圖1）。

表1 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱對(duì)甜菜夜蛾室內(nèi)毒力

圖1 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾化蛹率的影響

由圖2可知，氯蟲(chóng)苯甲酰胺LC10、LC30、LC50處理后，甜菜夜蛾蛹重分別為93.60、88.60、77.68mg，較對(duì)照蛹重分別下降9.53%、14.36%、24.92%，分別低于毒死蜱LC10、LC30、LC50劑量處理蛹重的100.20、93.88、90.71mg，其中兩藥劑 LC10、LC50劑量處理差異顯著。

圖2 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾蛹重的影響

氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱LC30、LC50處理后，甜菜夜蛾羽化率明顯低于對(duì)照，但兩藥劑LC10劑量處理的甜菜夜蛾羽化率與對(duì)照差異不顯著，同等處理水平下，氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理的甜菜夜蛾羽化率要低于毒死蜱，其中氯蟲(chóng)苯甲酰胺LC50劑量處理的羽化率為50.08%，顯著低于毒死蜱LC50劑量處理的62.09%（圖3）。

圖3 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾羽化率的影響

2.3 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾繁殖力的影響

由圖4可知，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱處理后對(duì)甜菜夜蛾的產(chǎn)卵量產(chǎn)生一定影響，且隨著處理劑量的增高產(chǎn)卵量逐漸下降，氯蟲(chóng)苯甲酰胺LC50、LC30和毒死蜱LC50劑量處理的甜菜夜蛾單雌產(chǎn)卵量分別為451.67、589.07粒和425.22粒，與對(duì)照單雌產(chǎn)卵量786粒相比差異顯著，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱LC10劑量處理甜菜夜蛾單雌產(chǎn)卵量分別為622.47、758.83粒，與對(duì)照差異不顯著。

圖4 氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾產(chǎn)卵量的影響

氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱各劑量處理后，甜菜夜蛾幼蟲(chóng)孵化率和幼蟲(chóng)成活率分別為89.56%～91.61%、69.06%～73.38%，與對(duì)照差異不顯著，表明低濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱處理甜菜夜蛾幼蟲(chóng)后并不會(huì)對(duì)下一代幼蟲(chóng)的孵化率和存活率產(chǎn)生影響（圖5、6）。

3 討論

隨著有害生物綜合治理（IPM）理念的深入和環(huán)保意識(shí)的增強(qiáng)，殺蟲(chóng)劑亞致死劑量對(duì)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響日益受到研究者的關(guān)注。殺蟲(chóng)劑亞致死劑量對(duì)不同作用對(duì)象種群的增長(zhǎng)存在有利、不利兩方面的影響，一些殺蟲(chóng)劑被證明在亞致死劑量下對(duì)某些害蟲(chóng)增殖具有刺激作用，如湯愛(ài)兵等［8]研究表明溴氰菊酯在低劑量下可以刺激褐飛虱的增殖，徐學(xué)農(nóng)等［9]研究表明，唑螨酯亞致死劑量對(duì)山楂葉螨雌成螨具有顯著刺激生殖的作用，Nandihalli等［10]用溴氰菊酯、氯氰菊酯和氰戊菊酯常規(guī)劑量和亞致死劑量處理棉蚜，結(jié)果表明亞致死劑量比常規(guī)劑量更易引起棉蚜的再猖獗，然而更多的研究結(jié)果表明亞致死劑量的殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育往往會(huì)產(chǎn)生不利影響，許小龍等［11]研究表明，氯蟲(chóng)苯甲酰胺亞致死劑量對(duì)斜紋夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育具有明顯影響，表現(xiàn)為幼蟲(chóng)體重、蛹重減輕，幼蟲(chóng)期、蛹期延長(zhǎng)，化蛹率降低等，曾春祥等［12]通過(guò)組建實(shí)驗(yàn)種群生命表分析認(rèn)為吡蟲(chóng)啉亞致死劑量對(duì)桃蚜的脅迫效應(yīng)表現(xiàn)為降低繁殖力與縮短成蚜壽命，陶士強(qiáng)等［13]研究表明，毒死蜱LC35劑量處理朱砂葉螨卵后單雌產(chǎn)卵量顯著低于對(duì)照，López等［14]研究表明甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽亞致死劑量處理美洲棉鈴蟲(chóng)（Helicoverpa zea）成蟲(chóng)，其交配率、卵孵化率和子代幼蟲(chóng)存活率均顯著降低。本研究表明，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量能夠顯著降低甜菜夜蛾的化蛹率、蛹重、羽化率和單雌產(chǎn)卵量，對(duì)甜菜夜蛾種群的增長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響。

Abd－Elghafar等［15]研究發(fā)現(xiàn)殘留在成蟲(chóng)體內(nèi)的殺蟲(chóng)劑被轉(zhuǎn)移到精子和卵子中，可能會(huì)打亂雙親生殖生理，造成產(chǎn)卵量和孵化率下降。本研究表明，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量處理甜菜夜蛾造成產(chǎn)卵率下降，但并沒(méi)有引起卵孵化率和子代幼蟲(chóng)成活率的下降，這可能并不是藥劑殘留引起的，或者藥劑殘留并不能影響卵孵化率，王曉容等［16]研究認(rèn)為甜菜夜蛾產(chǎn)卵量與蛹重呈正相關(guān)，氯蟲(chóng)苯甲酰胺、毒死蜱處理甜菜夜蛾的產(chǎn)卵量下降可能與前期藥劑引起的蛹重下降有關(guān)，而這種情況下并不會(huì)對(duì)卵的孵化率造成影響。

一般來(lái)說(shuō)，害蟲(chóng)與殺蟲(chóng)劑接觸時(shí)間越長(zhǎng)，其亞致死效應(yīng)也就越強(qiáng)［17]，本研究中氯蟲(chóng)苯甲酰胺亞致死濃度下對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響略高于毒死蜱，這可能與氯蟲(chóng)苯甲酰胺藥劑本身的特點(diǎn)有一定關(guān)系，有研究表明氯蟲(chóng)苯甲酰胺半衰期明顯高于大多數(shù)常規(guī)殺蟲(chóng)劑，氯蟲(chóng)苯甲酰胺在甘藍(lán)上的半衰期分別為 7.2～8.9d［18]，而 毒 死 蜱 持 效 期 僅 為2.11d［19]，這就決定了在同等條件下甜菜夜蛾幼蟲(chóng)對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的接觸時(shí)間要長(zhǎng)于毒死蜱，其亞致死效應(yīng)也就相應(yīng)的較毒死蜱大。

對(duì)農(nóng)藥的評(píng)價(jià)，不能僅僅比較藥劑本身短期內(nèi)對(duì)害蟲(chóng)的直接致死作用，部分殺蟲(chóng)劑雖然對(duì)害蟲(chóng)的短期毒殺效果較差，但會(huì)對(duì)害蟲(chóng)產(chǎn)生長(zhǎng)期的致毒作用，影響害蟲(chóng)正常的生長(zhǎng)發(fā)育甚至降低害蟲(chóng)的生殖力，從而控制害蟲(chóng)種群的增長(zhǎng)。

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