當歸水提取物對小鼠放射損傷的防護作用

齊忠志

當歸是一種傘形科當歸屬多年生草本植物，其干燥的貯藏根是我國傳統(tǒng)中藥，具有悠久的藥用歷史，歷代本草均有記載。中醫(yī)的傳統(tǒng)理論認為，當歸的不同藥用部位具有不同的功效。當歸水提取物含有各種水溶性化學成分，近期研究發(fā)現(xiàn)，當歸多糖除具有清除自由基、提高免疫力和抗腫瘤功能外［1］，還具有抗輻射損傷功能，對亞急性小鼠輻射損傷有良好的防護作用［2］。

DNA是多種誘變因子危害的主要目標，許多誘變因子都可以引起DNA的損傷，導致基因突變和染色體畸變。DNA是否受到損傷取決于抗誘變物對誘變因子的拮抗作用。染色體畸變分析作為一種簡便、快速的細胞遺傳學方法，正廣泛應用于評價環(huán)境誘變劑以及放射損傷等因素對生物的危害程度。本文通過分析小鼠實驗過程中的染色體畸變率，深入探討當歸水提取物對放射損傷的防護效應。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 由吉林大學白求恩醫(yī)學院實動物中心提供的近交系昆明種小白鼠，體質量18～20 g，雌雄各半，實驗動物合格證號:SCXK(吉)2007-0003。

1.2 試劑 當歸水提取物:中藥當歸采購自吉林大藥房并經鑒定。電動粉碎機粉碎后，稱取當歸粉末6 g，300 ml去離子水浸泡1 h，煎煮3次，初次30 min，后兩次各20 min，煎煮過程中根據(jù)情況添加適量去離子水，收集三次濾液，濃縮至20 ml，每毫升含當歸相當于生藥量300 mg，4℃暫時保存，實驗前以無菌生理鹽水稀釋至所需濃度。

1.3 分組及實驗方法 實驗動物隨機分為正常對照組(生理鹽水);照射對照組;當歸抗照射實驗組(當歸各劑量+X射線全身照射)，每組6只動物，雌性雄性各半。當歸共分為三個劑量，分別為1.5 g/kg、3.0 g/kg、6.0 g/kg。生理鹽水、當歸均灌胃給藥，每10 g體重0.2 ml，連續(xù)灌胃6 d。

除正常對照組外，照射對照組及當歸各劑量組于第六天灌胃后，均接受一次性X射線全身照射，采用 SiemeneX射線治療機，將小鼠放入30 cm×30 cm×20 cm紙盒內，小鼠在盒內呈分散狀態(tài)，照射源距小鼠100 cm，射野為30 cm×30 cm，劑量率為1.5 Gy/min，總照射量為6 Gy。照射22 h后注入秋水仙素(4㎎/kg體質量)，照射24 h后，頸椎脫臼殺死所有小白鼠，剝離股骨，用濾紙將肌肉剔除干凈，剪掉骨端，以1 ml注射器吸取37℃0.075 mKcl溶液，反復沖出骨髓，充分吸打混勻后，37℃低滲20 min，甲醇:冰醋酸 =3:1固定20 min，計3次，空氣干燥法制片，10%吉姆薩染色，選擇分散好、形態(tài)好的中期分裂相檢查染色體畸變情況，每組分析250個中期分裂相。統(tǒng)計不同類型的染色體畸變，計數(shù)后，計算染色體畸變率。

1.4 統(tǒng)計學處理 實驗數(shù)據(jù)用染色體畸變的百分率±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗。

2 結果

X射線全身照射可明顯誘發(fā)小鼠骨髓細胞染色體畸變，畸變率顯著高于正常對照組(P＜0.01)，實驗中當歸三個劑量組加X射線全身照射，均可明顯降低X射線誘發(fā)的染色體畸變率，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，說明當歸水提取物對X射線誘發(fā)的遺傳損傷具有明顯的抑制作用。

表1 當歸對小鼠骨髓淋巴細胞染色體畸變的影響

3 討論

放射輻射可以導致機體出現(xiàn)多種損傷。隨著人們健康意識的不斷提高，臨床上放療的癌癥患者以及職業(yè)性受照人員的輻射性損害日益受到關注。尋找積極有效的防治藥物已成為一個迫切解決的問題。目前已知的一些具有輻射防護作用的藥物，多為含硫物質，毒性較大，所以人們從天然的藥物入手以期待開發(fā)療效佳、毒性低，可用于臨床防治放射損傷的藥物。

DNA是放射作用最基本的靶分子，許多放射生物學效應都是通過DNA損傷表現(xiàn)出來的。DNA不僅會受到放射粒子束的直接攻擊，而且還會受放射所致自由基的間接攻擊，從而引起DNA鏈斷裂、染色體重組、基因突變。

近年來，對放射損傷防護藥物的研究日益深入，研究顯示具有清熱解毒、活血化瘀、補血益氣、養(yǎng)陰升白的中草藥均有不同程度的抗輻射作用［3］。萬芬等發(fā)現(xiàn)刺五加能使胸腺細胞提前恢復正常而對輻射損傷有一定的保護和修復作用［4］。

文獻中對當歸多糖抗輻射的研究報道較多，但因中藥成分復雜，對這類藥物的化學成分及活性成分的研究還不夠深入。實驗結果證實，當歸水提取物可以有效地抑制X射線對哺乳動物遺傳物質的損傷。很多輻射防護劑通過清除自由基、抑制脂質過氧化、保護免疫系統(tǒng)以及促進受損DNA修復等途徑而發(fā)揮其抗輻射作用，而中草藥抗輻射作用的機制主要為提高生存率、清除自由基、保護DNA、保護造血系統(tǒng)及對細胞因子的誘生和調節(jié)等［5］。當歸水提取物防護輻射的具體機制是否與這些因素有關，其作用的有效部位、靶點等還有待深入研究。

由于中草藥藥源廣，毒性低，易于接受，用中草藥防治因輻射造成的機體損傷可能成為抗輻射藥物的優(yōu)勢所在。加強這方面的研究工作，進一步探討其作用機理，對開發(fā)新的抗輻射藥物具有重要意義。

［1］曹蔚，李小強，侯穎，等.當歸多糖 APS-3 c的結構特征及體外抗腫瘤作用的研究.天然產物研究與開發(fā)，2008，20:217-222.

［2］孫元琳，湯堅，顧小紅，等.當歸多糖對亞急性輻射損傷小鼠的防護作用研究.食品科學，2007，28(2):305-308.

［3］陳建業(yè).中藥放射防護劑的研究進展.癌癥，1999，18:229-231.

［4］萬芬，張世明，戎誠興.刺五加對60Co-γ射線照射后小鼠胸腺效應的實驗研究.湖北醫(yī)學院學報，1989，10(3):226-228.

［5］梁莉，李新芳.放射防護藥物的研究進展和機制探討.蘭州醫(yī)學院學報，2002，28(3):90-92.