解碼保定腺病毒

“經(jīng)與解放軍總后衛(wèi)生部核實，此次疫情確診為腺病毒55型引起的呼吸道感染?！?月27日，衛(wèi)生部新聞發(fā)言人鄧海華再次就部隊疫情進(jìn)行澄清。

此前兩天，25日，衛(wèi)生部新聞辦公室針對網(wǎng)絡(luò)上沸沸揚揚的“保定某軍隊醫(yī)院出現(xiàn)非典變異病毒”的說法發(fā)布消息，“河北省保定市解放軍第二五二醫(yī)院收治的呼吸道感染發(fā)熱病人，已排除非典、甲流、人感染高致病性禽流感等?！边@是同一事件中，衛(wèi)生部在三天內(nèi)兩次出面，對外發(fā)布部隊疫病信息。

根據(jù)保定公安部門后來公布的信息，早在2月19日，網(wǎng)上就出現(xiàn)“保定再現(xiàn)非典”的傳言?！敦斀?jīng)》記者調(diào)查了解到，在2月19日之前，病毒的全部檢驗就已經(jīng)完成，且被鎖定為腺病毒55型（Ad55）。疫情出現(xiàn)后，病患被送至河北省保定市解放軍第二五二醫(yī)院進(jìn)行隔離治療。病患表現(xiàn)出呼吸道急性感染，并伴有發(fā)熱等癥狀。醫(yī)務(wù)人員選用抗生素類藥物治療無效，于是排除了細(xì)菌引發(fā)疫情的可能。為確認(rèn)病原體，醫(yī)務(wù)人員用棉簽擦拭病患的咽喉取樣，緊急送往位于北京的解放軍疾病控制中心進(jìn)行檢測。

“各軍區(qū)疾控中心一般不具備鑒定未知病毒的條件，更多起到疫情監(jiān)控的作用。全國的樣本都送往位于北京的實驗室檢測?！币晃粎⑴c檢測的部隊專家說。

由于部隊疫情屬機(jī)密，此次疾病監(jiān)控亦完全獨立于普通民眾視線之外，相關(guān)數(shù)據(jù)也未對外發(fā)布，因此，傳言一度愈演愈烈。

追索變異基因

解放軍疾病控制中心承擔(dān)檢測工作的團(tuán)隊分為兩組，以前方采集的血清標(biāo)本和咽喉拭子為樣本，分別進(jìn)行血清學(xué)檢測和核酸檢測。

血清學(xué)檢測運用的是免疫學(xué)原理，免疫反應(yīng)具有特異性，即抗體與病毒一一對應(yīng)，可以通過已知的一方推測另一方；核酸檢測運用的則是分子生物學(xué)原理，通過解讀病毒的基因，判斷病毒的身份。

上述部隊專家告訴《財經(jīng)》記者，兩種方法都可獨立鑒定出病毒的身份，但各有利弊，為了保證試驗結(jié)果的可靠性，兩組平行開展，互為驗證，以排除“錯檢”的可能。

拿到樣本的核酸檢測團(tuán)隊首先開始基因的擴(kuò)增?；驍U(kuò)增的目的是將病毒的基因片段通過添加引物，完成在病毒體外的復(fù)制——基因序列需要被復(fù)制放大至千萬倍才可被分辨解讀。

而基因擴(kuò)增的關(guān)鍵就在于引物的選擇?！安煌牟《疽锊煌?。SARS、禽流感、腺病毒的引物互不相同，如果引物選擇錯誤，擴(kuò)增就會失敗?！边@名專家告訴《財經(jīng)》記者，引物選擇的過程本身也是一種對病毒的初篩，“既然病患出現(xiàn)了發(fā)燒和上呼吸道感染，根據(jù)經(jīng)驗就可以圈定出一些病毒”。

經(jīng)過三小時，基因擴(kuò)增完畢。添加不同引物的反應(yīng)管逐一通過電泳，以檢驗擴(kuò)增的有效性，由此將SARS、禽流感等可引發(fā)呼吸道急性感染的病毒一一排除?；驍U(kuò)增亦設(shè)立兩個平行小組。最終，兩個小組的試驗結(jié)果均鎖定在腺病毒。

腺病毒（Ad）在1953年被首次發(fā)現(xiàn)。其后每確定一種腺病毒，即按排序命名。由于不同型的腺病毒特性不同，因此，樣本被送往下一個實驗室進(jìn)行更準(zhǔn)確的鑒定——序列檢測。

序列檢測相當(dāng)于對病毒基因進(jìn)行解碼，并對照基因圖譜鎖定病毒的身份。此番被解密的基因表現(xiàn)與Ad14高度相似。Ad14是一種致病性較強的腺病毒。2006年至2007年間，美國四個州共確診了140例Ad14感染者。其中，17％的病人住進(jìn)重癥監(jiān)護(hù)室，死亡率5％。

但與以往Ad14引發(fā)的疫情相比，保定疫情表現(xiàn)不同，其住院的病人雖然也有發(fā)熱和咽喉腫痛，但多為輕癥病人，死亡病例尚未出現(xiàn)。所以，專家認(rèn)為其致病性與Ad11更接近。

隨后，研究人員從Ad14的基因骨架中找到與Ad11相似的序列。這段序列即六鄰體蛋白，該蛋白往往決定著病毒能夠引發(fā)何種類型的抗體，因此飽含抗體的血清都是依據(jù)六鄰體蛋白產(chǎn)生。

經(jīng)過五個多小時的基因序列分析，研究員最終判定，該病毒與2006年在陜西岐山暴發(fā)的病毒QS-DLL極為相似，屬于同一個祖先，即Ad55。

識破“特洛伊木馬”

核酸檢測完成不久，血清學(xué)組也加班加點地趕出檢測結(jié)果，樣品病毒被判定為Ad11?！捌鋵嵾@算是對核酸檢測結(jié)果的一種證實?！鄙鲜霾筷爩＜医忉屨f，兩組檢測結(jié)果均為腺病毒，排除了實驗被污染、誤檢的可能，再加上Ad55的血清學(xué)反應(yīng)本身就與Ad11一致，因此，樣本病毒最終被確定為Ad55。

Ad55是在中國最早發(fā)現(xiàn)并被鑒定，2009年才獲正式命名。其由兩種腺病毒重組產(chǎn)生，一種是腎臟病毒（Ad11），一種是呼吸道病原體（Ad14）。

2006年，陜西岐山縣一所中學(xué)內(nèi)暴發(fā)發(fā)熱疫情。中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所和陜西省疾病預(yù)防控制中心合作對該疫情展開研究，將病毒命名為QS-DLL。這也是該病毒首次在中國出現(xiàn)聚集性病例。

研究人員通過對QS-DLL進(jìn)行血清學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)該種病毒可以與Ad11抗體結(jié)合。于是，QS-DLL被判定為Ad11的變異體。2010年前，國際間對腺病毒的分型一直以血清型為準(zhǔn)。“但是，僅用血清型對病毒進(jìn)行分型是片面的?！蹦戏结t(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院張其威博士向《財經(jīng)》記者介紹，“血清型取決于六鄰體蛋白，僅由約900個氨基酸組成，相較于腺病毒整個基因組來說，這只是很短的一部分，不能如實反映病毒及其他蛋白的情況?！?/p>

美國國立衛(wèi)生研究院人類腺病毒研究組主席唐納德·司徒（Donald Seto）長期研究腺病毒，他在2009年與中方展開合作，嘗試以全基因組序列對QS-DLL進(jìn)行再分型，張其威博士也參與了這次研究。他們很快發(fā)現(xiàn)這是一種不尋常的呼吸道病原體，“它由腎臟病毒Ad11和呼吸道病原體Ad14重組產(chǎn)生，重組后的病毒對人體免疫系統(tǒng)來說就如同‘特洛伊木馬’，它看起來很像腎臟病原體，實際上攻擊的卻是呼吸系統(tǒng)”。唐納德·司徒向《財經(jīng)》記者解釋。

由此QS-DLL被確定為一種新型的重組腺病毒，且被命名為Ad55。唐納德·司徒特意強調(diào)，55型的“型”與11型不同，前者為基因組型（type），后者為血清型（serotype）。目前，腺病毒家族已有論文證實的共55種，前51種以血清型命名，后4種以基因組型命名。

“Ad55型并不是第一個也不會是最后一個重組的腺病毒?，F(xiàn)在越來越多的腺病毒出現(xiàn)了重組。”張其威說。

Ad55的未解之謎

保定疫情病毒檢測整個過程耗時約48小時。

據(jù)衛(wèi)生部公布，截至2月25日8時，發(fā)熱病例以輕癥為主，無危重病人，無死亡病例。但并未披露具體感染人數(shù)。

上述部隊專家表示，保定疫情之前，部隊就曾檢測出過腺病毒。為了全面準(zhǔn)確地了解此次病毒，實驗室對Ad55做了全基因組分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)保定疫情的腺病毒與2006年陜西岐山疫情雖同屬一個祖先，不過經(jīng)過六年的繁衍，病毒也發(fā)生了些許變化，但是總體變化不大。

“腺病毒作為以DNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳特性較為穩(wěn)定，基因較難發(fā)生突變?！碧萍{德·司徒印證了此說法。

通過分析病毒全部基因組，可以部分預(yù)測病毒的性狀。但是，對Ad55的致病性和傳染性，目前科學(xué)界還未有統(tǒng)一的說法。原因是Ad55被定性至今三年來，在中國被明確的規(guī)模暴發(fā)僅兩次，另外，由于個體抵抗力差異很大，由此判斷其致病性及傳播性很難。

但是，部分信息可以從已發(fā)生的疫情進(jìn)行推斷?？梢钥隙ǖ氖?，病毒基因變異得越小，病毒的特性改變也會越少。因此，從已發(fā)生的疫情可以一窺Ad55的致病性和傳播性。

以陜西岐山疫情為例，2006年3月7日，當(dāng)?shù)匾幻咧猩霈F(xiàn)發(fā)熱癥狀，體溫達(dá)38.5攝氏度。隨后一個月中，共出現(xiàn)254人感染，其中一名原先患有骨髓巨幼細(xì)胞性貧血癥的高中生死亡。

此前2005年，新加坡也曾分離出一種相似的株體，被稱為SNG122。該病毒與2006年岐山病毒含有同樣的基因組，但也存在一定差異。“我們分析認(rèn)為這兩株分離出的病毒有著同樣的祖先。”唐納德·司徒說，“毒株在新加坡也引發(fā)了相似的疫病，共254名感染者，未出現(xiàn)死亡病例?！?/p>

依據(jù)已有案例，張其威判斷，就目前流行的情況看，這種新病毒的傳染性比較高，只要具備合適的條件，Ad55有可能波及老人和兒童，“據(jù)我推測，重組后的病毒比重組前的兩種病毒對人類的危害性更大，更容易逃避人體自身的免疫抵抗，使人體不能輕易清除它”。

唐納德·司徒也認(rèn)為，該病毒有大范圍傳播的可能，但不會產(chǎn)生SARS那樣的影響。因為SARS致病性很強，可致使身體健康的人死亡，而腺病毒僅表現(xiàn)出對患基礎(chǔ)性疾病的人有生命威脅。

只要人群聚集，腺病毒都可能發(fā)生一定范圍內(nèi)的傳播，由于其癥狀與感冒相似，并不引人重視。“不過，即使是感冒這樣的疾病，也會影響部隊的戰(zhàn)斗力，所以像腺病毒、流感等常見病，部隊常備檢測所需材料?！鄙鲜霾筷爩＜艺f，目前全球醫(yī)學(xué)界對Ad55了解甚少，尚有諸多未知待突破，“誰也不知道病毒是在什么時候傳入中國，也沒有人知道病毒在哪里、在什么地方完成的基因重組?！?/p>

雖然最早被準(zhǔn)確鑒定的Ad55疫情出現(xiàn)在中國，但是這并不足以作為病毒發(fā)源地的判定依據(jù)。因為基因重組過程必須在感染對象體內(nèi)完成，這意味著只有一個人同時感染了Ad11和Ad14，重組才有可能發(fā)生。中國常見的腺病毒類型為3型和7型，11型也曾在中國檢測出來，但還沒有信息表明，中國出現(xiàn)過14型或14型變異體。

若想對腺病毒進(jìn)行更深入的分析，需要為腺病毒建立更廣泛、全面的監(jiān)控資料。中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所研究員許文波表示：“與世界大多數(shù)國家一樣，中國目前還沒有建立腺病毒感染常規(guī)監(jiān)測點?！?/p>