甘藍(lán)型油菜與菘藍(lán)原生質(zhì)體融合及植株再生體系的研究

杜雪竹 李再云

摘要：以甘藍(lán)型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）和菘藍(lán)（Ｉｓａｔｉｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）葉片為材料提取原生質(zhì)體，采用ＰＥＧ—高鈣高ｐＨ法融合親本原生質(zhì)體，采用固液雙層培養(yǎng)法誘導(dǎo)愈傷組織的形成。研究適宜原生質(zhì)體分離的酶種類及濃度，并考察了激素種類和用量對愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響。結(jié)果表明，５ ｍｇ／Ｌ纖維素酶＋３ ｍｇ／Ｌ離析酶適合甘藍(lán)型油菜和菘藍(lán)的酶解。各培養(yǎng)基中適宜的激素濃度分別為，誘導(dǎo)培養(yǎng)基ＰｅｌｌＢ １．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．25 ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ；增殖培養(yǎng)基ＰｅｌｌＣ ２．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ；分化培養(yǎng)基ＰｅｌｌＥ ２．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．０２ ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ。獲得了１５株再生植株，雜種幼苗葉片均呈深綠色，葉表面覆有厚的蠟質(zhì)，葉片肥厚，植株在成熟期時(shí)株高比甘藍(lán)型油菜矮，開花較晚，雄蕊發(fā)育不完全，雜種體細(xì)胞染色體數(shù)目為４８～６６。

關(guān)鍵詞：甘藍(lán)型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）；菘藍(lán)（Ｉｓａｔｉｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）；原生質(zhì)體融合；植株再生