西瓜霜噴劑改善口腔潰瘍大鼠癥狀及相關(guān)機(jī)制探討

張曉春

[摘要] 目的 探討西瓜霜噴劑對口腔潰瘍大鼠的改善作用及相關(guān)機(jī)制。 方法 通過石碳酸燒灼法制備口腔潰瘍SD大鼠40只，隨機(jī)分為西瓜霜噴劑組和生理鹽水組，處理1周后觀察口腔潰瘍大鼠的癥狀改善情況，并檢測血漿炎性因子水平（IL-2、IL-4、IL-6、IL-8）和T細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）變化情況。 結(jié)果 ①西瓜霜噴劑組的治療總有效率和指標(biāo)改善情況均優(yōu)于生理鹽水組；②西瓜霜噴劑可改善口腔潰瘍大鼠的血漿IL-2降低水平和IL-4、IL-6、IL-8升高的水平，并恢復(fù)口腔潰瘍大鼠的T細(xì)胞CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平升高、CD8+水平降低。 結(jié)論 西瓜霜噴劑可改善口腔潰瘍大鼠癥狀，機(jī)制可能是通過降低機(jī)體的炎癥反應(yīng)水平和糾正免疫功能紊亂來加快黏膜愈合。

[關(guān)鍵詞] 西瓜霜噴劑；口腔潰瘍；癥狀

[中圖分類號] R781.5[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A[文章編號] 1673-9701（2012）12-0009-02

口腔潰瘍是一種發(fā)病率較高的口腔黏膜疾病，主要特征是周期性發(fā)病并伴有燒灼性痛，同時潰瘍部分易感染，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和組織壞死[1]。研究認(rèn)為導(dǎo)致口腔潰瘍的病因較多，如免疫紊亂、藥物刺激和細(xì)菌感染等[2]。西瓜霜是一種中藥，常用于口腔潰瘍的治療[3]，但目前作用機(jī)制還不清楚，考慮到口腔潰瘍炎癥反應(yīng)較高和免疫紊亂等表現(xiàn)，故推測西瓜霜可通過降低機(jī)體的炎癥反應(yīng)水平和糾正免疫功能紊亂來治療口腔潰瘍。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

選取9周齡的雄性Sprague Dawley大鼠（北京維通利華公司）60只，體重（234.6±5.3）g，將其中40只給予石碳酸燒灼法制備口腔潰瘍大鼠（方法見1.2），并隨機(jī)分為西瓜霜噴劑組和生理鹽水組；西瓜霜噴劑組給予西瓜霜噴劑噴于創(chuàng)面上（桂林三金藥業(yè)股份有限公司），生理鹽水組僅給予生理鹽水處理，每天噴藥6次，共持續(xù)1周。

1.2 口腔潰瘍動物模型的制備

采用石碳酸燒灼法制備模型[4]，具體步驟如下：①將小棉球置于玻璃管的一端（直徑為2 mm）并保持與管口平齊；②向管內(nèi)滴入90%的石碳酸至小棉球浸濕；③與口腔黏膜接觸30 s可發(fā)現(xiàn)白色損傷。造模成功標(biāo)準(zhǔn)：大鼠流出大口水并伴有口角邊潮濕，黏膜紅腫。

1.3 治療效果

根據(jù)口腔潰瘍癥狀將治療效果分為顯效、有效、無效三種情況。顯效：潰瘍愈合且紅腫癥狀消失；有效：潰瘍面積縮小且仍可見紅腫；無效：潰瘍面積縮小或者增大。此外，統(tǒng)計大鼠的每天進(jìn)食量、體重、紅腫消失時間、潰瘍消失時間。

1.4 血漿生化指標(biāo)檢測

觀察潰瘍癥狀后行靜脈取血，并置于含EDTA的抗凝管中，高速離心（10 000 g×30 min），保留上清。采用Elisa法檢測血漿中的IL-2、IL-4、IL-6、IL-8水平，采用流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用成組t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，以上數(shù)據(jù)分析均采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件包，以P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 西瓜霜的治療效果

西瓜霜噴劑組的治療總有效率高于生理鹽水組，見表1；且進(jìn)食量等指標(biāo)好于生理鹽水組，見表2。

3討論

口腔潰瘍不僅是一種簡單的口腔黏膜疾病，同時還伴有炎癥反應(yīng)和免疫紊亂，因此緩解嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)和免疫紊亂也是治療該病的關(guān)鍵[5]。西瓜霜是一種常用的口腔潰瘍治療藥物，但目前缺乏其對炎癥反應(yīng)和免疫紊亂影響的研究，因此本研究具有一定的理論和臨床意義。

研究發(fā)現(xiàn)西瓜霜治療口腔潰瘍的有效率及癥狀改善上均優(yōu)于生理鹽水組，表明西瓜霜療效顯著。對口腔潰瘍大鼠的血漿炎性因子以及T細(xì)胞亞群的研究發(fā)現(xiàn)血漿IL-2水平降低，而IL-4、IL-6、IL-8、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高、CD8+水平降低，表明口腔潰瘍可導(dǎo)致嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)和免疫紊亂[6,7]。魏秀峰等[8]研究也證實(shí)口腔潰瘍患者的IL-2的水平較低，且抑制性T細(xì)胞的數(shù)量增加，提示口腔潰瘍患者出現(xiàn)免疫功能紊亂或低下，治療后抑制性T細(xì)胞和IL-2恢復(fù)正常。IL-6水平升高在口腔潰瘍的發(fā)病過程中也起到一定作用，如王亞敏等[9]發(fā)現(xiàn)口腔潰瘍大鼠的IL-6升高，治療后IL-6降低且癥狀改善。目前關(guān)于口腔潰瘍炎癥反應(yīng)的研究主要集中在IL-2和IL-6水平上，對其他炎性因子缺少研究，因此本文研究了IL-8和IL-4水平。采用西瓜霜治療后，各指標(biāo)均恢復(fù)正常水平，如IL-2的水平升高且IL-6和IL-8的水平降低，表明西瓜霜治療可以減輕炎癥反應(yīng)，這與口腔潰瘍的紅腫炎性反應(yīng)癥狀的改善一致。

T細(xì)胞在免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用，可根據(jù)表面抗原分為CD4+和CD8+細(xì)胞兩種，CD4+主要在輔助性T細(xì)胞表面表達(dá)，而CD8+主要在抑制性T細(xì)胞中表達(dá)，而CD3+主要在成熟性T細(xì)胞表面表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)胞CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高、CD8+降低，表明機(jī)體內(nèi)免疫紊亂，與安肅英等[10]對哮喘兒童免疫紊亂時T細(xì)胞亞群的結(jié)果一致。此外，表達(dá)CD4+細(xì)胞分為Th1和Th2細(xì)胞，前者主要分泌IL-2，而后者主要分泌IL-4、IL-6、IL-8，二者借助細(xì)胞因子相互調(diào)節(jié)。本研究表明口腔潰瘍大鼠中IL-4，IL-6，IL-8水平升高，IL-2水平減低，提示口腔潰瘍下Th2細(xì)胞功能亢進(jìn)，而Th1細(xì)胞處于抑制狀態(tài)，可能是口腔潰瘍免疫紊亂的基礎(chǔ)；同時西瓜霜也可能是通過恢復(fù)Th1/ Th2水平來改善口腔潰瘍紅腫和潰瘍癥狀。

綜上所述，西瓜霜噴劑可改善口腔潰瘍大鼠癥狀，機(jī)制可能是降低機(jī)體的炎癥反應(yīng)水平和糾正免疫功能紊亂來加快黏膜的愈合。