復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀對(duì)女性尖銳濕疣患者Th1/Th2 細(xì)胞因子的影響及療效觀察

徐學(xué)娟 馬學(xué)良 郭洪飛

[摘要] 目的 探討復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀對(duì)女性尖銳濕疣患者Th1/Th2 細(xì)胞因子的影響及療效。 方法女性尖銳濕疣患者70例，隨機(jī)分為兩組：復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組；單純高頻電刀治療2組。治療前及治療后1個(gè)月分別用ELISA 法檢測(cè)各組患者外周血細(xì)胞因子IL—2、IL—4、IL—10及IFN—γ的表達(dá)水平。另設(shè)健康女性對(duì)照組25例，檢測(cè)項(xiàng)目同上。 結(jié)果 ①?gòu)?fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組療效明顯高于單純高頻電刀治療2組（χ2 =5.29， P < 0.05）；②女性尖銳濕疣患者與健康女性外周血Th1/Th2 細(xì)胞因子的表達(dá)比較：女性尖銳濕疣患者外周血中Th1型細(xì)胞因子IL—2（t = 4.012， P < 0.05）和IFN—γ（t=3.880， P < 0.05）的表達(dá)水平顯著降低；而Th2型細(xì)胞因子IL—4（t = 2.694， P < 0.05）和IL—10（t = 3.069， P < .05）的表達(dá)水平顯著升高；③治療1個(gè)月后復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組相比單純高頻電刀治療2組對(duì)Th1/Th2 平衡具有更明顯的調(diào)節(jié)作用。 結(jié)論 復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療女性尖銳濕疣可提高療效，通過(guò)調(diào)節(jié)患者Th1/Th2 細(xì)胞因子的平衡狀態(tài)，改善患者的細(xì)胞免疫功能。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)方甘草酸苷；高頻電刀；尖銳濕疣；Th1/Th2 細(xì)胞因子

[中圖分類號(hào)] R711.7[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673—9701（2012）25—0070—03

The influence of compound glycyrrhizin plus high frequency radio—surgery procedures on Th1/Th2 related cytokines and curative effect of female condyloma acuminatum patients

XU Xuejuan1MA Xueliang2GUO Hongfei2

1.Department of Obstetrics and Gynecology， Tengzhou Central People′s Hospital Affiliated to Jining School of Medicine， Tengzhou 277500， China； 2.Department of Dermatology，Tengzhou Central People′s Hospital Affiliated to Jining School of Medicine， Tengzhou 277500， China

[Abstract] Objective To observe the influence of compound glycyrrhizin on Th1/Th2 related cytokines of female patients with condyloma acuminatum （CA） after high frequency radio—surgery procedures treatment. Methods Totally 70 cases of female CA were randomly divided into two groups. The first group was treated with compound glycyrrhizin after removed by high frequency radio—surgery procedures. The second group was only removed by high frequency radio—surgery procedures. In the groups above，the levels of IL—2， IL—4， IL—10 and IFN—γ in serum of female CA and control group were determined by ELISA before therapy and one month after therapy. Another control group was made up of twenty—five healthy cases accepting the same assays as the above. Results （1）The efficacy in the first treatment group was better than the second group（χ2=5.29， P < 0.05）；（2）Compared with the control group，the levels of IL—2 （t = 4.012， P < 0.05） and IFN—γ （t = 3.880， P < 0.05） in patients with female CA were lower before treatment； While the levels of IL—4（t = 2.694，P < 0.05） and IL—10 （t = 3.069， P < 0.05） were higher before treatment； （3）Compared with the second treatment group，the first treatment group has more significant regulatory role for Th1/Th2 related cytokines. Conclusion The compound glycyrrhizin plus high frequency radio—surgery procedures can improve efficacy and the immune function state by regulate the balance of Th1/Th2 related cytokines in the female CA.

[Key words] Compound glycyrrhizin； High frequency radio—surgery procedures； Condyloma acuminatum； Th1/Th2 related cytokines

尖銳濕疣（condyloma acuminatum，CA）是性傳播疾病中發(fā)病率較高的疾病之一，是由人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）引起的性傳播疾病。目前普遍認(rèn)為細(xì)胞免疫功能的變化與CA 的發(fā)生、轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)。臨床上通常用激光、冷凍、電灼或化學(xué)腐蝕等方法去除疣體，但治療后易復(fù)發(fā)。為探討治療CA的有效方法和降低其復(fù)發(fā)率，我科應(yīng)用復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療女性尖銳濕疣，同時(shí)檢測(cè)患者外周血Th1/Th2 細(xì)胞因子的表達(dá)水平，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1～12月在我院婦科和皮膚性病科門診診治的尖銳濕疣患者70例，年齡21～53歲，平均43.8歲，診斷標(biāo)準(zhǔn)按照2003年衛(wèi)生部制定的尖銳濕疣診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。排除近期患有其他急慢性感染性疾病患者、自身免疫性疾病患者、應(yīng)激狀態(tài)如妊娠、哺乳及長(zhǎng)期服用避孕藥等。將患者隨機(jī)分為治療1組與治療2組各35例，兩組患者在癥狀、年齡、病情程度等方面無(wú)顯著性差異，具有可比性（P > 0.05）。對(duì)照組選擇同期在我院體檢中心體檢的健康女性25例，年齡18～50歲，平均44.5歲。

1.2 方法

治療前常規(guī)消毒，根據(jù)病灶部位、大小注射適量2%利多卡因局部麻醉，對(duì)病灶逐個(gè)燒灼。治療1組35例患者首先應(yīng)用高頻電刀治療，術(shù)后口服復(fù)方甘草酸苷片（商品名美能，日本米諾發(fā)源制藥株式會(huì)社生產(chǎn)，深圳健安醫(yī)藥有限公司總經(jīng)銷）50 mg，3次/d，并維持1個(gè)月；治療2組35例患者單獨(dú)使用高頻電刀治療，未進(jìn)行任何與免疫有關(guān)的治療。兩組均徹底清除疣體，術(shù)后保持傷口清潔，并外用莫匹羅星膏預(yù)防傷口感染。連續(xù)觀察1個(gè)月并隨訪6個(gè)月，對(duì)比兩組患者治療后的療效。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

治療后參照文獻(xiàn)[2]對(duì)患者的恢復(fù)情況進(jìn)行了跟蹤調(diào)查。①治愈：疣體完全消失，6個(gè)月內(nèi)無(wú)新的疣體出現(xiàn)。②顯效：術(shù)后3個(gè)月內(nèi)無(wú)新的疣體出現(xiàn)。③有效：術(shù)后1個(gè)月無(wú)新的疣體出現(xiàn)。④無(wú)效：疣體去除后，1個(gè)月內(nèi)原皮膚損害處或周圍出現(xiàn)新的疣體。有效率=痊愈率+顯效率。

1.4 外周血Th1/Th2細(xì)胞因子表達(dá)水平的測(cè)定

分別在開(kāi)始治療前和首次治療后1個(gè)月采集兩組患者空腹肘靜脈血4 mL，以2 500 r/min離心10 min后分離血清，保存于—70 ℃冰箱備檢。測(cè)定外周血IL—2、IL—4、IL—10和IFN—γ濃度采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 檢測(cè)方法，試劑盒由深圳晶美生物技術(shù)公司提供，操作方法嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料應(yīng)用t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩治療組患者療效比較

復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組：治愈28例，顯效5例，有效2例，有效率達(dá)94.3%；而單純高頻電刀治療2組：治愈22例，顯效4例，有效6例，無(wú)效3例，有效率僅74.3%。兩組有效率相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.29，P < 0.05），說(shuō)明高頻電刀術(shù)后聯(lián)合應(yīng)用復(fù)方甘草酸苷治療女性尖銳濕疣效果更佳。見(jiàn)表1。

2.2 治療前女性尖銳濕疣患者和健康女性外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)

女性尖銳濕疣患者與健康女性相比：Th1型細(xì)胞因子IL—2（t = 4.012，P < 0.05）和IFN—γ（t = 3.880，P < 0.05）的表達(dá)水平顯著降低；而Th2型細(xì)胞因子IL—4（t = 2.694，P < 0.05）和IL—10（t = 3.069，P < 0.05）的表達(dá)水平顯著升高，說(shuō)明與健康女性相比，女性尖銳濕疣患者存在Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)失衡，導(dǎo)致患者細(xì)胞免疫功能降低。見(jiàn)表2。

表2 治療組與對(duì)照組外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)（x±s，pg/mL）

2.3 治療1個(gè)月后兩治療組女性尖銳濕疣患者外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)

治療1個(gè)月后，治療1組與治療2組相比：Th1型細(xì)胞因子IL—2（t = 2.701，P < 0.05）、IFN—γ（t = 2.490，P < 0.05）和 Th2型細(xì)胞因子IL—4（t = 2.416，P < 0.05）、IL—10（t = 2.408，P < 0.05）表達(dá)水平均有顯著性差異。說(shuō)明復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組相比單純高頻電刀治療2組對(duì)Th1/Th2細(xì)胞因子的平衡狀態(tài)具有更明顯的調(diào)節(jié)作用。見(jiàn)表3。

表3 治療1個(gè)月后兩治療組外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)（x±s，pg/mL）

3 討論

宿主的免疫功能特別是細(xì)胞免疫功能狀態(tài)在決定HPV清除、持續(xù)感染、復(fù)發(fā)或病損惡變上起重要作用，與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。機(jī)體主要通過(guò)細(xì)胞免疫應(yīng)答清除HPV，而細(xì)胞免疫中T細(xì)胞是一類重要的免疫活性細(xì)胞，T細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫是機(jī)體控制感染的關(guān)鍵[3]，它不僅直接介導(dǎo)細(xì)胞免疫功能，而且對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)起著重要的作用，它與NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等一起構(gòu)成了機(jī)體抗病毒免疫的主體。

人體內(nèi)靜止的CD4+T細(xì)胞在抗原刺激下，可分化為Th1和Th2兩種不同亞型，前者分泌IL—2、IL—12、IFN—γ等細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫；后者分泌IL—4、IL—5、IL—6、IL—9和IL—10 等細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)體液免疫。國(guó)內(nèi)外大量基礎(chǔ)和臨床研究表明，尖銳濕疣患者血清Th1 型細(xì)胞因子IL—2、IL—12、IFN—γ等水平明顯降低；血清中Th2 型細(xì)胞因子IL—4、IL—10等明顯升高[4]。涂權(quán)梅等研究表明，女性CA 患者在免疫應(yīng)答過(guò)程中存在Th1和Th2細(xì)胞因子交互作用失衡的現(xiàn)象，造成Th1/Th2 平衡向Th2 方向漂移，從而引起一系列細(xì)胞免疫抑制效應(yīng)，不能有效進(jìn)行細(xì)胞免疫應(yīng)答和清除HPV，這也可能是病毒發(fā)生免疫逃逸引起免疫損傷的一種機(jī)制，導(dǎo)致CA的遷延和復(fù)發(fā)。因此，女性尖銳濕疣患者Th1/Th2 細(xì)胞因子平衡狀態(tài)的異常，對(duì)該病的預(yù)后和轉(zhuǎn)歸起著決定性作用[5]。

本文選取70例女性尖銳濕疣患者，觀察患者外周血中Th1/Th2 細(xì)胞因子的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與健康女性相比，女性尖銳濕疣患者外周血中Th1型細(xì)胞因子IL—2和IFN—γ的表達(dá)水平顯著降低；而Th2型細(xì)胞因子IL—4和IL—10表達(dá)水平顯著升高，與國(guó)內(nèi)外先前的研究一致，表明女性尖銳濕疣患者Th1/Th2 細(xì)胞因子的平衡狀態(tài)存在異常，導(dǎo)致患者的細(xì)胞免疫功能受到抑制，可能影響患者的療效和預(yù)后。

目前，尖銳濕疣的治療多是采用物理、化學(xué)、免疫或手術(shù)的方法把疣體皮損去除，但治療后復(fù)發(fā)的問(wèn)題到目前為止仍未能得到根本的解決。國(guó)內(nèi)外的學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[5，6]，反復(fù)發(fā)作的CA患者存在細(xì)胞免疫功能異常，并因此推斷細(xì)胞免疫系統(tǒng)缺陷可能是某些CA反復(fù)發(fā)作的原因。因此，提高患者的細(xì)胞免疫功能是降低尖銳濕疣高復(fù)發(fā)率的主要途徑[7]。物理療法中高頻電刀術(shù)去除疣體，可清除大部分病毒，手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)小，術(shù)后創(chuàng)面愈合快，可作為尖銳濕疣患者的初步治療。術(shù)后加用免疫調(diào)節(jié)劑輔助治療可能是提高患者免疫功能及預(yù)防其復(fù)發(fā)的較好選擇。

復(fù)方甘草酸苷是以甘草酸為主藥，配以甘氨酸和半胱氨酸（片劑：蛋氨酸）制成的復(fù)方制劑。甘草酸具有調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化增殖、提高巨噬細(xì)胞吞噬功能[8]、促進(jìn)IL—2和IFN—γ產(chǎn)生[9]、誘導(dǎo)NK細(xì)胞活化、增強(qiáng)胸腺外T細(xì)胞分化等免疫調(diào)節(jié)作用。復(fù)方甘草酸苷還能通過(guò)誘導(dǎo)多種酶的效應(yīng)而減弱或阻斷病毒復(fù)制[10]。復(fù)方甘草酸苷具有抗炎、抗過(guò)敏、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等作用，不能簡(jiǎn)單地把它歸為免疫抑制劑或免疫增強(qiáng)劑，實(shí)際上它可能是具有“雙向”作用的免疫調(diào)節(jié)劑。薛競(jìng)等將120例尖銳濕疣患者隨機(jī)分成2組，治療組采用高頻電針燒灼患處皮疹，術(shù)后靜脈滴注復(fù)方甘草酸苷注射液10 d后口服復(fù)方甘草酸苷片3個(gè)月，對(duì)照組僅采用高頻電針燒灼患處皮疹。結(jié)果顯示治療組較對(duì)照組療效好，復(fù)發(fā)率低[11]。劉麗觀察也發(fā)現(xiàn)草分枝桿菌聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷片是預(yù)防電離或微波治療后尖銳濕疣復(fù)發(fā)的有效藥物，是一種安全、有效、不良反應(yīng)輕、患者耐受性好的治療方法[12]。

我們將70例女性尖銳濕疣患者隨機(jī)分為復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療1組和單純高頻電刀治療2組，分別觀察療效，并檢測(cè)治療1個(gè)月后患者外周血Th1/Th2 細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果表明，復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療女性尖銳濕疣療效更佳（χ2=5.29，P < 0.05），且復(fù)發(fā)率低，多數(shù)患者（80.0%）能一次性治愈；治療1個(gè)月后，治療1組與治療2組相比，患者外周血中Th1型細(xì)胞因子IL—2（t = 2.701，P < 0.05）、IFN—γ（t = 2.490，P < 0.05）和Th2型細(xì)胞因子IL—4（t = 2.416，P < 0.05）、IL—10（t = 2.408，P < 0.05）的表達(dá)水平均有顯著性差異，說(shuō)明復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療能明顯改善患者的Th1/Th2 平衡狀態(tài)，提高患者的細(xì)胞免疫功能。因此，我們認(rèn)為復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合高頻電刀治療女性尖銳濕疣是目前較為理想的治療方法，值得臨床推廣應(yīng)用。

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（收稿日期： 2012—07—10）