天花粉蛋白（TCS）誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及其抗腫瘤作用機(jī)制的研究進(jìn)展

張 鐸（綜述） 陶 磊（審校） 路麗明

（復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院耳鼻喉科 上海 200031）

天花粉蛋白（trichosanthin，TCS）是從葫蘆科植物栝蔞的塊根中提取出來(lái)的相對(duì)分子質(zhì)量（Mr）為27 000的單鏈核糖體活性抑制蛋白（ribosome inactivating protein，RIP），TCS成熟肽由247個(gè)氨基酸殘基組成，PI為9．4［1］。臨床研究發(fā)現(xiàn)TCS具有多種藥理學(xué)活性，可用于治療宮外孕、絨毛膜上皮細(xì)胞癌、惡性葡萄胎等，對(duì)于宮頸癌及白血病等腫瘤也有不同程度的抑制作用［2］。體外研究表明TCS還具有抗病毒（如 HIV），激發(fā)調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）及協(xié)同進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)等功效［3－4］。

雖然TCS具有多種藥理活性，但其明確的作用機(jī)制尚未完全闡明。近年來(lái)，對(duì)TCS抗腫瘤的作用機(jī)制存在多種不同觀點(diǎn)，一種觀點(diǎn)認(rèn)為，TCS作為RIP通過(guò)不可逆地抑制腫瘤細(xì)胞蛋白合成來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)；另有研究發(fā)現(xiàn)TCS可誘導(dǎo)某些腫瘤細(xì)胞凋亡［2－3］；還有研究表明TCS的抗腫瘤作用并非單一途徑，而是通過(guò)聯(lián)合作用于腫瘤組織而殺傷腫瘤細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，TCS的作用可能與其劑量有關(guān)，高劑量（＞100μg／mL）時(shí)，TCS可阻斷蛋白質(zhì)合成；中等劑量（5～50μg／mL）時(shí)，TCS可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；低劑量（＜1μg／mL）時(shí)，TCS可誘導(dǎo)免疫抑制［5］。本文就近年來(lái)TCS抗腫瘤作用機(jī)制的研究進(jìn)展加以綜述。

TCS誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡凋亡又稱為細(xì)胞的程序性死亡（program cell death，PCD），近年來(lái)發(fā)現(xiàn)多種化療藥物可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮藥理作用［6］。在研究TCS抗腫瘤作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)TCS可誘導(dǎo)多種細(xì)胞凋亡。黃益玲等［7］研究發(fā)現(xiàn)，TCS能誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細(xì)胞中包括NOP56、TNFSF10、CASP9、DFFB等在內(nèi)的62個(gè)與凋亡密切相關(guān)的基因表達(dá)上調(diào)；還能誘導(dǎo)包括COL9A3、MGST3、LGALS3BP等在內(nèi)的16個(gè)與細(xì)胞黏附及細(xì)胞間相互作用相關(guān)的基因表達(dá)下調(diào)，但誘導(dǎo)凋亡的具體途徑和過(guò)程仍未闡明。

TCS通過(guò)依賴cAMP為第二信使的信號(hào)途徑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡也有觀點(diǎn)認(rèn)為TCS主要通過(guò)下調(diào)Bcl－2基因來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Bcl－2屬于抗凋亡基因，其表達(dá)增高可以維持線粒體內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)，阻止線粒體膜電位下降和線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔的開(kāi)放，抑制線粒體釋放促凋亡蛋白、Cyto－C和凋亡誘導(dǎo)因子（apoptosis inducing factor，AIF），從而防止細(xì)胞凋亡。此外，Bcl－2能結(jié)合 Apaf－1和胱天蛋白酶－9（caspase－9），并維持其非活化狀態(tài)，阻止胱天蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)，防止細(xì)胞凋亡［8］。Wang等［3］研究發(fā)現(xiàn)利用環(huán)腺苷酸反應(yīng)元件（cAMP response element，CRE）類似物阻斷cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP response element bound protein，CREB）作用于Bcl－2的基因位點(diǎn)，可以減弱TCS介導(dǎo)的Bcl－2基因表達(dá)下降。而p－CREB的過(guò)度表達(dá)可以上調(diào)Bcl－2的表達(dá)，在宮頸癌HeLa細(xì)胞中這一表達(dá)的上調(diào)可以被TCS治療所抑制。由此可以作出推斷，TCS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡可能是通過(guò)CREB介導(dǎo)來(lái)下調(diào)凋亡抑制基因Bcl－2的表達(dá)。另有研究發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為cAMP激活蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）、進(jìn)而磷酸化CREB所不同，cAMP同樣可以激活PKC，后者作用于蛋白激酶ERK1／2和p38 MAPK，使之轉(zhuǎn)入細(xì) 胞核，磷酸化 CREB［9］。Li等［10］發(fā)現(xiàn)TCS誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制可能通過(guò)PKC起作用，因?yàn)槭褂肞KC激動(dòng)劑會(huì)使TCS的作用下調(diào)；反之，應(yīng)用PKC抑制劑會(huì)協(xié)同TCS的作用。［35S］GTPγS結(jié)合序列分析表明，TCS可以活化JAR細(xì)胞和K562細(xì)胞表面的G蛋白，進(jìn)而通過(guò)G蛋白來(lái)調(diào)節(jié)腺苷酸環(huán)化酶（adenylate cyclase，AC）的活性，Li等［11］研究發(fā)現(xiàn)TCS和高濃度的AC抑制劑都可通過(guò)劑量和時(shí)間依賴的方式來(lái)降低HeLa細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平，因此活化的抑制性G蛋白（Gi）參與了TCS誘導(dǎo)的凋亡。由此推測(cè)，TCS作用于抑制性Gi，抑制AC下調(diào)cAMP，從而抑制PKC活化，并通過(guò)p38MAPK和ERK1／2信號(hào)通路下調(diào)CREB磷酸化，下調(diào)Bcl－2等與凋亡抑制有關(guān)基因的表達(dá)，從而誘導(dǎo)凋亡。

TCS通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡TCS誘導(dǎo)凋亡的過(guò)程可以通過(guò)直接作用于線粒體而發(fā)生。Li等［12］研究發(fā)現(xiàn)，TCS可以誘導(dǎo)人前髓細(xì)胞HL－60發(fā)生凋亡，作用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)TCS使線粒體膜的通透性發(fā)生改變，接著從線粒體到細(xì)胞胞質(zhì)釋放細(xì)胞色素c和Smac，活化caspase－9，促進(jìn)凋亡復(fù)合物的形成，進(jìn)而通過(guò)線粒體途徑誘發(fā)細(xì)胞凋亡。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，使用caspase－9抑制劑z－LEHD－FMK 時(shí)，細(xì)胞的凋亡進(jìn)程被阻斷，說(shuō)明caspase－9啟動(dòng)的線粒體途徑參與到TCS誘導(dǎo)的凋亡［12］。此外，在研究TCS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用機(jī)制的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，使用Fas單克隆抗體不會(huì)阻止TCS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。由此證明，TCS不是通過(guò)死亡受體途徑，而是通過(guò)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)促發(fā)線粒體途徑而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［11－12］。此外，一些學(xué)者通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察揭示了TCS線粒體凋亡通路。研究TCS作用于視網(wǎng)膜時(shí)發(fā)現(xiàn)，TCS可以選擇性地進(jìn)入并摧毀Müller細(xì)胞及色素上皮細(xì)胞，而對(duì)其他神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的作用輕微。TCS作用的視網(wǎng)膜細(xì)胞出現(xiàn)了核碎裂和核溶解，并出現(xiàn)了特征性的凋亡小體以及膨脹的線粒體。這些發(fā)現(xiàn)表明，TCS通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而發(fā)揮作用，而脹大的線粒體說(shuō)明其凋亡過(guò)程可能依賴于線粒體［13］。

TCS通過(guò)影響細(xì)胞骨架來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡凋亡的主要形態(tài)學(xué)特征為表面微絨毛消失、細(xì)胞皺縮、胞質(zhì)出泡形成凋亡小體。在核酸水平上，凋亡還可表現(xiàn)為核碎裂和核溶解。此外，凋亡還與細(xì)胞表達(dá)微管（microtubules，MT）、微絲（microfilaments，MF）的變化有關(guān)。Wang等［14］的研究還發(fā)現(xiàn)TCS誘導(dǎo)凋亡的過(guò)程中，解聚的MF在靠近細(xì)胞核和凋亡小體附近的粗糙細(xì)胞膜上堆積，緊接著在胞質(zhì)膜下有MT形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，由此可見(jiàn)TCS誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞凋亡和細(xì)胞重組高度協(xié)調(diào)。在生理?xiàng)l件下，MF維持質(zhì)膜的完整性，凋亡過(guò)程中，MF解聚，MT對(duì)于維持質(zhì)膜的完整起到了重要的作用，TCS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡末期出現(xiàn)的環(huán)狀MT預(yù)示著細(xì)胞從凋亡向壞死過(guò)程的演進(jìn)［11］。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，在TCS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中，肌動(dòng)蛋白和微管蛋白基因受到了不同程度的調(diào)控——γ肌動(dòng)蛋白mRNA下降速度快于β肌動(dòng)蛋白，α和β微管蛋白mRNA在Hela細(xì)胞凋亡的晚期依次下調(diào)。這些結(jié)果都表明，TCS誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞凋亡伴隨著特殊的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的改變，同時(shí)肌動(dòng)蛋白和微管蛋白基因在細(xì)胞凋亡的不同階段表達(dá)受到抑制［14］。然而，TCS是否通過(guò)MF和MT影響細(xì)胞骨架來(lái)啟動(dòng)細(xì)胞凋亡，還有待進(jìn)一步研究探索。

TCS作為RIP發(fā)揮抗腫瘤作用RIP具有RNA N－C糖苷酶活性，能水解真核細(xì)胞核糖體28SrRNA的4324位上腺苷酸的N－C糖苷鍵，釋放出1個(gè)腺嘌呤堿基，使核糖體不可逆失活，從而抑制蛋白質(zhì)合成。RIP可以分為2種類型：Ⅰ型RIP由單鏈組成，僅具有核糖體抑制活性，TCS是典型的Ⅰ型RIP；Ⅱ型RIP由2條多肽鏈組成，分別稱為A鏈和B鏈，A鏈從結(jié)構(gòu)及功能上均與Ⅰ型RIP相似，B鏈具有凝集素樣結(jié)構(gòu)，可特異地與真核細(xì)胞表面的半乳糖受體結(jié)合，有利于RIP進(jìn)入細(xì)胞，其代表植物蛋白是蓖麻素蛋白（ricinus communis agglutinin，RCA）［15］。

TCS的選擇性作用機(jī)制Sha等［15］將RCA的A鏈與TCS對(duì)照研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，體外TCS的毒性遠(yuǎn)低于RCA；體內(nèi)較小劑量的RCA就會(huì)引起壞死和炎癥，而TCS即使是較大劑量，也僅是引起視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡。Sha等［13］研究發(fā)現(xiàn)RCA毒性很強(qiáng)，對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的殺傷幾乎不具有選擇性。相反，TCS通常具有選擇性，其毒性作用主要針對(duì)來(lái)源于滋養(yǎng)層細(xì)胞的絨毛膜癌及來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞的各種白血病，而對(duì)正常組織及其他組織的毒性較弱。TCS這一選擇性有利于其應(yīng)用于臨床，而TCS選擇作用的機(jī)制可能與其進(jìn)入細(xì)胞的途徑相關(guān)。

目前研究發(fā)現(xiàn)TCS可通過(guò)兩條途徑進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)而發(fā)揮細(xì)胞毒性作用：其一，通過(guò)TCS與磷脂膜相互作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)；其二，通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用，受體主要是低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（lowdensity lipoprotein receptor related protein，LRP）［16］。Jiao等［17］研究發(fā)現(xiàn)，TCS通過(guò)絨毛膜細(xì)胞表面的JAR和BEWO細(xì)胞上的LRP1內(nèi)吞進(jìn)入到靶細(xì)胞內(nèi)而發(fā)揮作用。而在HeLa細(xì)胞表面未發(fā)現(xiàn)LRP1，這可以解釋為什么HeLa細(xì)胞相比于JAR和BEWO細(xì)胞對(duì)TCS不敏感，可能是因?yàn)镠eLa細(xì)胞不能通過(guò)有效的內(nèi)吞途徑來(lái)攝取TCS。Li等［18］還發(fā)現(xiàn)，胃癌SGC－7901細(xì)胞相比于正常的胃黏膜上皮細(xì)胞對(duì)TCS更敏感；研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)TCS誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性在肝HepG2細(xì)胞上不如在JAR細(xì)胞上明顯，其機(jī)制可能也與LRP1介導(dǎo)的受體內(nèi)吞有關(guān)。Zhao等［19］研究TCS抗HIV作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，與RCA通過(guò)Sec61蛋白孔進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不同，TCS能直接穿過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。TCS通過(guò)膜表面的脂質(zhì)進(jìn)入，HIV－1包膜上存在大量脂質(zhì)，因此可以確信TCS通過(guò)上述途徑進(jìn)入HIV－1內(nèi)發(fā)揮作用。TCS通過(guò)非特異性受體進(jìn)入細(xì)胞發(fā)揮作用的研究解釋了TCS可特異性作用于腫瘤等靶細(xì)胞和靶組織，而對(duì)于正常組織和其他組織無(wú)作用。但仍存在一些疑問(wèn)，如受體介導(dǎo)的內(nèi)吞為什么可以躲過(guò)溶酶體的作用；一些正常的人體組織細(xì)胞表面有大量LRP1，但為什么對(duì)TCS同樣不敏感，這些問(wèn)題有待于進(jìn)一步研究探索。

TCS抑制蛋白質(zhì)合成與其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系早期認(rèn)為TCS具有N－糖苷酶活性，可以阻斷蛋白質(zhì)合成，后又發(fā)現(xiàn)其可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。兩者之間是否存在相關(guān)性尚不明確［11］。在研究其他RIP誘發(fā)細(xì)胞凋亡機(jī)制的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，RIP的N－糖苷酶活性可以介導(dǎo)核糖體毒性應(yīng)激反應(yīng)（ribotoxic stress response，RSR），從而激活 SAPK／JKN 和p38信號(hào)通路，最終誘發(fā)細(xì)胞凋亡［20］。然而之前有研究報(bào)道，TCS 可以抑制 PKC／ERK1／2 和 p38 MAPK信號(hào)通路，導(dǎo)致HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制［9］。由此推斷，TCS可能并未參與RSR，也沒(méi)有通過(guò)N－糖苷酶活性來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在TCS誘導(dǎo)人前髓細(xì)胞HL－60發(fā)生凋亡的過(guò)程中，TCS處理1．5h后發(fā)生線粒體膜通透性改變，但其是否發(fā)生在蛋白質(zhì)合成的抑制之前尚不明確［11］。

TCS的其他抗腫瘤作用機(jī)制最近研究發(fā)現(xiàn)TCS可以用于治療慢性髓細(xì)胞性白血病。慢性髓細(xì)胞性白血病的特征為染色體t（9；22）發(fā)生相互易位，稱為費(fèi)城染色體。其中Bcr－Abl基因發(fā)生了融合，融合基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯持續(xù)激活了原癌基因p210 Bcr－Abl，也導(dǎo)致了ABL酪氨酸激酶的活性失去控制。甲磺酸伊馬替尼（imatinib mesylate，IM）是一種酪氨酸酶阻斷劑，也是治療慢性髓細(xì)胞性白血病最有效和最特異的藥物。然而臨床研究表明，IM不能完全清除惡性瘤變，而且長(zhǎng)期使用的患者會(huì)對(duì)IM產(chǎn)生抵抗。TCS可以協(xié)同IM來(lái)誘導(dǎo)K562細(xì)胞生長(zhǎng)停滯。這一作用可以理解為TCS抑制融合基因Bcr－Abl轉(zhuǎn)錄表達(dá)的酪氨酸激酶，并且下調(diào)原癌基因p210 Bcr－Abl水平，抑制如PKC和NF－κB等一些信號(hào)分子。而PKC和NF－κB廣泛參與細(xì)胞的增殖及其調(diào)控［21］。一些研究發(fā)現(xiàn)，使用NF－κB的抑制劑（如地塞米松）可以增強(qiáng)TCS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，由此推測(cè)NF－κB進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)可以上調(diào)一些抗凋亡基因（如Bcl－2）［18］。

此外，在研究TCS、米非司酮、順鉑在卵巢惡性腫瘤治療中的作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，與順鉑和米非司酮不同，TCS的抗腫瘤作用機(jī)制之一是能夠明顯下調(diào)腫瘤組織中 HLA－G 和 HLA－E的表達(dá)水平。HLA－G和HLA－E是非經(jīng)典HLA－Ⅰ分子，它們?cè)谀[瘤組織表面表達(dá)的上調(diào)可以抑制T細(xì)胞和NK細(xì)胞對(duì)于腫瘤組織的殺傷作用，從而使腫瘤組織逃過(guò)機(jī)體的免疫監(jiān)視作用［22］。

結(jié)語(yǔ)TCS可以通過(guò)多種途徑來(lái)殺傷腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，一方面可以發(fā)揮RIP活性，另一方面誘發(fā)腫瘤細(xì)胞的凋亡，此外還可以通過(guò)其他多種途徑來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。然而，在TCS的研究過(guò)程中尚存在一些問(wèn)題有待解決。例如，TCS發(fā)揮的RIP活性與其誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系，如何通過(guò)對(duì)TCS的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾來(lái)提高其生物活性并降低過(guò)敏原性，TCS誘導(dǎo)凋亡的通路等。相信隨著這些問(wèn)題的解決，TCS可以更好地應(yīng)用于臨床抗腫瘤的治療與研究。

［1］ Shaw PC，Chan WL，Yeung HW，et al．Minireview：trichosanthin—aprotein with multiple pharmacological properties［J］．Life Sci，1994，55（4）：253－262．

［2］ 金毓翠，李承慧，劉錦霞．結(jié)晶天花粉羊膜腔注射用于中期妊娠引產(chǎn)的臨床分析［J］．生殖與避孕，1985，5（1）：15－17．

［3］ Wang P，Xu J，Zhang C，et al．CREB，apossible upstream regulator of Bcl－2in trichosanthin－induced HeLa cell apoptosis［J］．Mol Biol Rep，2010，37（4）：1891－1896．

［4］ Zhou H，Jiao Z，Pan J，et al．Immune suppression via IL－4／IL－10－secreting T cells：a nontoxic property of anti－HIV agent trichosanthin［J］．Clin Immunol，2007，122（3）：312－322．

［5］ Wang B，Jiao Z，Shao X，et al．Phenotypic alterations of dendritic cells are involved in suppressive activity of trichosanthin－induced CD8＋CD28－regulatory T cells［J］．J Immunol，2010，185（1）：79－88．

［6］ Ping Y，Yang－XF．Targeting apoptotic and autophagic pathways for cancer therapeutics［J］．Cancer Lett，2011，300（2）：105－114．

［7］ 黃益玲，胡火軍，黃利鳴，等．天花粉蛋白誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究［J］．中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2007，23（1）：99－101．

［8］ 肖獻(xiàn)忠．病理生理學(xué)［M］．第1版．北京：高等教育出版社，2004：103－105．

［9］ Wang P，Chen L，Yan H．Trichosanthin suppresses HeLa cell proliferation through inhibition of the PKC／MAPK signaling pathway［J］．Cell Biol Toxicol，2009，25（5）：479－488．

［10］ Li J，Xia X，Nie H，et al．PKC inhibition is involved in trichosanthin－induced apoptosis in human chronic myeloid leukemia cell line K562［J］．Biochim Biophys Acta，2007，1770（1）：63－70．

［11］ Li M，Li X，Li JC．Possible mechanisms of trichosanthininduced apoptosis of tumor cells［J］．Anat Rec（Hoboken），2010，293（6）：986－992．

［12］ Li J，Xia X，Ke Y，et al．Trichosanthin induced apoptosis in HL－60cells via mitochondrial and endoplasmic reticulum stress signaling pathways［J］．Biochim Biophys Acta，2007，1770（8）：1169－1180．

［13］ Sha O，Yew DT，Cho EY，et al．Mechanism of the specific neuronal toxicity of a type I ribosome－inactivating protein，trichosanthin［J］．Neurotox Res，2010，18（2）：161－172．

［14］ Wang P，Li JC．Trichosanthin－induced specific changes of cytoskeleton configuration were associated with the decreased expression level of actin and tubulin genes in apoptotic Hela cells［J］．Life Sci，2007，81（14）：1130－1140．

［15］ Sha O，Yew DT，NG TB，et al．Different in vitro toxicities of structurally similar type I ribosome－inactivating proteins（RIPs）［J］．Toxicol In Vitro，2010，24（4）：1176－1182．

［16］ 黃益玲，黃利鳴．天花粉蛋白的構(gòu)效關(guān)系及進(jìn)入細(xì)胞的途徑［J］．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，2l（2）：268－269．

［17］ Jiao YZ，Liu W．Low－density lipoprotein receptor－related protein 1is an essential receptor for trichosanthin in 2 choriocarcinoma cell lines［J］．Biochem Biophys Res Commun，2010，391（4）：1579－1584．

［18］ Li M，Chen F，Liu C．P，et al．Dexamethasone enhances trichosanthin－induced apoptosis in the HepG2hepatoma cell line［J］．Life Sci，2010，86（1－2）：10－16．

［19］ Zhao W，F(xiàn)eng D，Sun S，et al．The anti－viral protein of trichosanthin penetrates into human immunodeficiency virus type 1［J］．Acta Biochim Biophys Sin，2010，42（2）：91－97．

［20］ Nrayangnan S，Surendranath K，Bora N，et al．Ribosome inactivating proteins and apoptosis［J］．FEBS Lett，2005，579：1324－1331．

［21］ Zhang K，Xu J，Huang X，et al．Trichosanthin downregulated p210Bcr－Abl and enhanced imatinib－induced growth arrest in chronic myelogenous leukemia cell line K562［J］．Cancer Chemother Pharmacol，2007，60（4）：581－587．

［22］ 王建英，許茜，吳淑娟，等。藥物對(duì)卵巢癌裸鼠移植瘤組織中 HLA－G和 HLA－E表達(dá)的影響［J］．河北醫(yī)藥，2009，31（21）：2878－2880．