UF-50全自動尿沉渣分析儀對尿液有形成分檢測結(jié)果干擾因素分析

楊秀清，高 蕾，李 程，秦晨曦，李雪蓮，袁小美

尿沉渣檢驗有較高的臨床診斷價值，是尿液分析的重要內(nèi)容。UF-50全自動尿沉渣分析儀因操作簡便、重復(fù)性好等特點在臨床檢驗中的應(yīng)用越來越廣泛。但尿液成分具有多樣性、復(fù)雜性的特點，有些成分的大小、形態(tài)以及性質(zhì)相近，UF-50分析儀均無法正確識別與分類，因而會對所有檢測項目產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致某些檢測結(jié)果的假陽性或假陰性，且與尿干化學(xué)分析結(jié)果不一致［1-2］。本文對UF-50全自動尿沉渣分析儀對尿液有形成分檢測結(jié)果的干擾因素進行分析，旨在為臨床提供更加可靠的診斷依據(jù)。

1 UF-50全自動尿沉渣分析儀檢測尿液有形成分的機制

UF-50全自動尿沉渣分析儀利用流式細胞計數(shù)法(FCM)技術(shù)來獲得尿液中的細胞前向散射光及前向熒光的強度參數(shù)，在對細胞進行熒光染色后，每個細胞都暴露在高度密集的激光束照射之下，單個細胞會按不同角度發(fā)出熒光和散射光。系統(tǒng)將對這些電信號進行分析，按照熒光強度和散射光強度生成二維散點圖，以便對各種有形成分進行識別。從前向散射光的發(fā)光強度可獲知細胞的大小和表面狀態(tài)等，從染色細胞發(fā)出的熒光可獲知細胞表面和胞質(zhì)內(nèi)的性狀，以及細胞核的性質(zhì)。

2 尿液有形成分檢測及干擾因素

2.1 管型 UF-50全自動尿沉渣分析儀根據(jù)管型內(nèi)容物染色后產(chǎn)生的熒光強度來區(qū)分病理管型和透明管型，不能作病理管型的分類［3］。

2.1.1 假陽性原因:管型檢測的假陽性率最高［4］。主要原因有:①由于管型、上皮細胞及黏液絲的形態(tài)、大小、染色性有許多相似之處，導(dǎo)致儀器不能準(zhǔn)確區(qū)分。尤其是合并感染時黏液絲和上皮細胞增多，會造成管型的假陽性增高［5］。大量精子堆積在一起形成類柱狀體，與管型相似，分析儀測出的強散射光信號和強熒光信號為假管型［6］。②有時少量白細胞聚集成膿細胞或黏附于黏液絲上，其前向散射光強度、熒光強度等測定信號偏離尿白細胞的信號范圍，也可被誤認(rèn)為管型［7］。③另外尿液變質(zhì)、尿pH值＞9，應(yīng)用嘧啶類、青霉素類等藥物，尿液中含有較多分泌物時尿蛋白可出現(xiàn)假陽性。因此，腎病患者的尿液不適合用干化學(xué)過篩檢驗，對于尿蛋白陽性的尿液標(biāo)本，必須輔以鏡檢［8］。

2.1.2 假陰性原因:管型檢測假陰性率較低。鏡下可見少量透明管型時會導(dǎo)致管型檢測假陰性?？赡苁怯捎诠苄投绦∈骨跋蛏⑸涔鈴姸冉档?，熒光脈沖較少、較低而導(dǎo)致漏檢［4］。某些蛋白尿形成的管型短小或斷裂而被漏檢［9］。尿蛋白和尿管型的主要成分是白蛋白，尿干化學(xué)反應(yīng)主要對白蛋白敏感，而對球蛋白不敏感。某些尿蛋白陽性的病例儀器不能確認(rèn)是否存在管型，必須鏡檢才能發(fā)現(xiàn)。尿管型與尿蛋白有一定的相關(guān)性，但并非平行關(guān)系［10］。

2.2 尿白細胞 尿白細胞檢測對泌尿系統(tǒng)感染等疾病的診斷有重要價值。尿白細胞種類較多、形態(tài)多樣、大小不一，因此其所產(chǎn)生的前向散射光強度及電阻抗等測定信號變化范圍較大，較易出現(xiàn)假陽性或假陰性，檢測過程中應(yīng)加以注意。

2.2.1 假陽性原因:①大多數(shù)情況下，分析儀測定白細胞的結(jié)果與鏡下所見基本相符［11］，但某些原因如上呼吸道或尿路感染，特別是婦科疾病所引起的上皮細胞增多時，儀器會將某些上皮細胞誤認(rèn)為白細胞，從而造成假陽性［10］。②尿液中某些成分如上皮細胞(尤其是腎小管上皮細胞)、大量非定形尿酸鹽結(jié)晶、成堆細菌顆粒等，其大小及染色敏感性與尿白細胞相似，測定信號與尿白細胞相近或重疊，儀器分析時誤將以上成分計數(shù)為尿白細胞，導(dǎo)致假陽性［7］。③尿液中含有真菌時也會對白細胞計數(shù)產(chǎn)生干擾。尿液中只含有真菌時，會造成真菌的假陰性和白細胞的假陽性。當(dāng)尿液中同時含有白細胞和紅細胞時分為兩種情況，白細胞濃度低時，儀器對白細胞計數(shù)準(zhǔn)確，對紅細胞的計數(shù)出現(xiàn)錯誤。當(dāng)白細胞濃度高時，真菌對白細胞計數(shù)產(chǎn)生干擾，造成假陽性。提示尿液中有形成分組成和濃度對白細胞造成的干擾是不同的［12］。

2.2.2 假陰性原因:①腎移植患者發(fā)生排異反應(yīng)、慢性扁桃體炎、慢性腎炎時，尿液中以淋巴細胞為主，干化學(xué)分析儀法檢測白細胞為陰性，鏡檢法檢測為陽性［2，13］。尿液中以單核細胞為主時也會出現(xiàn)此結(jié)果［2］。②有時少量尿液白細胞聚集成膿細胞或黏附于黏液絲，測定信號偏離尿白細胞信號范圍，可被誤認(rèn)為管型等其他成分而被漏檢，造成假陰性。UF-50分析儀僅適用于過篩檢測，工作中必須用鏡檢法復(fù)檢，以免漏檢［4，7］。③黃疸尿也會造成白細胞假陰性，由于膽紅素的顏色與散射光及熒光的抵消作用影響，使白細胞計數(shù)隨黃疸程度增加而減少［14］。④低滲尿及堿性尿白細胞增大，而高滲尿及酸性尿白細胞萎縮，可能導(dǎo)致漏檢，造成假陰性［7］。

2.3 尿沉渣 尿沉渣檢測尤其是紅細胞的檢測對泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、輔助診斷及治療有重要意義。UF-50分析過程中易受結(jié)晶、類酵母細胞及其他雜菌、精子等干擾，當(dāng)儀器出現(xiàn)報警時，必須用鏡檢確認(rèn)［15］。如結(jié)晶標(biāo)志、類酵母細胞標(biāo)志、精子標(biāo)志出現(xiàn)(+)和(或)出現(xiàn)紅細胞信息異常時，必須鏡檢復(fù)核以排除假陽性結(jié)果［16-17］。

2.3.1 假陽性原因:①結(jié)晶對紅細胞結(jié)果影響很大。有研究表明50%假陽性源于結(jié)晶。由于尿中的草酸鈣結(jié)晶、非晶型鹽類結(jié)晶等與紅細胞大小、形態(tài)，熒光強度、染色敏感度和前向散射光強度均與紅細胞相似，故常被誤認(rèn)為紅細胞而出現(xiàn)假陽性［18］。②也有研究認(rèn)為，在影響檢測準(zhǔn)確性的因素中細菌占首位(47．2%)［19］。主要原因可能是尿液中存在大量球菌和桿菌時，細菌可代謝產(chǎn)生一些有毒物質(zhì)(如內(nèi)毒素)，使細菌在尿液中結(jié)成堆，菌落大小與紅細胞相似，被誤認(rèn)為紅細胞而產(chǎn)生干擾。有研究證實，一定濃度的細菌會使尿液紅細胞計數(shù)出現(xiàn)假陽性，其中葡萄球菌對紅細胞計數(shù)影響最明顯，可能與其形態(tài)排列有關(guān)，而革蘭陰性桿菌和腸球菌對紅細胞計數(shù)影響較小，但其濃度較大時會出現(xiàn)聚集排列，因此也會影響紅細胞計數(shù)［20］。有報道稱，利用UF-50全自動尿沉渣分析儀檢測時，金黃色葡萄球菌可影響其對尿紅細胞計數(shù)的測定結(jié)果，但并無規(guī)律，應(yīng)輔以鏡檢確診［16］。當(dāng)細菌濃度較高且聚集，大小與紅細胞相近時，散點分布與紅細胞有重疊，分析儀有可能將其誤認(rèn)為紅細胞，造成紅細胞計數(shù)的假陽性。③酵母菌的影響。酵母菌形態(tài)、大小和前向散射光強度與紅細胞相似而被誤認(rèn)為紅細胞［21］;類酵母樣細胞，由于草酸鈣結(jié)晶和類酵母樣細胞與尿液紅細胞具有相似的熒光或前向散射光特性［22］，降低了分析儀對紅細胞的識別能力。精子、卵磷脂小體、脂肪滴可影響紅細胞計數(shù)，精子雖然前向散射光強度小，熒光強度高，但其成堆時，儀器無法區(qū)分，散射光強度可能會與紅細胞接近而造成假陽性［18］。④標(biāo)本含有大量細菌，超出儀器設(shè)定范圍，導(dǎo)致紅細胞計數(shù)的偏差;標(biāo)本含有不完整管型被染色誤認(rèn)為是紅細胞［18］。⑤尿干化學(xué)法檢測時，如果尿中有肌紅蛋白、次氯酸鹽、氧化型清潔劑或細菌尿時，可引起尿紅細胞假陽性［14］，尿液清潔度不夠或混濁時，尿液中的雜質(zhì)易被誤認(rèn)為是紅細胞，從而影響分析結(jié)果，出現(xiàn)假陽性［18］。

2.3.2 假陰性原因:紅細胞假性減低的主要干擾因素為患者本身的紅細胞具有高度異形性，其次是紅細胞附著在黏液絲上。當(dāng)尿中出現(xiàn)血紅蛋白時，分析儀檢測潛血反應(yīng)陽性，但是鏡檢為陰性。

2.3.2.1 紅細胞的形態(tài)異常:分析儀只能對尿中完整紅細胞有形成分進行檢測，對異形紅細胞如球形紅細胞、棘形紅細胞等會漏診［23］，導(dǎo)致假陰性。原因:①畸形紅細胞。某些畸形紅細胞大小僅為正常紅細胞的1/8～1/10，低倍視野根本無法看到，高倍視野僅見很小的環(huán)狀形，折光性弱;“鬼怪影”畸形，普通高倍視野隱約可見，位相鏡通過正負相對比可觀察;小球形畸形，細胞整體固縮，折光性強，胞膜增厚，易將這類紅細胞誤認(rèn)為酵母菌或真菌孢子［24］;一個紅細胞出現(xiàn)多個芽孢，使胞體變小，芽孢在四周連接成花環(huán)形。②由于病變導(dǎo)致紅細胞膜改變，造成紅細胞的破裂及芽孢的脫落，血紅蛋白溢出，出現(xiàn)影細胞、紅細胞碎片、紅細胞高度異形性或聚集時易導(dǎo)致假陰性［18］。高倍視野下僅能觀察到形態(tài)不規(guī)則的小紅細胞碎片，由于形狀不規(guī)則且折光性弱，很容易將其看作其他雜質(zhì)［24］。當(dāng)UF-50全自動尿沉渣分析儀測定結(jié)果出現(xiàn)紅細胞陽性且為腎內(nèi)科患者，必須進行顯微鏡復(fù)檢，以提高檢測的準(zhǔn)確性［18］。

2.3.2.2 紅細胞附著在黏液絲上:UF-50全自動尿沉渣分析儀雖具有吹打自動混勻功能，但不能徹底混勻附著在黏液絲上的紅細胞團，尤其是吸樣時只能定量吸取，如未能吸到紅細胞團，就造成了紅細胞假性減低，白細胞假性減低也是此原因［1］。

2.3.2.3 干化學(xué)法檢測:當(dāng)尿中存在大量維生素C，可影響尿紅細胞計數(shù)，使結(jié)果出現(xiàn)假陰性［10］。尿液中含有對熱不穩(wěn)定的酶、菌尿及存放時間過長均可導(dǎo)致潛血陽性，而鏡檢紅細胞陰性［2］。陳舊尿液的標(biāo)本，即便紅細胞溶解，分析儀也能打印出來，但顯微鏡下檢測不到［10］。

尿液分析儀潛血反應(yīng)既能與完整的紅細胞發(fā)生陽性反應(yīng)，也可與紅細胞溶解釋放的血紅蛋白發(fā)生陽性反應(yīng)，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的紅細胞。血管內(nèi)溶血、上尿路出血時尿液分析儀潛血陽性，但尿沉渣鏡檢觀察不到紅細胞或僅見紅細胞碎片。當(dāng)心肌或骨骼肌發(fā)生嚴(yán)重損傷尿液中還有肌紅蛋白時，分析儀檢測潛血陽性，鏡檢紅細胞陰性［2］。非發(fā)酵菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌對潛血結(jié)果影響較大，其中銅綠假單胞菌的影響最顯著。可能主要與其產(chǎn)生的細胞色素氧化酶有關(guān)，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均可產(chǎn)生過氧化物酶，從而影響潛血結(jié)果的檢測，腸球菌和白假絲酵母菌不產(chǎn)生此類物質(zhì)，故對結(jié)果影響不明顯［24］。

UF-50分析儀主要起過篩作用，而尿液中有形成分復(fù)雜，顯微鏡檢查可對有形成分進行最直觀的分析，因此，陽性標(biāo)本應(yīng)與鏡檢結(jié)合，從而避免儀器檢測造成的誤診、漏診，提高尿沉渣檢測的質(zhì)量。

［1］ 吳海波．UF-50全自動尿液有形成分分析儀檢測結(jié)果干擾因素的分析［J］．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2006，3(7):304-305．

［2］ 羅海霞．尿沉渣鏡檢在尿液檢測中的重要性［J］．中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18(10):2167．

［3］ 牛憶軍，姚祖德，赫紅軍．全自動尿沉渣分析儀和顯微鏡檢查對比分析［J］．檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26(4):222-224．

［4］ 李麗娜，于敬達，程子英．UF-50全自動尿沉渣分析儀各檢測項目干擾因素分析［J］．包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2010，26(1):25-26．

［5］ 馬政輝．UF-100全自動尿沉渣分析儀各檢測項目假陽性結(jié)果的分析［J］．臨床檢驗雜志，2002，22(1):67-68．

［6］ 殷海芳．UF-100尿沉渣分析儀、干化學(xué)分析儀與鏡檢聯(lián)合檢測的應(yīng)用［J］．海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，17(2):264-266．

［7］ 李雪峰，王厚照．iQ200尿沉渣分析儀測定廈門地區(qū)尿沉渣參考值的調(diào)查［J］．臨床誤診誤治，2010，23(12):1176-1177．

［8］ 王軍偉，康澤生，吳鎮(zhèn)．尿沉渣檢查方法的評價［J］．醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2006，17(2):77．

［9］ 鄧山鷹，林勝．全自動尿沉渣分析儀在尿管型檢測中的應(yīng)用［J］．華西醫(yī)學(xué)，2010，25(8):1515-1516．

［10］張秀英．尿沉渣鏡檢在臨床中的應(yīng)用價值［J］．實用醫(yī)技雜志，2007，14(30):4150-4151．

［11］何藝宏．尿液分析儀與尿沉渣鏡檢同步檢測白細胞出現(xiàn)不同結(jié)果的原因分析［J］．廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2001，19(4):248．

［12］莫筠，陳玉蓮，譚洪揚，等．真菌對UF-1000i全自動尿沉渣分析儀白細胞檢測的影響［J］．山東醫(yī)藥，2011，51(17):98-99．

［13］熊立凡，劉成玉．臨床檢驗基礎(chǔ)［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，2007:193．

［14］秦桂娥，李艷蓮，靳巖，等．膽紅素對UF-100尿殘渣自動分析儀尿白細胞計數(shù)的影響［J］．大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2007，29(5):501-502．

［15］劉然，劉佃香，李玉梅．UF-1000i尿沉渣分析儀紅細胞測定與顯微鏡檢查結(jié)果的對比分析［J］．中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，8(11):166-167．

［16］肖華勇．金黃色葡萄球菌在UF-50全自動尿沉渣分析儀紅細胞檢測結(jié)果影響分析［J］．實用醫(yī)技雜志，2009，16(12):964-965．

［17］吳曉虹，胡盈瑩，胡望平，等．尿紅細胞鏡檢與試紙條隱血、UF-100尿沉渣分析的比較［J］．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20(19):2411-2412．

［18］宋鳳鮮．UF-50尿沉渣分析儀中紅細胞影響因素分析［J］．醫(yī)學(xué)信息，2010，23(3):704-705．

［19］席洪剛．UF-100尿沉渣分析儀檢測尿紅細胞的假陽性結(jié)果分析［J］．包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，25(3):50-51．

［20］舒曠怡，朱蓉，陳小劍，等．菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x紅細胞測定的影響［J］．浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，19(10):47-48．

［21］馬麗，袁漢堯，王小梅．酵母菌對UF-100全自動尿沉渣分析儀紅細胞檢測結(jié)果的影響［J］．上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2001，16(3):161-162．

［22］李焱鑫，鐘亞玲．UF-100尿沉渣分析儀不能取代鏡檢［J］．臨床檢驗雜志，2005，23(2):156．

［23］李亞紅，羅燕婷．UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測尿液標(biāo)本中紅細胞、白細胞結(jié)果分析［J］．黑龍江醫(yī)學(xué)，2011，35(9):657-659．

［24］王廣，于洪偉．尿紅細胞在沉渣鏡檢中假陰性的因素探討［J］．中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2010，4(4):43-44．