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    馬鈴薯試管薯誘導培養(yǎng)基6-芐基腺嘌呤與蔗糖濃度的篩選

    2012-04-16 06:33:30李功義張雅奎吳凌娟徐學譜
    中國馬鈴薯 2012年3期
    關鍵詞:大白塊莖蔗糖

    李功義,張雅奎,梁 杰,吳凌娟,徐學譜,刁 琢

    (大興安嶺地區(qū)農(nóng)林科學院,黑龍江 加格達奇 165000)

    利用植物組織培養(yǎng)技術的原理形成的馬鈴薯脫毒技術是解決馬鈴薯退化的主要措施,此技術已成為促進馬鈴薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要途徑之一[1]。自1974年中國科學院植物研究所提出了脫毒苗單節(jié)切段微繁技術,使年繁殖倍數(shù)達107倍,短期內(nèi)為微型薯生產(chǎn)提供了大量脫毒苗,已被全國廣泛采用。為提高脫毒苗的利用率,許多單位進行了試管薯的誘導技術和誘導機理等方面的研究[2-6]。馬鈴薯試管薯可以在人為控制環(huán)境中周年批量生產(chǎn),由于在無菌條件下操作,其質(zhì)量相當于試管中的脫毒苗,可用試管薯替代試管苗作為生產(chǎn)原原種的材料。試管薯粒小,便于攜帶,比直接栽植試管苗易于成活,利用馬鈴薯試管薯可連續(xù)繁殖原原種、原種、一級種薯、二級種薯等,將莖尖脫毒技術和高效留種技術相結(jié)合,并建立科學合理的脫毒種薯繁育體系,是大幅度提高馬鈴薯產(chǎn)量和質(zhì)量的可靠保證。

    本研究以早熟鮮食品種早大白為試驗材料,于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng),以研究誘導培養(yǎng)基中6-芐基腺嘌呤(6-BA)和蔗糖濃度對試管薯數(shù)和試管薯重的影響,期望找到提高試管薯數(shù)和試管薯重的誘導培養(yǎng)基配方。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    早熟鮮食品種“早大白”脫毒試管苗,取每株中間部位的第3~4葉芽節(jié)接種試驗。

    1.2 試驗方法

    時間:2011年4月12日~6月12日。地點:大興安嶺地區(qū)農(nóng)林科學院組培室人工氣候箱內(nèi)。

    6-BA濃度對塊莖形成的影響。選用MS的液體培養(yǎng)基+活性炭濃度0.15%,6-BA設定0、2、4、6、8、10 mg/kg 6個濃度,蔗糖濃度8%。按單因素隨機區(qū)組設計,共6個處理,人工氣候箱5層,每層放置1個區(qū)組,即重復5次(每個處理5瓶),每個培養(yǎng)瓶內(nèi)10個單莖節(jié)生長苗,最后統(tǒng)計數(shù)據(jù)以10株平均數(shù)為準。蔗糖濃度對塊莖形成的影響。選用MS的液體培養(yǎng)基+活性炭濃度0.15%,蔗糖設定4%、8%、12%3個濃度,6-BA濃度2 mg/kg。亦按單因素隨機區(qū)組設計,共3個處理,人工氣候箱5層,每層放置1個區(qū)組,也就是重復5次(即每個處理5瓶),每個培養(yǎng)瓶內(nèi)10個單莖節(jié)生長苗,最后統(tǒng)計數(shù)據(jù)以10株平均數(shù)為準。

    試管苗培養(yǎng)。將帶有一個葉芽的試管苗莖段,接種于裝有40 mL液體培養(yǎng)基的玻璃培養(yǎng)瓶中(圓口瓶8 cm×10 cm),每瓶10個莖段。采用基本培養(yǎng)基MS無機鹽成分附加2%蔗糖的液體培養(yǎng)基,pH 5.8,已經(jīng)高溫滅菌處理過的脫脂棉作支撐物,試管苗接種后在每天光照16 h,溫度22℃±1,光照強度2 000 Lx條件下培養(yǎng)。

    試管薯誘導試驗。試管苗培養(yǎng)25 d后,將培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基棄去,再轉(zhuǎn)入到每天光照8 h,溫度18℃±1條件下,同時按處理濃度添加6-BA和蔗糖溶液。在此條件下誘導培養(yǎng)兩個月即收獲試管塊莖,并統(tǒng)計塊莖數(shù)和塊莖重量。

    試驗資料均根據(jù)生物統(tǒng)計原理先進行方差分析,然后視方差分析結(jié)果進行進一步差異性測驗。差異顯著性測驗采用新復極差法[7]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 6-BA濃度對早大白試管薯形成的影響

    6-BA濃度對早大白單株塊莖數(shù)試驗處理間差異顯著(表1)。進行多重比較看出,在試驗設置的6種濃度中,以2 mg/kg的處理單株塊莖數(shù)最高(1.4個/株),顯著高于其它處理(表2)。6-BA濃度對塊莖重影響亦差異顯著(表1),6 mg/kg 6-BA處理的單個塊莖重最高,且顯著高于其它處理(表3)。

    表1 不同6-BA濃度的單株塊莖數(shù)和單個塊莖重方差分析Table 1 Analysis of variance for microtuber number per plant and microtuber weight as influenced by various levels of 6-BA

    表2 不同6-BA濃度的單株塊莖數(shù)差異顯著性Table 2 Mean separation for treatments of 6-BA on microtuber number per plant

    表3 不同6-BA濃度的單個塊莖重差異顯著性Table 3 Mean separation for treatments of 6-BA on microtuber weight

    2.2 蔗糖濃度對早大白試管薯形成的影響

    蔗糖濃度對單株塊莖數(shù)和塊莖重的影響均存顯著差異(表4)。在試驗設置的3種蔗糖濃度中,以8%蔗糖濃度處理最好,其單株塊莖數(shù)顯著高于12%蔗糖濃度處理,與4%差異不顯著(表5),平均單個塊莖重達121.1mg,顯著高于4%和12%兩種蔗糖濃度處理(表6)。

    表4 不同蔗糖濃度的單株塊莖數(shù)和單個塊莖重方差分析Table 4 Analysis of variance for microtuber number per plant and microtuber weight as influenced by various levels of sucrose

    表5 不同蔗糖濃度的單株塊莖數(shù)差異顯著性Table 5 Mean separation for treatments of sucrose on minituber number per plant

    表6 不同蔗糖濃度的單個塊莖重差異顯著性Table 6 Mean separation for treatments of sucrose on minituber weight

    由試驗結(jié)果可知,早大白試管薯形成的最佳誘導培養(yǎng)基是:MS的液體培養(yǎng)基+活性炭濃度0.15% +6-BA濃度2 mg/kg+蔗糖濃度8%。試管苗培養(yǎng)25 d后,將培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基棄去,再加入誘導培養(yǎng)基,然后每天光照8 h,溫度18℃±1條件下,試管薯的產(chǎn)量最高,單株塊莖最重。

    3 討 論

    試驗表明6-BA濃度對早大白單株塊莖數(shù)的影響,以2 mg/kg的處理單株塊莖數(shù)最高1.4個/株,過高濃度的BA對試管塊莖有抑制作用。馬鈴薯塊莖的形成與膨大和其在生長發(fā)育過程中內(nèi)源激素的產(chǎn)生與消長有著密切的關系。6-BA濃度以2 mg/kg為宜,這與Hussey和Stacey[8]的結(jié)果是一致的。蔗糖濃度對單株塊莖數(shù)和塊莖重均存在明顯影響,以8%蔗糖濃度處理最好,其單株塊莖數(shù)1.3個/株,平均單個塊莖重達121.1 mg。

    由試驗結(jié)果可知,早大白試管薯形成的最佳誘導培養(yǎng)基是:MS的液體培養(yǎng)基 +活性炭濃度0.15%+6-BA濃度2 mg/kg+蔗糖濃度8%。試管苗培養(yǎng)25 d后,將培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基棄去,再加入誘導培養(yǎng)基,然后每天光照8 h,溫度18℃±1條件下,試管薯的產(chǎn)量最高,單株塊莖最重。這與柳俊等[9]每天光照8 h,蔗糖濃度8%,使用2 mg/kg 6-BABA對塊莖的形成與彭大效果最好的結(jié)論相一致。

    [1] 胡云海,蔣先明.植物激素對微型薯形成的影響[J].馬鈴薯雜志, 1992,6(1):14-21

    [2] 孫慧生,臧曰公,張振洪,等.脫毒小薯生產(chǎn)技術與生產(chǎn)體系的研究[J].馬鈴薯雜志,1991,5(1):3-10.

    [3] 楊文玉.不同組織培養(yǎng)條件對馬鈴薯試管微型薯的誘導[J].馬鈴薯雜志,1996,10(1):20-23.

    [4] 石瑛,秦昕,王鳳義,等.香豆素對馬鈴薯試管微型薯誘導的影響[J].中國馬鈴薯,2000,14(1):1-3.

    [5] 連勇,鄒穎,金黎平,等.馬鈴薯試管薯發(fā)育機理的研究—外源誘導劑對試管薯形成的影響[J].馬鈴薯雜志,1996,10(3):130-132.

    [6] 連勇.馬鈴薯試管薯誘導與應用[J].馬鈴薯雜志,1995,9(4): 237-239.

    [7] 西北農(nóng)業(yè)大學.農(nóng)業(yè)化學研究法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1988: 133-134.

    [8] Hussey G,Stacey N J.Factors affecting the formation of in vitro tubers of potato[J].Ann Bot,1984,53:565-578.

    [9] 柳俊,謝從華,黃大恩,等.BA對試管塊莖形成與膨大的影響[J].馬鈴薯雜志,1995,9(1):7-10.

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