綠孔雀霉形體與大腸桿菌混合感染的診治

胡品昌 劉波 阮素華 （云南森林自然中心 云南 昆明 650224）

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綠孔雀霉形體與大腸桿菌混合感染的診治

胡品昌 劉波 阮素華 （云南森林自然中心 云南 昆明 650224）

綠孔雀（）屬鳥綱，雞形目，雉雞科，在我國(guó)僅分布于云南，野生種群數(shù)量稀少，被列為國(guó)家I級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物，具有較高的觀賞和食用價(jià)值[1]。野生綠孔雀人工飼養(yǎng)后因環(huán)境發(fā)生改變，容易暴發(fā)一些禽類常見的傳染病，一旦發(fā)病往往造成嚴(yán)重的損失。2006年云南省野生動(dòng)物收容拯救中心飼養(yǎng)的部分綠孔雀發(fā)生一種以搖頭、甩鼻、眼腫、打噴嚏、排灰白色或黃綠色稀糞為特征的疾病，為了確診病原體和控制感染，降低死亡率。對(duì)死亡綠孔雀進(jìn)行病理解剖，采集瀕死孔雀血清和病料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢查、病原菌分離培養(yǎng)鑒定、藥敏試驗(yàn)，尋找有效的治療藥物。結(jié)果診斷為霉形體和大腸桿菌混合感染。經(jīng)選擇高敏藥物治療，疾病得到有效控制。近年來(lái)本病在家禽上比較流行，但在孔雀方面尚未見報(bào)道，僅見一些單一病原體感染的報(bào)道[2-3]?，F(xiàn)就本次發(fā)病診治情況整理報(bào)道如下：

1 發(fā)病情況

2006年3月1日，本中心飼養(yǎng)的所有雉類進(jìn)行雞新城疫免疫接種，其中綠孔雀用新城疫Lasota苗滴眼滴鼻。3月7日發(fā)現(xiàn)4只綠孔雀精神萎靡，甩鼻，流淚，排灰白色稀糞等癥狀。初期認(rèn)為是因天氣轉(zhuǎn)冷、接種疫苗引起的反應(yīng)，在飲水和飼料中加入多維及抗病毒藥物防治，但無(wú)明顯療效。此后發(fā)病的綠孔雀逐漸增多，3月24日開始出現(xiàn)死亡，后經(jīng)病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢查，確診后對(duì)癥下藥。至4月底，疫病才被控制。此次發(fā)病綠孔雀共21只，死亡6只，死亡率28.57%，其中產(chǎn)蛋孔雀死亡5只，青年孔雀死亡1只。

2 臨床癥狀

病初見少數(shù)孔雀精神沉郁，食欲減少，羽毛松亂，排灰白色稀糞。數(shù)日后，有的孔雀見打噴嚏，搖頭，甩鼻，流鼻涕，眼內(nèi)含有泡沫狀淚液；有的頭部腫大，出現(xiàn)單側(cè)或雙側(cè)性眼腫脹，眼內(nèi)有膿性分泌物；有的關(guān)節(jié)腫脹、跛行。后期精神萎頓，食欲廢絕，發(fā)呆、閉眼，呼吸困難，排黃綠色水樣稀糞，最后虛脫死亡。整個(gè)發(fā)病期間，母孔雀產(chǎn)蛋量下降或停止。

3 病理剖檢

對(duì)死亡的6只孔雀進(jìn)行解剖，其中眼臉腫脹的有3只；鼻竇充血，鼻腔內(nèi)有粘液膿性分泌物的4只；氣管內(nèi)有粘液，喉頭黏膜充血，氣管環(huán)輕微出血的有5只；雙側(cè)氣囊均出現(xiàn)不同程度的混濁、增厚的6只；發(fā)生腹膜炎的有5只；肝臟腫大，質(zhì)脆，表面覆蓋有纖維素性薄膜的4只；氣囊、腹腔附著有大量纖維性分泌物的5只；3只心包內(nèi)有纖維素性物質(zhì)滲出；6只不同程度的出現(xiàn)十二指腸出血，小腸黏膜充血、出血，1只肌胃出現(xiàn)芝麻大潰瘍?cè)睢?/p>

4 實(shí)驗(yàn)室檢查

4.1 涂片鏡檢 取病死孔雀肝、心、肺、腎、脾直接涂片，經(jīng)革蘭氏染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)有革蘭氏陰性小桿菌。

4.2 血清學(xué)檢查 采集病危的和癥狀明顯的發(fā)病孔雀血清5份。分別做瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、傳染性鼻炎，血清平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)霉形體。結(jié)果霉形體平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性的4只，傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、傳染性鼻炎瓊脂反應(yīng)均為陰性。診斷該孔雀群感染霉形體。

4.3 分離培養(yǎng)與鑒定 取病變肝組織分別接種于普通瓊脂平板和普通肉湯培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h，在普通瓊脂上長(zhǎng)出灰白色圓形、濕潤(rùn)、稍凸起、邊緣整齊、光滑半透明、中等大小的菌落；肉湯變混濁。釣菌涂片，革蘭氏染色鏡檢，均為兩端鈍圓的陰性中等大小桿菌。釣菌再接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，結(jié)果平板上長(zhǎng)有均勻紅色的菌落；生化試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該菌可分解葡萄糖、乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不分解蔗糖。吲哚試驗(yàn)和M.R.試驗(yàn)呈陽(yáng)性，V.P.試驗(yàn)呈陰性，不產(chǎn)生硫化氫，由此確定病原體中有大腸桿菌。

直接采取病死孔雀氣管、氣囊滲出液或肺組織、鼻竇分泌物等，加液體培養(yǎng)基磨碎制成懸液，加入青、鏈霉素各10萬(wàn)IU，處理后接種于支原體液體培養(yǎng)基中，于37℃培養(yǎng)5~7d。每隔3~5d從培養(yǎng)管內(nèi)吸收培養(yǎng)液0.5~1.0ml，傳代移植至新的培養(yǎng)管，待加有酚紅指示劑的液體培養(yǎng)基變黃后，以此培養(yǎng)物做姬姆薩染色，可見球狀菌體。取該培養(yǎng)液2滴在霉形體固體培養(yǎng)基表面37℃潮濕條件下培養(yǎng)5d后，40倍顯微鏡下可見到“荷包蛋狀”菌落，且能吸附雞紅細(xì)胞，證明病原體中有敗血霉形體。

4.4 藥敏試驗(yàn) 采用常規(guī)紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，大腸桿菌對(duì)乳酸環(huán)丙沙星、氟苯尼考、丁胺卡那、強(qiáng)力霉素、頭孢哌酮高敏，諾氟沙星中敏，痢特靈低敏；霉形體對(duì)氟苯尼考、乳酸環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素高敏，諾氟沙星中敏，丁胺卡那、頭孢哌酮、痢特靈低敏。

5 診斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化及實(shí)驗(yàn)室綜合檢查，可確診為敗血霉形體和大腸桿菌混合感染。

6 防治措施

6.1 強(qiáng)化消毒 百毒殺1:200倍稀釋后對(duì)籠舍環(huán)境噴霧消毒，1次/d，維持1周。以后每隔2d消毒1次，食盆、飲水器每天用優(yōu)氯凈水(1片兌2kg水)浸泡30min。

6.2 預(yù)防用藥 在精料中加強(qiáng)力維他(含多種維生素和礦物質(zhì)微量元素)。為了防止相互傳染，對(duì)其它未發(fā)病的雉類(如藍(lán)孔雀、原雞等)，投喂?jié)舛葹?.05%的復(fù)方泰樂菌素水溶液，連飲1周。

6.3 治療病孔雀 （1）西藥治療。氟苯尼考，飲水加30~40mg/kg，1次/d，連用5d。之后采用乳酸環(huán)丙沙星，飲水加50~70mg/kg，1次/d，連用1周。病情較嚴(yán)重的孔雀捕捉后口服維生素C0.2~0.4g，肌注頭孢哌酮0.125~ 0.25g，口服0.05%泰樂菌素水溶液2ml，1次/d，連用3d；患眼炎的病孔雀用紅霉素眼膏點(diǎn)眼，1次/d，連續(xù)3~5d。（2）中藥治療。口服富特(黃芪多糖口服液)1~2ml/只，普爾興1~2ml/只(治療呼吸道病癥的中藥制劑)，1次/d，連服3~5d。

7 討論

（1）霉形體與大腸桿菌屬于條件性致病菌，正常情況下兩者都存在于孔雀的呼吸道和腸道內(nèi)，當(dāng)環(huán)境改變產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，就會(huì)導(dǎo)致本病的發(fā)生。此次的發(fā)病就是在捕捉孔雀和接種疫苗過(guò)程中產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，加之疫苗毒株刺激呼吸道黏膜，使呼吸道黏膜的免疫功能下降，很快激活棲居于上呼吸道黏膜的霉形體。隨后幾天因天氣下雨變冷，孔雀體質(zhì)下降，誘發(fā)大腸桿菌病。一般野生動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)都比較嚴(yán)重，應(yīng)盡量減少人為干擾，疫苗免疫能飲水免疫的就采用飲水免疫，降低因捕捉帶來(lái)的應(yīng)激反應(yīng)。（2）霉形體與大腸桿菌混合感染，其發(fā)病主要影響孔雀的呼吸系統(tǒng)及消化系統(tǒng)，以呼吸系統(tǒng)為主。從死亡分布情況來(lái)看，發(fā)病孔雀中產(chǎn)蛋孔雀病情明顯比成年雄孔雀和青年孔雀嚴(yán)重。因?yàn)榭兹笟饽遗c卵巢相鄰，已經(jīng)開產(chǎn)的孔雀卵巢發(fā)育很大，與氣囊緊挨到一起，氣囊炎癥極易蔓延到卵巢，引起卵黃散落腹腔，造成急性腹膜炎、肝周炎死亡。即使治療康復(fù)的孔雀，也因慢性卵巢炎導(dǎo)致產(chǎn)蛋率不能達(dá)到正常水平。而青年孔雀因卵巢還沒有發(fā)育成熟，與氣囊沒有緊相連，炎癥主要局限在氣囊，因此腹膜炎較少，死亡率低。（3）因霉形體培養(yǎng)鑒定需要較長(zhǎng)時(shí)間，故在初診階段就應(yīng)及時(shí)用抗霉形體藥物。治療時(shí)不應(yīng)在癥狀消失就立即停藥，用藥療程和劑量要足，否則易產(chǎn)生復(fù)發(fā)。而且要根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇高敏藥物交替使用，防止病菌產(chǎn)生耐藥性。（4）中藥“黃芪多糖”具有免疫調(diào)節(jié)劑作用，同時(shí)具有抗病毒、抗菌、抗腫瘤、解毒、抗應(yīng)激、抗氧化等作用[4]。此病輔以中藥治療，取得明顯療效，在以后的預(yù)防性用藥中可以推廣使用。

致謝：本文實(shí)驗(yàn)室診斷方面得到了云南省畜牧獸醫(yī)研究院禽病科技中心姚艷老師的大力協(xié)助與指導(dǎo)，謹(jǐn)此致謝。

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（2012–05–23）

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