廣泛耐藥結(jié)核病快速檢測方法的探討

江西省武寧縣人民醫(yī)院（332300）余勤慧 蘭蘭

肺結(jié)核是嚴重危害人類健康的傳染病，是全球關注的公共衛(wèi)生和社會問題。隨著卡介苗和抗結(jié)核病化療藥物的發(fā)明，結(jié)核病發(fā)病率有所減少，但由于大量耐藥菌株的出現(xiàn)和結(jié)核分枝桿菌與HIV的合并感染，結(jié)核病又有上升趨勢。廣泛耐藥結(jié)核?。╔DR-TB）是指患者所感染的結(jié)核分支桿菌除同時對異煙肼、利福平耐受外，還對二線抗結(jié)核注射藥物（卷曲霉素、卡拉霉素、阿米卡星）中的至少一種耐受。近年來開發(fā)出多種耐藥結(jié)核病的快速診斷方法，指導臨床用藥和流行病調(diào)查有重要意義。

1 臨床資料與方法

1.1 臨床資料 本院2005年3月～2006年5月住院肺結(jié)核患者100例，多為復治病人，痰菌涂片陽性。

1.2 實驗方法 將受檢者痰標本轉(zhuǎn)移到無菌玻璃瓶中，根據(jù)痰標本粘稠度加入2～5倍標本體積的2%NaOH溶液，用小玻璃棒仔細攪拌，處理20min后各取0.15mL處理液，分別接種對照斜面、PNB瓊脂培養(yǎng)斜面和各含藥斜面，置36℃溫箱培養(yǎng)。

2 結(jié)果分析

2.1 痰結(jié)核菌分離培養(yǎng)與菌型鑒定 100例痰涂片陽性標本，抗酸桿菌培養(yǎng)陽性63例。痰結(jié)核菌經(jīng)匡氏PNB瓊脂培養(yǎng)基直接分型鑒定，并結(jié)合其生長物菌落形態(tài)與特征，判定為結(jié)核菌分支桿菌生長物56例，結(jié)核分支桿菌與非結(jié)核分支桿菌混合生長物5例；非結(jié)核分支桿菌生長物3例。

2.2 匡氏雙相瓊脂培基痰菌直接藥敏試驗臨床痰結(jié)核生長物對二線抗癆藥物氧氟沙星的耐藥率高達90%，且顯著高于其余3種二線抗癆藥物的耐藥率（P＜0.01）。

2.3 臨床XDR-TB快速檢測 55例結(jié)核生長物中共檢到9例XDR-TB，XDR-TB發(fā)生率為16.4%。報告藥敏實驗結(jié)果時間分別為：直接試驗第16天4例，第21天4例，第28天1例；匡氏雙相瓊脂痰菌直接藥敏試驗法臨床XDR-TB平均檢出時間為19.6天。

3 討論

因結(jié)核分支桿菌生長十分緩慢，分離培養(yǎng)平均需要3周以上，藥物敏感試驗需要3～4周，MDR-TB的鑒定時間將在2個月以上。本實驗室采用匡氏PNB瓊脂直接分型鑒定技術，臨床檢出XDR-TB平均檢出時間為19.6天。MDR-TB為16.6天。由于該技術不需要結(jié)核菌純培養(yǎng)物，這快于目前已見于報道的其他快速藥敏試驗方法[1]，且不存在假陽性和假陰性，為XDR-TB傳染源的快速鑒定提供了可靠手段。

總之，XDR-TB的控制是一件長期的艱苦工作，需要全球范圍的合作與支持[2]，因此，要不斷更新診斷工具和診斷方法，及臨床應用新藥新疫苗。