舒馬曲坦膠囊的制備與質(zhì)量控制＊

張敬如，趙 凱，黃復(fù)生，王 昆

(中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部病原生物學(xué)教研室，重慶 400038)

偏頭痛是一種慢性神經(jīng)血管紊亂性疾病，全球發(fā)病率約為10%～15%，隨著生活節(jié)奏的加快和工作壓力的加大，發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。舒馬曲坦為選擇性5－羥色胺(5－HT)受體激動(dòng)劑，為目前治療偏頭痛的首選藥。舒馬曲坦目前已開發(fā)出包括皮下注射劑、鼻用氣霧劑、直腸用栓劑和口服片劑等多種給藥劑型。與口服制劑相比，雖然皮下注射劑和鼻用氣霧劑起效快，但價(jià)格昂貴，同時(shí)注射用藥因副作用較大，適用范圍較小。因此目前臨床應(yīng)用最廣泛的仍然是口服制劑。舒馬曲坦口服吸收差，生物利用度低，僅為14%[1]，舒馬曲坦原料藥昂貴，口服用藥時(shí)劑量相對(duì)較大，這不僅增加了用藥成本，且易產(chǎn)生不良反應(yīng)，故一定程度上限制了其臨床應(yīng)用。本研究所制備的膠囊利用磷脂作為輔料，利用優(yōu)化的凍干技術(shù)制成三維結(jié)構(gòu)良好的磷脂舒馬曲坦凍干產(chǎn)品，將可能有效改善口服生物利用度，減少用藥劑量的同時(shí)降低用藥成本和不良反應(yīng)。本試驗(yàn)對(duì)舒馬曲坦膠囊的制備及質(zhì)量控制作了較系統(tǒng)的研究，旨在為開發(fā)新藥提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

色譜系統(tǒng)：Waters 515型高效液相色譜儀泵，Waters2487型紫外檢測(cè)儀，Sartorius電子天平(德國(guó))；Millipore Simiplicy 185純水儀(法國(guó))。舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品(美國(guó)Sigma公司)；舒馬曲坦原料藥(廣州市億邦醫(yī)藥科技有限公司)；磷脂(德國(guó)LIPOID公司惠贈(zèng))，甲醇(色譜純，美國(guó))，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉，乳糖，乙醇(分析純，重慶東方化學(xué)試劑廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

處方：舒馬曲坦200 mg，乳糖2.5g，磷脂1.5g，乙醇5mL，磷酸緩沖液50mL，共制膠囊50粒。

制備：稱取適量磷脂和舒馬曲坦用乙醇充分溶解，加入用緩沖液溶解的乳糖混勻，在一定溫度下高速攪拌，充分水化。將制得的樣品經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)處理，用0.45mm濾器過濾，得到一定粒徑范圍、均勻的磷脂復(fù)合物，分裝，真空冷凍干燥。凍干后樣品粉碎，過篩，加入相同質(zhì)量微晶纖維素，混勻，分裝至膠囊殼，即可。

2.2 性狀

本品為膠囊劑，內(nèi)容物為乳白色粉劑。

2.3 檢查

參照[2005年版《中華人民共和國(guó)藥典(一部)》附錄ⅠL]膠囊劑通則項(xiàng)下要求制訂本品的檢查項(xiàng)目[2]。水分：取供試品3批，每批10粒，依法檢測(cè)[2]，平均含水量為1.7%。裝量差異：取供試品3批，每批10粒，依法檢測(cè)[2]，裝量差異在±5%范圍內(nèi)，符合要求。崩解時(shí)限：取供試品3批，每批6粒，依法檢測(cè)[2]，平均崩解時(shí)間為10.5min。微生物限度：按照[2005年版《中華人民共和國(guó)藥典(一部)》附錄ⅩⅢC[2]項(xiàng)下步驟及原則執(zhí)行，符合要求。

2.4 含量測(cè)定

2.4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Alltech ODSC18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：0.04 mol/L磷酸二氫鉀(pH=6.1)－甲醇(62∶38)；流速：1.0mL/min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：228 nm；進(jìn)樣量：20 mL；靈敏度：0.005 AUFs。在此條件下，色譜圖見圖1。舒馬曲坦峰保留時(shí)間大約為7.7 min，與其相鄰的雜質(zhì)峰的分離度為2.5。

圖1 高效液相色譜圖

2.4.2 溶液制備

稱取16mg舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品，精密稱定，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精密吸取上述溶液1mL，置50mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液(每1mL含3.2mg舒馬曲坦)。取舒馬曲坦膠囊(每粒含舒馬曲坦4 mg)5粒，取出內(nèi)容物，用甲醇20 mL溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；精密吸取續(xù)濾液1mL置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取上述溶液2 mL置100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。根據(jù)處方制備不含舒馬曲坦的膠囊作為空白樣品，再按供試品溶液制備方法制備空白樣品溶液。

2.4.3 方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：將標(biāo)準(zhǔn)品溶液用流動(dòng)相倍比稀釋，配置為1 600，800，400，200，100，50 ng/mL的舒馬曲坦溶液，按擬訂的色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)、相應(yīng)質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y=341.44X+2 292.6，r= 0.999 9(n=6)。結(jié)果表明，舒馬曲坦質(zhì)量濃度在50～1 600 ng/mL范圍內(nèi)與峰面積有良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：配制80，320，1 200 ng/mL(低、中、高)3種質(zhì)量濃度舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)樣20mL，連續(xù)進(jìn)樣6針，分別測(cè)定峰面積，計(jì)算日內(nèi)精密度。另將上述3種質(zhì)量濃度溶液每天進(jìn)樣1次，連續(xù)6 d，計(jì)算其日間精密度。結(jié)果日內(nèi)精密度平均 RSD為2.20%(n=6)，日間精密度平均 RSD為2.59%(n=6)，表明方法的精密度較好。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品5份，依法制備供試品溶液并分別進(jìn)樣，測(cè)定含量。結(jié)果舒馬曲坦平均含量為99.3%，RSD為1.28%，表明本方法重復(fù)性較好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0，2，4，6，8 h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定含量。結(jié)果峰面積的 RSD為0.86%(n=5)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn)：精密量取已知含量的供試品溶液，分別加入40，600，1 200 ng/mL 3種質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，依法測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 舒馬曲坦加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4.4 樣品含量測(cè)定

取3批舒馬曲坦膠囊，依法制備成供試品溶液，高效液相色譜法測(cè)定，每批樣品平行測(cè)定3份。結(jié)果批號(hào)分別為110101，110102，110103的樣品中舒馬曲坦含量分別為標(biāo)示量的97.85%，99.12%，98.36%。

2.5 制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)

將樣品置室溫(20±5)℃下，分別于0，24，48，72 h時(shí)觀察其外觀，并測(cè)定含量。結(jié)果顯示各項(xiàng)指標(biāo)均無變化。繼續(xù)留樣觀察6個(gè)月，抽樣檢查質(zhì)量，結(jié)果各項(xiàng)指標(biāo)未見明顯變化。

3 討論

磷脂是一種含磷的類脂物質(zhì)，作為藥物輔料可改善原有藥物的親脂性和(或)親水性，可有效提高活性成分的體內(nèi)吸收，獲得較高的血藥濃度，且體內(nèi)消除較慢，不良反應(yīng)低，從而顯著改善藥物生物利用度[3－4]。舒馬曲坦水溶性差，生物利用度低，將其與磷脂在一定條件下復(fù)合，有可能促進(jìn)舒馬曲坦在體內(nèi)的吸收，提高藥效。

應(yīng)用高效液相色譜法檢測(cè)舒馬曲坦，文獻(xiàn)中涉及檢測(cè)波長(zhǎng)有225[5]，228[6]，282.7 nm[7]等，本研究應(yīng)用紫外分光光度儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)舒馬曲坦在228 nm和282 nm波長(zhǎng)處有吸收峰，因此檢測(cè)波長(zhǎng)選擇為228 nm。

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