少腹逐瘀湯治療原發(fā)性痛經(jīng)的機制研究

葉宇齊,王佩娟

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué),江蘇 南京 210029;2.江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院,江蘇 南京 210028)

少腹逐瘀湯載于清代王清任的《醫(yī)林改錯》,為治療寒凝血瘀證的代表方之一[1]，具有活血祛瘀、溫經(jīng)止痛功效?，F(xiàn)常用于治療原發(fā)性痛經(jīng)，寒凝血瘀證。少腹逐瘀湯源于四物湯，為四物湯加減變化形成的類方之一。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)少腹逐瘀湯可通過以下環(huán)節(jié)緩解疼痛、治療痛經(jīng)。

1 抑制COX-2酶活性而降低PGF2α

痛經(jīng)的發(fā)生主要與經(jīng)期子宮內(nèi)膜前列腺素(PG)含量增高有關(guān)，前列腺素是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)相似，具有廣泛生理活性的不飽和脂肪酸，其含量極微，而活性極強。實驗發(fā)現(xiàn)痛經(jīng)患者子宮內(nèi)膜中PGF2α含量增高是造成痛經(jīng)的主要原因。PGE2與PGF2α在月經(jīng)周期中的不同階段，兩者含量呈周期性變化,在黃體期PGE2的含量比PGF2α高，而月經(jīng)期則相反[2]。經(jīng)期痛經(jīng)患者子宮內(nèi)膜、外周血及腹腔沖洗液中PG濃度顯著高于正常婦女[3]。PGF2α促使子宮平滑肌收縮，子宮血流量減低，致子宮缺血缺氧，酸性代謝產(chǎn)物堆積而出現(xiàn)痛經(jīng)。PGF2α和PGE2是花生四烯酸脂肪酸(AA)的衍生物,在其生成過程中環(huán)氧化酶(COX)又稱前列腺素合酶(PGs)，即AA合成各種內(nèi)源性PG過程中的限速酶，亦參與調(diào)節(jié)痛經(jīng)的發(fā)生。COX有COX-1和COX-2兩種同功酶，其中COX-2為誘導(dǎo)酶，受到炎性因子等介質(zhì)誘導(dǎo)后即大量產(chǎn)生，并促使合成大量前列腺素,引起炎癥反應(yīng)[4]。研究報道COX-2在原發(fā)性痛經(jīng)的發(fā)生過程中發(fā)揮著主導(dǎo)作用。

張暢斌等[5]在對四物湯及其各衍化方機制的研究中,證實四物湯及其各衍化方對痛經(jīng)有明確的抑制作用。劉東等[6]在對桃紅四物湯治療原發(fā)性痛經(jīng)實驗研究中,提示該方抗痛經(jīng)作用與其降低子宮組織中PGF2α含量和提高內(nèi)源性鎮(zhèn)痛物質(zhì)β-EP含量有關(guān)。在此研究的基礎(chǔ)上，華永慶等[7]從原發(fā)性痛經(jīng)發(fā)病的病理環(huán)節(jié)入手,通過COX-2酶抑制活性實驗發(fā)現(xiàn)芩連四物湯、少腹逐瘀湯及香附四物湯對COX-2酶抑制作用顯著增強，可見，少腹逐瘀湯可通過抑制COX-2酶，進(jìn)而減少PG的生物合成，緩解PG引起的子宮痙攣性收縮，從而在痛經(jīng)的治療中發(fā)揮重要作用。

2 升高子宮組織中NO水平，降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平

現(xiàn)代研究[8]證明，一氧化氮(NO)、鈣離子(Ca2+)水平和痛經(jīng)有關(guān)。NO是一種新型的神經(jīng)遞質(zhì)，尤其是在痛覺調(diào)制過程中參與外周及中樞水平的痛覺調(diào)制。NO在體內(nèi)合成，在Ca依賴的生理性調(diào)節(jié)酶NOS作用下,精氨酸水解再氧化成瓜氨酸和NO，任何引起Ca內(nèi)流的因素都可激活NOS合成NO。NO能激活鳥氨酸環(huán)化酶，可使局部血管擴(kuò)張，抑制血小板聚集,并使平滑肌細(xì)胞舒張。研究[9]表明,NO通過減少血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子而減少中性粒細(xì)胞—內(nèi)皮細(xì)胞的黏附。眾多研究表明,NO可以抑制自由基誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化而減少子宮肌肉再灌注損傷，組織細(xì)胞NOS的含量增高可以有效提高體內(nèi)NO的含量,從而通過NO的作用對子宮缺血—再灌注損傷引起的痛經(jīng)起到良好的保護(hù)作用。也有研究[10]表明NO參與外周及中樞水平的痛覺調(diào)治。

痛經(jīng)時，子宮發(fā)生缺血—再灌注損傷，使大量Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載引起細(xì)胞的能量耗竭，細(xì)胞膜受損，還可以導(dǎo)致子宮肌痙攣，從而引起痛經(jīng)，故Ca2+和痛經(jīng)的發(fā)生有著重要關(guān)系。

現(xiàn)代研究[11-12]表明，當(dāng)歸油類及粗多糖類成分能顯著抑制催產(chǎn)素所致痛經(jīng)小鼠扭體反應(yīng)，升高子宮組織中NO水平，降低鈣離子水平，川芎中的川芎嗪可阻止心肌細(xì)胞核Ca2+的異常內(nèi)流，川芎哚有明顯的鎮(zhèn)痛作用[13]。段金廒課題組圍繞四物湯及其類方治療婦科血瘀證痛經(jīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)及配伍規(guī)律進(jìn)行了大量的實驗研究，朱敏等[14]“四物湯及其組方藥對與藥味對小鼠原發(fā)性痛經(jīng)模型的影響”研究中，評價基本方四物湯及其組方藥對、藥味對此模型的干預(yù)作用，得出四物湯組方藥對、藥味能不同程度地減少痛經(jīng)模型小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)，降低子宮組織中Ca2+含量，提高NO水平的結(jié)果。

3 改善卵巢功能，調(diào)節(jié)異常的激素水平

原發(fā)性痛經(jīng)的發(fā)生與激素間平衡失調(diào)有關(guān)，有人通過對正常人與原發(fā)性痛經(jīng)患者的比較發(fā)現(xiàn),痛經(jīng)婦女黃體晚期雌激素水平顯著高于對照組，提示雌激素可能對PGs分泌有刺激作用，抑或是對PGs的分解有抑制作用，子宮內(nèi)膜PGs的異常合成可能與雌激素過高有關(guān)。

禹良艷等[15]在“四物湯及其組成藥對對大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖的影響”中得出結(jié)論：四物湯有顯著促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞增殖的作用。因而少腹逐瘀湯能夠促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞的增殖，可能是其調(diào)節(jié)機體性激素生成的重要機制。宿樹蘭等[16]在“少腹逐瘀湯對寒凝血瘀大鼠模型血液流變性及卵巢功能的影響”中指出：寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能發(fā)生改變，血清E2明顯升高,P明顯下降，這一病理變化與痛經(jīng)相一致，少腹逐瘀湯可調(diào)節(jié)卵巢的內(nèi)分泌功能,降低了血清中E2水平，并升高了血清中P水平，可能為其臨床治療痛經(jīng)的途徑。

4 影響血液流變學(xué)指標(biāo)，使血液循環(huán)暢通

寒凝血瘀證則是由寒邪入于血分而致，多系素體腎陽不足，寒邪內(nèi)生，或因常處于寒濕環(huán)境損傷陽氣，而致體內(nèi)陽氣不足，失其溫煦、推動的作用而致瘀。

研究[17]認(rèn)為血液改變，主要是血液有形成分及血液變形與流動學(xué)的改變，影響血液黏度的各種因素中一種或數(shù)種增高，均可使血液黏度增加、循環(huán)減慢，局部缺氧而疼痛。其中全血黏度、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞變形性對于血瘀證的診斷具有代表性及較好的區(qū)分能力[18]。血小板聚集性、黏附性的異常與血瘀證的相關(guān)性已普遍公認(rèn)[18]。

華永慶等[7]在研究中發(fā)現(xiàn)少腹逐瘀湯對體外血小板聚集有較強的抑制作用，與其臨床用于血瘀明顯兼血虛型痛經(jīng)及其養(yǎng)血活血、逐瘀功效相一致。宿樹蘭等[16]在“少腹逐瘀湯對寒凝血瘀大鼠模型血液流變性及卵巢功能的影響”中發(fā)現(xiàn)少腹逐瘀湯能改善寒凝血瘀大鼠全血黏度、血漿黏度、血沉、紅細(xì)胞壓積。說明少腹逐瘀湯的活血化瘀作用可以使患者的微循環(huán)狀態(tài)發(fā)生改善，從而使沖任疏通，經(jīng)血流暢。

5 調(diào)節(jié)機體免疫功能

“正氣存內(nèi)，邪不可干；邪之所湊，其氣必虛”。由此可見正氣即一切抗病能力與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中免疫功能有著極為相似的內(nèi)涵[19]。研究認(rèn)為免疫反應(yīng)異常是氣虛血瘀證發(fā)生、演變的病理機制。劉雅等[20]在對氣虛血瘀證大鼠現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表征及免疫功能的研究中，發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，模型組大鼠CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞計數(shù)均減少,提示了在大鼠氣虛致瘀的動態(tài)過程中存在著T淋巴細(xì)胞數(shù)量的減少和功能障礙。原發(fā)性痛經(jīng)臨床以血瘀證多見，可見，氣虛血瘀所致痛經(jīng)發(fā)生的動態(tài)演變過程中存在以T細(xì)胞亞群變化,主要是CD8+T細(xì)胞數(shù)量減少、T細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力下降以及腎上腺重量改變引起的HPA軸免疫調(diào)節(jié)功能異常的免疫功能失衡。

研究發(fā)現(xiàn)，四物湯能改善造血系統(tǒng)功能,升高血虛證小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)及骨髓DNA量[21],提高CD34+細(xì)胞在骨髓有核細(xì)胞中的比例，顯著升高血虛證小鼠或輻射小鼠骨髓造血組細(xì)胞集落形成單位數(shù)量[22]，提高正常小鼠的脾臟和胸腺指數(shù)[23]，對抗輻射和環(huán)磷酰胺所致的免疫器官脾臟和胸腺重量降低[24]?？梢?，四物湯及其類方的物質(zhì)基礎(chǔ)阿魏酸，芍藥苷，川穹嗪等活性成分，均不同程度表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)作用，其機理與促進(jìn)骨髓造血、增加免疫細(xì)胞活性以及促進(jìn)免疫分子分泌有關(guān)。

綜上所述，少腹逐瘀湯方中以小茴香、炮姜、官桂溫經(jīng)散寒，五靈脂、蒲黃、赤芍、延胡索、川芎、當(dāng)歸活血化瘀，赤芍能散邪，行血中之滯，五靈脂能通利血脈散瘀血，蒲黃有活血止血作用，香附具有理氣解郁，調(diào)經(jīng)止痛之效，川芎辛香行氣，既能活血祛瘀以調(diào)經(jīng)，又能行氣開郁而止痛，牛膝除可以活血之外，可引血下行，引藥直達(dá)病所，而活血行氣之品易傷氣血，故以白芍養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，縱觀全方功在溫經(jīng)活血，使瘀去痛消?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，方中有效成分可以通過抑制COX-2酶活性而降低PGF2α；升高子宮組織中NO水平，降低鈣離子水平；改善卵巢功能，調(diào)節(jié)異常的激素水平；影響血液流變學(xué)指標(biāo);調(diào)節(jié)機體免疫功能等5個方面有效治療原發(fā)性痛經(jīng)，但具體是何種活性物質(zhì)發(fā)揮怎樣的生物學(xué)作用，至今仍未闡明，對少腹逐瘀湯復(fù)方的作用機制和分子機制的研究仍待深入，需基于中藥化學(xué)、中藥基因組學(xué)和蛋白組學(xué)理念，利用生物芯片和生物信息學(xué)技術(shù)，結(jié)合現(xiàn)代分子生物學(xué)研究手段，尋找中藥復(fù)方的復(fù)合靶標(biāo)，以求科學(xué)詮釋中藥的作用機制。

[1]張晶,孫翠蘭.少腹逐瘀湯在婦科臨床中的應(yīng)用[J].中國自然醫(yī)學(xué)雜志,2002,4(2):109-112.

[2]Benedetto C.Eieosanoids in primary dysmenorrheal,endometriosis and menstrual migraine[J].Gynecol Endoerinol,1998,3(1):71.

[3]華永慶,洪敏,朱荃.原發(fā)性痛經(jīng)研究進(jìn)展[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2003,19(1):62-64.

[4]趙敏珍,應(yīng)延風(fēng).環(huán)氧化酶和痛經(jīng)相關(guān)性研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)雜志,2008,8,17(23):3712-3713.

[5]張暢斌,陸茵,段金廒,等.四物湯加減方對痛經(jīng)模型小鼠干預(yù)作用的研究[J].藥學(xué)與臨床研究,2007,15(6):459-461.

[6]劉東,譚秦莉,李玉寶,等.桃紅四物湯治療原發(fā)性痛經(jīng)實驗研究[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,28(2):46-48.

[7]華永慶,段金傲,宿樹蘭,等.用于不同證型痛經(jīng)的四物湯類方生物學(xué)效應(yīng)評價(I)[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報,2008,39(1):72-76.

[8]楊惠玲.高級病理生理學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1998:24-34.

[9]劉德麟.分子網(wǎng)絡(luò)紊亂與調(diào)節(jié)[M].北京:清華大學(xué)出版社,1999:63.

[10]黨海珍,滕久樣,彭芝配,等.九氣拈痛膠囊對痛經(jīng)大鼠子宮組織內(nèi)皮素和一氧化氮影響的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2001,8(3):150-151.

[11]王小榮,邱明豐,謝國祥,等.當(dāng)歸油對痛經(jīng)小鼠子宮組織中一氧化氮和鈣離子的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2006,17(5):723.

[12]樂江,彭仁,孔銳,等.當(dāng)歸粗多糖鎮(zhèn)痛作用的實驗研究[J].中國藥學(xué)雜志,2002,37(10):746.

[13]夏臘梅,伍杰雄.川芎嗪對心肌細(xì)胞核鈣轉(zhuǎn)運功能異常的保護(hù)[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2002,7(2):124.

[14]朱敏,段金傲,唐于平,等.四物湯及其組方藥對與藥味對小鼠原發(fā)性痛經(jīng)模型的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2010,16(18):109-112.

[15]禹良艷,華永慶,朱敏,等.四物湯及其組成藥對大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2011,17(6):38-39.

[16]宿樹蘭,段金傲,王團(tuán)結(jié),等.少腹逐瘀湯對寒凝血瘀大鼠模型血液流變性及卵巢功能的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2008,14(12):41-43.

[17]趙寧俠,郭瑞林,任秦有,等.艾灸三陰交穴對健康人血液流變學(xué)及紅細(xì)胞聚集指數(shù)的影響[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2003,26(4):31-32.

[18]姚魁武,王階,朱翠玲,等.血瘀證患者實驗室指標(biāo)診斷貢獻(xiàn)度比較研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,5(1):42-44.

[19]祝世納.研究和建立中醫(yī)微生態(tài)學(xué)說[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,1997,21(3):242-246.

[20]劉雅,李曉輝.氣虛血瘀證大鼠現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表征及免疫功能初探[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報,2009,15(1):4-7.

[21]蒲春霞,方國璋.四物湯改善小鼠造血系統(tǒng)損害的實驗研究[J].中成藥,2004,26(2):121.

[22]郭平,梁乾德,胡劍江,等.四物湯對放射線致血虛證小鼠造血作用的研究[J].天津中醫(yī)藥,2003,20(6):47.

[23]張玉杰,張建明,宋敏.四物湯對小鼠免疫功能的影響[J].中國麻風(fēng)皮膚雜志,2004,20(6):546.

[24]馬增春,高月,劉永學(xué),等.四物湯對環(huán)磷酰胺所致血虛證小鼠造血細(xì)胞作用的研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2001,7(5):13.