狹葉梔子莖化學(xué)成分研究

鄭麗花，李小寶，2，宋鑫明，2*，李仲北，董力瑋，單彥波

1海南師范大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院;2海南師范大學(xué)省部共建-熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?71158

狹葉梔子莖化學(xué)成分研究

鄭麗花1，李小寶1，2，宋鑫明1，2*，李仲北1，董力瑋1，單彥波1

1海南師范大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院;2海南師范大學(xué)省部共建-熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海口571158

從狹葉梔子(Gardenia stenophylla Merr.)莖乙醇提取物中分離得到11個(gè)化合物，通過理化性質(zhì)及波譜分析鑒定為樺木酸(betulinic acid，1)、香草酸(vanillic acid，2)、丁香醛(syringaldehyde，3)、丁香酸(syringic acid，4)、對(duì)羥基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde，5)、鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate，6)、鄰羥基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid，7)、琥珀酸(succinic acid，8)、D-甘露醇(D-mannitol，9)、β-谷甾醇(β-sitosterol，10)、β-胡蘿卜苷(β-daucosterol，11)。所有化合物為首次從該植物中分離得到。

狹葉梔子;化學(xué)成分;結(jié)構(gòu)鑒定

狹葉梔子莖是茜草科(Rubiaceae)梔子屬(Gardenia)植物狹葉梔子(Gardenia stenophylla Merr.)的干燥莖。其原植物是一種灌木，生于山野間，適應(yīng)性強(qiáng)，主要分布于海南、廣西、廣東等地區(qū)［1］，民間主要用于清熱利尿、涼血、解毒等功效。國內(nèi)外學(xué)者從梔子屬中分離得到環(huán)烯醚萜類、單貼苷類、二萜類、三萜類、黃酮類等多種類型化合物［2］。到目前為止，狹葉梔子化學(xué)成分未見報(bào)道。為了闡明狹葉梔子藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，作者對(duì)其進(jìn)行了化學(xué)成分研究。從狹葉梔子莖的氯仿部位分離得到了11個(gè)化合物單體，分別為樺木酸(betulinic acid，1)、香草酸(vanillic acid，2)、丁香醛(syringaldehyde，3)、丁香酸(syringic acid，4)、對(duì)羥基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde，5)、鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate，6)、鄰羥基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid， 7)、琥珀酸(succinic acid，8)、D-甘露醇(D-mannitol，9)、β-谷甾醇(β-sitosterol，10)、β-胡蘿卜苷(β-daucosterol，11)。所有化合物均為首次從狹葉梔子中分離得到。

1 儀器和材料

Bruck AV-400型核磁共振儀;Agilent HCT-1200液質(zhì)聯(lián)用;Sephadex LH-20(Pharmacia公司生產(chǎn));薄層硅膠GF254，柱色譜硅膠100～200、200～300目(青島海洋化工廠生產(chǎn));XT5-10顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀，溫度未校正。

狹葉梔子采于海南省霸王嶺自然保護(hù)區(qū)，由海南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院鐘瓊芯教授鑒定為Gardenia stenophylla Merr.，標(biāo)本保存于海南師范大學(xué)省部共建-熱帶藥用植物化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

將陰干的狹葉梔子莖磨成粗粉(10 kg)，用75%的乙醇回流提取4次。提取液合并，減壓蒸餾除去乙醇，干燥得浸膏(600 g)。將此浸膏分散在水中，依次分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯進(jìn)行萃取。減壓回收溶劑，得到石油醚浸膏120 g，氯仿部分浸膏180 g，乙酸乙酯93 g。氯仿部位(180 g)用層析硅膠干法拌樣上柱(拌樣硅膠200 g)，采用硅膠柱色譜分離，依次用石油醚-乙酸乙酯(1∶0—0∶1，V/ V)進(jìn)行梯度洗脫。經(jīng)TLC檢測(cè)后合并相似流分后分成10個(gè)組分(a-j)。組分b經(jīng)石油醚-氯仿(3∶1，V/V)洗脫，經(jīng)制備薄層色譜純化得到化合物1 (11.5 mg)、3(5.4 mg)，組分c經(jīng)石油醚-丙酮(25∶1-1∶1，V/V)洗脫，經(jīng)制備薄層色譜純化得到化合物5 (4.6 mg)、6(6.7 mg)、10(15.6 mg)，組分d經(jīng)氯仿-乙酸乙酯(1∶0-0∶1，V/V)洗脫，經(jīng)制備薄層色譜純化得到化合物11(12.3 mg)、2(4.3 mg)，組分f經(jīng)氯仿-甲醇(1∶0-0∶1，V/V)洗脫，經(jīng)制備薄層色譜純化得到化合物4(8.3 mg)、7(3.3 mg)、8(2.6 mg)、9(6.2 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色針狀晶體;mp:285～288℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:0.68，0.75，0.86，0.89，0.90，1.60(18H，6×CH3)，4.65，4.53(2H，d，J= 7.2 Hz，29-CH2)，3.11(1H，m，H-3);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:38.6(C-1)，27.3(C-2)，77.9(C-3)，38.7(C-4)，55.2(C-5)，18.1(C-6)，34.2(C-7)，40.5(C-8)，50.3(C-9)，36.8(C-10)，20.7 (C-11)，25.3(C-12)，38.3(C-13)，42.3(C-14)，30.5(C-15)，32.0(C-16)，56.2(C-17)，46.8(C-18)，49.1(C-19)，150.3(C-20)，29.6(C-21)，37.1(C-22)，27.8(C-23)，15.2(C-24)，16.0(C-25)，15.9(C-26)，14.6(C-27)，181.1(C-28)，109.6(C-29)，19.1(C-30)。上述的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］報(bào)道的樺木酸譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定為化合物1為樺木酸(betulinic acid)。

化合物2 白色針晶;mp:202～206℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:6.72(1H，d，J=8.4 Hz)，7.42(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz)，7.41(1H，d，J=2.0 Hz)為ABX耦合系統(tǒng)的3個(gè)質(zhì)子信號(hào)，3.77(3H，s，-OCH3)為一個(gè)甲氧基質(zhì)子信號(hào);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:170.0(COOH)，152.6 (C-4)，148.6(C-3)，125.3(C-6)，123.2(C-1)，115.3(C-2)，113.8(C-5)，56.4(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道的香草酸譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物2為香草酸(vanillic acid)。

化合物3 白色粉末;mp:111～113℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.82(1H，s，-CHO)，7.15(2H，s，H-2，6)，6.28(1H，s，C4-OH)，3.97 (6H，s，C3-OCH3，C5-OCH3);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:192.6(C-7)，149.3(C-3，5)，143.5(C-4)，128.8(C-1)，108.0(C-2，6)，56.6(C3-OCH3，C5-OCH3)。上述的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道的丁香醛譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定為化合物3為丁香醛(syringaldehyde)。

化合物4 白色粉末;mp:207～209℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.18(2H，s，H-2，5) 3.78(6H，s，H-8，9);13C NMR(100 MHz，CDCl3) δ:167.1(C-7)，147.2(C-3，5)，140.0(C-4)，120.3(C-1)，106.9(C-2，6)，56.0(C-8，9)。上述的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道的丁香酸譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定為化合物4為丁香酸(syringic acid)。

化合物5 白色粉末;mp:104～105℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.86(1H，s，CHO)，7.83 (2H，d，H-2，6)，6.71(2H，d，H-3，5);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:191.4(CHO)，163.3(C-4)，132.0(C-2，6)，127.7(C-1)，115.5(C-3，5)。上述的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道的對(duì)羥基苯甲醛譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定為化合物5為對(duì)羥基苯甲醛(parahydroxybenzaldehyde)。

化合物6 白色膏狀固體;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.65(4H，dd，J=8.8，4.4 Hz，H-3，6)，7.45(2H，dd，J=8.8，4.4 Hz，H-4，5)，4.30(4H，t，J=6.4 Hz，H-8，8')，1.71(4H，m，H-9，9')，1.43 (4H，m，H-10，10')，1.06(6H，t，J=7.6 Hz，H-11，11');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:167.8(C-1'，1")，132.3(C-1，6)，130.8(C-3，4)，128.7(C-2，5)，65.5(C-3'，3")，30.5(C-4'，4")，19.2(C-5'，5")，13.6(C-6'，6")。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照一致［8］，故鑒定化合物6為鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)。

化合物7 粉紅色針狀結(jié)晶;mp:253～255℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.88(1H，dd，J =8.0，1.6 Hz，H-6)，7.45(1H，dt，J=8.4，1.6 Hz，H-4)，6.92(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-3)，6.88(1H，dt，J=8.0，1.6 Hz，H-5);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:173.6(COOH)，163.2(C-2)，136.6(C-4)，131.6(C-6)，120.1(C-5)，118.2(C-3)，113.9(C-1)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［9］，鑒定化合物 7為鄰羥基苯甲酸(2-hydroxy-benzoic acid)。

化合物8 白色粉末;mp:182～185℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:2.56(4H，s，H-2，3);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:176.0(C-1，4)，29.7(C-2，3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［10］，鑒定化合物8為琥珀酸(succinic acid)。

化合物9 白色粉末;mp:166～167℃;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:3.39(2H，m，H-1a，6a)，3.62(2H，m，H-1b，6b)，4.35(2H，t，J=5.2 Hz，OH-1，6)，4.15(2H，d，J=6.8 Hz，OH-2，5)，4.44(2H，d，J=5.2 Hz，OH-3，4)，3.55(2H，t，J =7.6 Hz，H-3，4);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ: 71.0(C-2，5)，67.0(C-3，4)，61.8(C-1，6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致［11］，鑒定化合物9為D-甘露醇(D-mannitol)。

化合物10 白色針狀晶體;mp:134～135℃;用薄層色譜分析，在紫外燈254 nm和365 nm均不顯熒光，I2熏顯色呈黃棕色，5%硫酸乙醇溶液顯色為紫紅色，該化合物性質(zhì)與已知化合物β-谷甾醇的物化性質(zhì)相近;取該化合物與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行薄層色譜展開對(duì)照，二者的Rf值相同;取該化合物與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品混合后測(cè)熔點(diǎn)，混合熔點(diǎn)不下降，故確定為β-谷甾醇(β-Sitosterol)。

化合物11 白色粉末;mp:268～270℃;5%硫酸乙醇溶液顯色，該化合物性質(zhì)與已知化合物β-胡蘿卜苷的物化性質(zhì)相近;取該化合物與β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行薄層色譜展開對(duì)照，二者的Rf值相同;取該化合物與β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品混合后測(cè)熔點(diǎn)，混合熔點(diǎn)不下降，故確定為β-胡蘿卜苷(β-Daucosterol)。

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Study on Chemical Constituents from Stems of Gardenia stenophylla Merr.

ZHENG Li-hua1，LI Xiao-bao1，2，SONG Xin-ming1，2*，LI Zhong-bei1，DONG Li-wei1，SHAN Yan-bo11College of chemistry and chemical engineering，Hainan Normal University;2Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education，Haikou 571158，China

Eleven compounds were isolated from the stems of Gardenia stenophylla Merr..The chemical structures of these 11 compounds were identified as:betulinic acid(1)，vanillic acid(2)，syringaldehyde(3)，syringic acid(4)，parahydroxybenzaldehyde(5)，dibutyl phthalate(6)，2-hydroxy-benzoic acid(7)，succinic acid(8)，D-mannitol(9)，β-sitosterol(10)，daucosterol(11)by comparing physicochemical and NMR properties with the reported data.All compounds were isolated from this plant for the first time.

Gardenia stenophylla Merr.;chemical constituents;structural determination

1001-6880(2012)10-1382-03

2012-05-30 接受日期:2012-08-21

海南師范大學(xué)青年教師科研啟動(dòng)項(xiàng)目(QN1128)

*通訊作者 Tel:86-013648681687;E-mail:sxm8646@163.com

R284.1

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