液基薄層細胞學(xué)檢測在尿液、腦脊液脫落細胞學(xué)檢查中的應(yīng)用

俞志鋼，劉 文，胡海霞，蘇 紅，李 偉，張華東，牛曉東

近年來，液基薄層細胞學(xué)檢測(thin-layer cytologital test，TCT)在婦科的應(yīng)用最為廣泛，在非婦科方面也開始推廣使用［1］，但在尿液和腦脊液脫落細胞學(xué)檢測中的應(yīng)用的相關(guān)文獻相對較少。尿液與腦脊液脫落細胞學(xué)檢查是臨床診斷的重要手段，我們對320例尿液、腦脊液標(biāo)本脫落細胞學(xué)同時做了傳統(tǒng)涂片染色和TCT制片染色，分析兩種方法對腫瘤細胞的檢出率，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 標(biāo)本源為我院送檢到本科的尿液與腦

脊液脫落細胞學(xué)檢查標(biāo)本，共320例，其中尿液228例，腦脊液92例。

1.2 方法

1.2.1 傳統(tǒng)涂片:將送檢標(biāo)本放置于4℃的冰箱內(nèi)靜置30 min，輕輕倒去一半，置于離心管中，離心5 min(2000 r/min)沉淀，棄上清液，留沉淀物吸取至載玻片上，均勻涂片2張，干燥后用95%乙醇固定10～15 min，HE染色，鏡檢。

1.2.2 TCT制片:將送檢標(biāo)本放置于4℃的冰箱內(nèi)靜置30 min，輕輕倒去一半，保留50 ml，分別等量置于兩個離心管中，加入適量50%乙醇與冰醋酸溶液(1∶1)，以分離黏液去除紅細胞，離心 5 min(2000 r/min)，棄上清液，用吸管吸取液體沉渣，按1∶4的體積比例將標(biāo)本加入細胞保存液，振蕩混勻后靜置10 min后離心，棄上清液，振蕩離心管，行TCT制片，HE染色。

1.3 細胞學(xué)診斷:所有細胞標(biāo)本制片均由同一位病理醫(yī)師診斷。細胞學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《診斷細胞病理學(xué)》［2］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17．0統(tǒng)計軟件處理，計數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗，α=0．05為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 診斷結(jié)果 傳統(tǒng)涂片:查見癌細胞19例(5．9%)，可疑癌細胞 48 例(15．0%)，未查見癌細胞253例(79．1%);TCT制片:查見癌細胞34例(10．6%)，可疑癌細胞 12 例(3．8%)，未查見癌細胞274例(85．6%)。TCT制片對尿液、腦脊液脫落細胞學(xué)癌細胞陽性檢出率高于傳統(tǒng)涂片，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0．05)。

2.2 鏡下觀察結(jié)果 兩種制片方法均應(yīng)用HE染色。傳統(tǒng)涂片細胞量極少，夾雜著炎性細胞和細胞碎片，核仁不明顯、著色較深，存在細胞變形現(xiàn)象。TCT制片背景中細胞量豐富、炎性細胞和細胞碎片較少，細胞分布均勻，重疊現(xiàn)象較少，細胞形態(tài)保存完好，不滿意標(biāo)本制片數(shù)量少，細胞形態(tài)飽滿。良性細胞呈一致性，細胞核呈圓形、橢圓形，核膜清晰且光滑，染色質(zhì)勻細，著色淺，可見細小的核仁。惡性細胞大小不一，核/質(zhì)比增大，細胞核形態(tài)多樣，其核膜凹凸不平，核膜厚，染色質(zhì)粗，集結(jié)呈粗粒狀團塊狀，并見明顯的核仁。細胞質(zhì)在兩種涂片未見明顯區(qū)別。見圖1、2。

圖1 尿液和腦脊液液基薄層細胞學(xué)制片病理觀察(HE×100)

圖2 尿液和腦脊液傳統(tǒng)涂片病理觀察(HE×100)

3 討論

TCT檢測是90年代發(fā)展起來的一項制片新技術(shù)。目前，TCT技術(shù)除了用于婦科標(biāo)本外，正逐步擴展到細胞學(xué)檢測的各個領(lǐng)域［3］，如尿液與腦脊液脫落細胞學(xué)［4-5］。

我們應(yīng)用TCT技術(shù)對尿液、腦脊液脫落細胞學(xué)進行檢測，并與傳統(tǒng)涂片比較，結(jié)果顯示，TCT制片陽性檢出率高于傳統(tǒng)涂片。TCT制片過程中細胞采集量豐富，能夠收集到更多有價值的細胞且分布均勻、形態(tài)保存完好，避免了傳統(tǒng)涂片制作過程中由于細胞過度干燥造成的假象，很好地保護了細胞原有的形態(tài)，各種干擾明顯少于傳統(tǒng)涂片，尤其是對腫瘤細胞的干擾及擠壓。閱片時對腫瘤細胞的識別更加準(zhǔn)確，分析原因為TCT保存液、清潔液可使黏液與細胞分離，避免陽性細胞堆積和丟失，同時可去除組織碎片、黏液、血細胞、雜質(zhì)，能夠保留全部有診斷價值的細胞成分及其完好的形態(tài)［5-6］。

總之，TCT檢測細胞基液能夠?qū)⒓毎昝鲤じ桨３旨毎孽r活性，并使細胞均勻懸浮，保證標(biāo)本的隨機性和代表性。制片時，靠細胞的表面張力均勻分布。從制片質(zhì)量來看，TCT技術(shù)優(yōu)于傳統(tǒng)涂片技術(shù)，癌細胞形態(tài)相對清晰，易辨認，且TCT制片細胞采集量豐富，厚度均勻，飽滿。對尿液、腦脊液的陽性檢出率高，診斷準(zhǔn)確率高，漏診率低，值得推廣應(yīng)用。

［1］ 馬博文，楊凡．液基薄層細胞制片技術(shù)在非婦科標(biāo)本中的應(yīng)用［J］．診斷病理學(xué)雜志，2010，17(1):63-66．

［2］ 馬正中．診斷細胞病理學(xué)［M］．鄭州:河南科學(xué)技術(shù)出版社，2000:218-227．

［3］ 張進生，渠淵，安紅雷，等．尿液標(biāo)本液基細胞薄層涂片檢查在膀胱癌診斷中的應(yīng)用［J］．北京醫(yī)學(xué)，2011，33(7):563-565．

［4］ Piaton E，F(xiàn)aynel J，Hutin K．Conventional liquid-based techniques versus cytyc thinprep processing of urinary samples:a qualitative approach［J］．BMC Clin Patho，2005，5(1):9-16．

［5］ 楊普，陳?。澳X脊液”液基細胞學(xué)檢查在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷中的應(yīng)用價值［J］．中國實用神經(jīng)疾病雜志，2009，12(16):29-30．

［6］ 葉見波，朱有凱，周祥禎，等．尿液基細胞學(xué)與傳統(tǒng)細胞學(xué)對膀胱癌診斷價值的比較［J］．現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010，18(11):2209-2211．