不同檢測方法在無償獻血篩選ALT中的應(yīng)用評價

周永嘉，韓 翌，謝云崢

(上海市血液中心采供血技術(shù)部，上海 200051)

不同檢測方法在無償獻血篩選ALT中的應(yīng)用評價

周永嘉，韓 翌，謝云崢

(上海市血液中心采供血技術(shù)部，上海 200051)

［目的］尋求一種適合應(yīng)用于血液中心無償獻血血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)篩選的檢測方法，以達(dá)到節(jié)約血源，大幅度降低因ALT不合格造成的血液報廢。［方法］用MissionTMC100干式生化分析儀(艾康)、Reflotron plus快速全自動干式生化分析儀(羅氏)、microlab 300半自動生化分析儀(威圖)3種儀器分別測100例獻血者的ALT，并分別與日立7600－010全自動生化分析儀進行比較。［結(jié)果］與全自動生化儀測試結(jié)果相比，艾康干式法χ2=2.25，相關(guān)性r=0.9550;羅氏 χ2=4.167，相關(guān)性r=0.9724;威圖半自動 χ2=0.25，相關(guān)性r=0.9695。［結(jié)論］威圖半自動生化分析儀結(jié)果良好，相關(guān)性好，與日立7600－010相比無明顯差異;艾康與羅氏應(yīng)適當(dāng)調(diào)整臨界值，艾康應(yīng)調(diào)為35 U/L，羅氏應(yīng)調(diào)為34 U/L。

無償獻血;檢測方法;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶;速率法;干化學(xué)法

血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)是診斷肝臟功能的重要指標(biāo)，在肝炎的臨床診斷及防治方面具有重要的臨床意義，同時也是《獻血者健康檢查要求》［1］規(guī)定的一項檢測項目。由于《中華人民共和國獻血法》的正式實施，近年來無償獻血的人數(shù)與日俱增，但其中由于ALT不合格而報廢的血液數(shù)量卻不容忽視。ALT缺乏特異性，體重指數(shù)、飲酒、運動、疲勞、服用藥物等均會影響其活性［2］，在不同性別以及年齡組間的差異亦具有顯著性意義［3］，因此由于ALT的報廢而造成的血源浪費日益嚴(yán)重。為了節(jié)約血液資源和確保臨床用血安全，必須尋求一種檢測方法既能檢測出不合格的血液以減少輸血相關(guān)疾病的傳播又能合理利用血液資源使報廢血量減少。基于此目的，本研究收集了250名獻血者的血液標(biāo)本，用3種不同的方法進行了檢測并與全自動生化儀的結(jié)果進行比對，現(xiàn)將結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

本實驗250個血液標(biāo)本來自于上海市血液中心250名無償獻血者。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 干化學(xué)試紙條法

本實驗分別采用MissionTMC100干式生化分析儀和其專用試紙條(艾康生物技術(shù)有限公司試紙條批號200912019)以及Reflotron plus快速全自動干式生化分析儀和其專用試紙條(德國羅氏公司試紙條)，分別按照操作要求吸取30μL血樣(血清或末梢血)到試紙條上，放入測試槽中，約2 min自動讀取結(jié)果。

1.2.2 半自動生化儀法(速率法)

用荷蘭威圖Microlab300半自動生化分析儀和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(上海復(fù)興長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司試劑批號L090543)，測定波長340 nm。

1.2.3 全自動生化分析儀法

用日立7600－010全自動生化分析儀和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒(和光)，測定波長340 nm。

1.3 實驗方法

1.3.1 干化學(xué)試紙條法

取100名獻血者的毛細(xì)血管血30μL分別用上述艾康與羅氏干式生化分析儀測試ALT，再用全自動生化儀測試該100名獻血者的血清ALT，以全自動生化儀測試結(jié)果為準(zhǔn)，分別用艾康和羅氏的定性結(jié)果與全自動生化儀的定性結(jié)果進行比較。檢測值＞40 U/L為陽性。

1.3.2 半自動生化儀法(速率法)

用上述威圖半自動生化分析儀測試另外100名獻血者的血清ALT，再用全自動生化儀測試該100名獻血者的血清ALT，以全自動生化儀測試結(jié)果為準(zhǔn)，用威圖半自動定性結(jié)果與全自動生化分析儀定性結(jié)果進行比較。檢測值＞40 U/L為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

本實驗統(tǒng)計學(xué)處理采用配對χ2檢驗以及直線相關(guān)－回歸分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 干化學(xué)試紙條法結(jié)果

干化學(xué)試紙條法測試100份毛細(xì)血管血ALT結(jié)果見表1。

表1 干化學(xué)試紙條法與全自動法測定ALT結(jié)果比較Tab 1 Dry chemistry method and full automatic method for the determination of ALT results comparison (n=100)

艾康干式法與和光全自動法進行配對χ2檢驗，χ2=2.25，查表得出 0.100 ＜P＜0.250，艾康定性結(jié)果與和光結(jié)果差異無顯著性意義;羅氏干式法與和光全自動進行配對 χ2檢驗，χ2=4.167，查表得出0.025＜P＜0.05，差異有顯著性意義。

2.2 半自動生化儀(速率法)結(jié)果

半自動法測試100份血清ALT結(jié)果見表2。

表2 半自動法與全自動法測定ALT結(jié)果比較Tab 2 Semi automatic and fully automatic method for the determination of ALT results comparison (n=100)

用威圖半自動法與和光全自動法進行配對χ2檢驗，χ2=0.25，查表得出 0.500 ＜P＜0.750，威圖半自動定性結(jié)果與和光全自動法結(jié)果差異無顯著性意義。

2.3 干化學(xué)法相關(guān)－回歸分析

2.3.1 艾康干式法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，艾康結(jié)果為Y軸作XY散點圖，見圖1，可見散點圖呈直線趨勢，相關(guān)系數(shù)r=0.9550。

圖1 艾康－和光散點圖Fig 1 ACON－WAKO scatter diagram

2.3.2 羅氏干式法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，羅氏結(jié)果為Y軸作XY散點圖，見圖2，可見散點圖呈直線趨勢，相關(guān)系數(shù)r=0.9724。

圖2 羅氏－和光散點圖Fig 2 Roche－WAKO scatter diagram

2.4 半自動法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，威圖半自動結(jié)果為Y軸作XY散點圖，見圖3，可見散點圖呈直線趨勢，相關(guān)系數(shù)r=0.9695。

圖3 威圖－和光散點圖Fig 3 VITALAB－WAKO scatter diagram

2.5 血清校準(zhǔn)法與和光全自動結(jié)果比較

本實驗統(tǒng)計分析得出威圖半自動法與全自動生化法相比差異無顯著性意義，且相關(guān)性較好;艾康干式法與全自動生化法相比差異無顯著性意義而羅氏干式法則與全自動生化法結(jié)果間差異存在顯著性意義，但從相關(guān)性上來看，羅氏干式法的相關(guān)性卻又優(yōu)于艾康干式法。通過觀察實驗數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，艾康干式法、羅氏干式法相對于全自動生化法的結(jié)果普遍偏低，那么相應(yīng)的降低干式法的檢測臨界值便可以解決干式法的漏檢問題。

為了計算新的臨界值，本研究用干式血清法對兩種干式法進行校準(zhǔn)，分別用艾康干式生化儀和羅氏干式生化儀再測定了50名和光檢測值處于臨界值附近的獻血者的血清ALT，結(jié)果見表3。

表3 血清校準(zhǔn)法與和光全自動結(jié)果比較Tab 3 Serum calibration method and fully automatic result comparison (n=50)

對以上結(jié)果進行配對χ2檢驗，艾康χ2=16.056，P＜0.005，羅氏 χ2=13.067，P＜0.005，艾康與羅氏血清法均與和光全自動法結(jié)果差異存在顯著性意義，兩種干式法的值均比和光全自動的值偏低。

2.5.1 直線回歸分析

以和光全自動的值為X軸，分別以艾康干生化和羅氏干生化的值為Y軸做XY散點圖，見圖4，圖5。

圖4 艾康－和光(血清)散點圖Fig 4 ACON－WAKO scater diagram(serum)

圖5 羅氏－和光(血清)散點圖Fig 5 Roche－WAKO scatter diagram(serum)

艾康干式法和羅氏干式法的值與和光全自動的值呈直線相關(guān)。通過計算得出艾康－和光的直線回歸方程為：y=6.8444+0.6963x;羅氏－和光的直線回歸方程為：y= －4.4364+0.9481x，代入和光的臨界值40 U/L，可以計算出艾康的臨界值應(yīng)調(diào)整至35 U/L，羅氏的臨界值應(yīng)調(diào)整至34 U/L。

由于在實際工作中，獻血者不愿為了測試ALT等太長時間以及測定血清ALT操作復(fù)雜費時等等原因，測毛細(xì)血管血ALT仍是主流，將新的臨界值帶回之前毛細(xì)血管血的測定，得出結(jié)果見表4。

表4 新臨界值干化學(xué)法與全自動法測定ALT結(jié)果比較(羅氏≤34艾康≤35)Tab 4 New critical value of dry chemicalmethod and fully automatic method for the determination of ALT results comparison

對此結(jié)果進行配對χ2檢驗，P＞0.05，兩種方法與和光全自動法相比，差異均不再有顯著性意義。

3 討論

一項調(diào)查證實，ALT活性增高的原因甚至與血標(biāo)本存放的溫度、時間均有密切的關(guān)系［4］，由于ALT缺乏特異性，為此某些國家篩查獻血者時ALT為非必檢項目［5］;但由于ALT活性濃度的檢測彌補了肝炎病毒感染的“窗口期”抗體檢測漏檢問題，因此ALT的檢測對于降低輸血風(fēng)險，預(yù)防肝炎傳播依舊具有積極的意義［6］。

本研究采用不同方法對250例血液樣本進行ALT測定，結(jié)果提示：威圖半自動生化分析儀結(jié)果良好，相關(guān)性好，與日立7600－010全自動生化分析儀相比無明顯差異;艾康干式法與羅氏干式法應(yīng)適當(dāng)調(diào)整臨界值，艾康應(yīng)調(diào)為35 U/L，羅氏應(yīng)調(diào)為34 U/L，這樣既能檢測出不合格的血液以減少輸血相關(guān)疾病的傳播又能合理利用血液資源使報廢血量減少，具有良好的社會效益，適用于血液中心ALT初篩。

［1］中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn).獻血者健康檢查要求［S］.GB18467－2001.

［2］Lee DH，Ha MH，Christiani DC.Body weight，alcohol consumption and liver enzyme activity－a 4－year followstudy［J］.Int JEpidemiol，2001，30(4)：766 －770.

［3］Dufour DR，Lott JA，Nolte FS，et al.Diagnosis and monitoring of hepatic injury.Ⅱ.Re－Commendation for use on laboratory tests in screening，diagnosis，and monitoring［J］.Clin Chemi，2000，46(12)：2050 －2068.

［4］劉正敏，李健.血樣標(biāo)本存放溫度和時間對ALT檢測結(jié)果的影響［J］.中國輸血雜志，2005，18(2)：123 －125.

［5］Van del pocl C，Noel L，Bar Bara J，etal.ISBA working party on transmissible diseases：report on workshop infectious diseas testing ane quality contro［J］.Vox Sang，1996，70：53.

［6］許友山，余偉.檢測血清ALT四種不同方法的比較分析［J］.實用醫(yī)技雜志，2006，13(20)：3603 －3604.

Evaluation of different inspection methods for ALT screening in blood donation

ZHOU Yong－jia，HAN Li，XIE Yun－zheng
(Blood Collecting and Supplying Technical Department，Shanghai Blood Center，Shanghai200051，China)

［Objective］Through comparing the results of different inspectionmethods，seeking a suitable inspectionmethod for ALT screening in blood centre for blood donation，to save the blood and greatly reduce the number of blood scrap caused by ALT unqualified.［Methods］Use MissionTMC100 biochemical analyzer，Reflotron plus biochemical analyzer and microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer each to inspect 100 blood donors＇ALT，then compare each results with Hitachi7600－010 automatic biochemistry analyzer.［Results］Compared with Hitachi 7600－010 automatic biochemistry analyzer，MissionTMC100 biochemical analyzerχ2=2.25，relevancer=0.9550;Reflotron plus biochemical analyzerχ2=4.167，relevancer=0.9724;microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer χ2=0.25，relevancer=0.9695.Conclusion：Microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer has a good result and it has a good correlation with Hitachi 7600－010 automatic biochemistry analyzer as well;MissionTMC100 biochemical analyzer and Reflotron plus biochemical analyzer are suggested to adjust critical value，MissionTMC100 biochemical analyzer is suggested to adjust to 35，while Reflotron plus is suggested to 34 U/L.

blood donation;inspection methods;IFCC;dry chemical apparatus examination

R446.1

A

1671－7295(2012)03－0293－04

2011－12－27;

2012－04－01

周永嘉(1972－)，女，江蘇吳縣人，主管技師。E－mail：angelajiayong@sohu.com