• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    B細(xì)胞激活因子與過敏性紫癜相關(guān)性研究①

    2012-02-05 13:58:28侯佳宜山西省中醫(yī)院檢驗(yàn)科太原030012
    中國免疫學(xué)雜志 2012年8期
    關(guān)鍵詞:機(jī)制血清水平

    侯佳宜 (山西省中醫(yī)院檢驗(yàn)科,太原030012)

    B細(xì)胞激活因子與過敏性紫癜相關(guān)性研究①

    侯佳宜 (山西省中醫(yī)院檢驗(yàn)科,太原030012)

    目的:通過分析B細(xì)胞激活因子(BAFF)與患者免疫球蛋白在不同類型過敏性紫癜(HSP)中的表達(dá),初步探討B(tài)AFF在過敏性紫癜免疫發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:收集HSP活動期患者,包括皮膚型30例、關(guān)節(jié)型30例、腹型32例、腎型31例、混合型41例,將健康人40例作為對照組。速率散射比濁法測定免疫球蛋白水平;ELISA方法檢測BAFF蛋白含量。結(jié)果:IgA僅在混合型HSP中增高,IgG和IgM在各組中并無增高;不同類型HSP活動期患者血清中BAFF表達(dá)水平均明顯高于對照組;混合型HSP患者血清中BAFF表達(dá)水平與同型患者IgA表達(dá)水平呈中等程度的相關(guān)性。結(jié)論:BAFF與HSP發(fā)病時的體液免疫增強(qiáng)有關(guān)。

    過敏性紫癜;B細(xì)胞激活因子;免疫球蛋白

    過敏性紫癜(Henoch-schonlein purpura,HSP)是一種以侵犯毛細(xì)血管為主要病變的變態(tài)反應(yīng)性疾病[1]。發(fā)病機(jī)制至今仍不明確,近年研究認(rèn)為免疫機(jī)制紊亂是HSP發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵,是導(dǎo)致患者系統(tǒng)性血管炎病理改變的始發(fā)因素。TNF家族的B細(xì)胞激活因子(B cell-activating factor belong to the TNF family,BAFF)是1999年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子(TNF)超家族新成員,又稱為B淋巴細(xì)胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,Blys),在體內(nèi) BAFF 有膜結(jié)合型和可溶性兩種活性形式??扇苄缘腂AFF大量存在于外周血及淋巴組織細(xì)胞的培養(yǎng)上清中,主要由嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌。BAFF是B淋巴細(xì)胞生長、發(fā)育和分化中重要的免疫調(diào)控因子,主要通過誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖、分化和分泌免疫球蛋白,增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答[2]。目前研究表明,BAFF過度表達(dá)刺激B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量抗體是自身免疫性疾病的主要發(fā)病機(jī)制[3],但關(guān)于BAFF在HSP發(fā)病機(jī)制中的意義報(bào)道甚少。為了研究BAFF在HSP患者體液免疫功能紊亂的關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)采用速率散射比濁法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測定過敏性紫癜患者外周血清中免疫球蛋白和BAFF的表達(dá)水平,初步探究HSP的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 研究對象 根據(jù)美國風(fēng)濕協(xié)會的診斷分類標(biāo)準(zhǔn),收集我院2010年4月至2010年12月住院或門診HSP患者,包括皮膚型30例、關(guān)節(jié)型30例、腹型32例、腎型31例、混合型41例,均為初診活動期,并將正常健康人40例作為對照組。

    1.2 主要試劑與儀器 人B淋巴細(xì)胞刺激因子ELISA檢測試劑盒(武漢博士德公司)、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 檢測試劑盒(美國 Beckman公司)、

    M

    ultiskanⅢ自動酶標(biāo)檢測儀(Labsystems公司)、Well wash MK2自動洗板機(jī)(Labsystems公司)、全自動特定蛋白儀(美國Beckman公司)。

    1.3 速率散射比濁法測定HSP免疫球蛋白 將標(biāo)本3 000 r/min離心10分鐘,分離血清。免疫球蛋白IgG、IgA、IgM檢測試劑盒內(nèi)含有稀釋液、緩沖液、抗血清等,按說明書配制,根據(jù)全自動特定蛋白儀程序要求進(jìn)行樣品測定。

    1.4 ELISA方法檢測 BAFF蛋白含量 將標(biāo)本3 000 r/min離心10分鐘,分離血清。酶標(biāo)孔加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品100 μl,37℃溫育90分鐘,不洗;加生物素標(biāo)記的 BAFF抗體 100 μl,37℃溫育 60分鐘,0.01 mol/L TBS洗滌3次;加親和素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)100 μl 37℃ 溫育 30 分鐘,0.01 mol/L TBS洗滌5次;每孔加入TMB顯色液90 μl,37℃避光反應(yīng)20分鐘,加終止液,在450 nm波長處測定各孔的OD值;在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣品濃度值。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用±s表示結(jié)果,兩組間比較以t檢驗(yàn)進(jìn)行分析,相關(guān)分析采用Spearman直線回歸分析法,求相關(guān)系數(shù)(r),并作顯著性檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果

    2.1 HSP患者血清中免疫球蛋白表達(dá)水平 不同類型HSP活動期患者血清中免疫球蛋白的比較見表1。IgA僅在混合型HSP中增高,與對照組相比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而IgG和IgM在各組中與對照組相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2.2 HSP患者血清中BAFF表達(dá)水平以及與免疫球蛋白表達(dá)水平相關(guān)性分析 不同類型HSP活動期患者血清中BAFF表達(dá)水平均明顯高于對照組(374.65 ±16.23)pg/ml,且各型之間未見顯著性差異(圖1)?;旌闲虷SP患者血清中BAFF表達(dá)水平(8 130±574.99)pg/ml與同型患者IgA表達(dá)水平呈中等程度的相關(guān)性(r=0.681,P <0.05,圖2)。

    表1 不同類型HSP活動期患者免疫球蛋白的比較(x ± s,g/L)Tab.1 The level of immunoglobulin in the different subtypes of HSP and control(±s,g/L)

    表1 不同類型HSP活動期患者免疫球蛋白的比較(x ± s,g/L)Tab.1 The level of immunoglobulin in the different subtypes of HSP and control(±s,g/L)

    Note:Compared with control group,1)P <0.05.

    Groups n IgA IgG IgM Skin group 30 1.53 ±0.34 10.42 ±1.66 1.68 ±0.43 Joint group 30 2.13 ±0.43 11.79 ±2.41 1.38 ±0.62 Abdomen group 32 2.28 ±0.48 12.47 ±3.39 1.65 ±0.84 Kidney group 31 1.88 ±0.54 12.19 ±3.45 1.69 ±0.68 Mixed group 41 3.71 ±0.881) 11.51 ±4.33 1.67 ±0.65 Control group 40 1.45 ±0.61 12.90 ±1.71 1.43 ±0.32

    3 討論

    HSP的發(fā)病機(jī)制至今仍不明確,涉及體液免疫和細(xì)胞免疫功能的紊亂,同時有凝血機(jī)制的參與,遺傳因素的作用也日漸引起人們的重視[4,5]。國內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn),HSP患兒體內(nèi)有大量的IgA免疫復(fù)合物,沉積于全身組織、器官的小血管壁,通過激活補(bǔ)體和激發(fā)炎癥細(xì)胞活性導(dǎo)致相應(yīng)組織、器官的炎性損傷[6]。本研究結(jié)果表明,混合型HSP中IgA增高,與國外研究結(jié)果一致。其他類型IgA不增高的現(xiàn)象,推測是因?yàn)榇罅康腎gA形成免疫復(fù)合物沉積于血管壁,而導(dǎo)致外周循環(huán)中的IgA不見增高。此外,對HSP病人血清中IgG、IgM的研究并無一致結(jié)論,有人認(rèn)為HSP發(fā)病時IgG水平升高,與腎臟系膜細(xì)胞抗原結(jié)合會導(dǎo)致紫癜性腎炎的病理性改變[7],然而本研究并未發(fā)現(xiàn)各組HSP患者IgG和IgM水平的增高。

    圖1 不同類型HSP活動期患者血清BAFF的比較Fig.1 The level of serum BAFF in the different subtypes of HSP and control

    圖2 混合型HSP患者血清中BAFF與同型免疫球蛋白表達(dá)水平相關(guān)性分析Fig.2 The correlation between serum BAFF and IgA in mixed group

    BAFF信號的正常表達(dá)與體液免疫應(yīng)答的平衡密切相關(guān)。BAFF具有明顯的B細(xì)胞趨向性,通過與后者的特異性結(jié)合,不僅調(diào)節(jié)B細(xì)胞的數(shù)量,而且在其分化、發(fā)育及存活方面發(fā)揮重要的調(diào)控作用[8]。對于休眠 B細(xì)胞,BAFF通過誘導(dǎo) NF-κB 的活性,促使其分化,進(jìn)而上調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá),延長B細(xì)胞的壽命[9]。而有報(bào)道證實(shí),BAFF與其相應(yīng)受體BCMA結(jié)合后,活化長壽命漿細(xì)胞并增加免疫球蛋白的分泌[10]。BAFF誘發(fā)疾病的原因可能是BAFF含量高低影響到B細(xì)胞的存活信號以及產(chǎn)生自身抗體的B細(xì)胞選擇性凋亡。國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)證實(shí),BAFF在體內(nèi)的病理性表達(dá)與多種自身免疫性疾病有關(guān),自身免疫性疾病的特征是B細(xì)胞耐受喪失,體內(nèi)產(chǎn)生大量針對自身組織成分的抗體。如SLE患者血清BAFF水平較正常人明顯升高,高濃度的BAFF誘導(dǎo)抗DNA抗體高表達(dá),并能促進(jìn)抗雙鏈DNA的B細(xì)胞成熟[11-13]。研究也發(fā)現(xiàn)RA患者血清中BAFF表達(dá)量增加,并且病情嚴(yán)重的RA患者,滑液中檢測到高濃度BAFF及其受體BAFFR[14]。

    BAFF已經(jīng)成為自身免疫性疾病發(fā)病和治療的關(guān)鍵因素之一,但關(guān)于BAFF在HSP發(fā)病機(jī)制中的意義報(bào)道甚少。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),混合型HSP中IgA增高,因此,我們推測產(chǎn)生免疫球蛋白的B細(xì)胞功能異常在其發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。而是何種原因引起了B細(xì)胞異常生成免疫球蛋白IgA,我們進(jìn)一步檢測了所有患者及對照組中BAFF的表達(dá),發(fā)現(xiàn)不同類型HSP活動期患者血清中BAFF表達(dá)水平均明顯高于對照組,且混合型HSP患者血清中BAFF表達(dá)水平與同型患者IgA表達(dá)水平呈中等程度的相關(guān),這些結(jié)果均進(jìn)一步提示,B細(xì)胞是BAFF重要的作用靶細(xì)胞,HSP發(fā)病時,BAFF與其受體相互作用可導(dǎo)致體液免疫功能上調(diào),B細(xì)胞異常活化,產(chǎn)生多種自身抗體、多克隆的免疫球蛋白,以IgA尤其是IgA1亞類為主,從而形成大量的IgA免疫復(fù)合物,導(dǎo)致了HSP的病理性改變。

    綜上所述,HSP的免疫發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,本研究發(fā)現(xiàn)混合型HSP患者的IgA分泌異常僅是體液免疫功能的部分表現(xiàn),而BAFF的水平升高與IgA變化相關(guān),提示在HSP這種免疫球蛋白表達(dá)異常增加的疾病中,BAFF至少部分參與了HSP的發(fā)病,很可能是體液免疫應(yīng)答亢進(jìn)的觸發(fā)因素。而BAFF通過何種途徑調(diào)節(jié)體液免疫以及BAFF在HSP發(fā)病時對細(xì)胞免疫是否有影響,有待進(jìn)一步的研究。

    1 Tullus K,Marks S D.Vasculitis in children and adolescents:clinical presentation,etiopathogenesis,and treatment[J].Paediatr Drugs,2009;11(6):375-380.

    2 Khan W N.B cell receptor and BAFF receptor signaling regulation of B cell homeostasis[J].J Immunol,2009;183(6):3561-3567.

    3 Pers J O,Daridon C,Devauchelle V et al.BAFF overexpression is associated with autoantibody production in autoimmune diseases[J].Ann N Y Acad Sci,2005;1050:34-39.

    4 Lau K K,Suzuki H,Novak J et al.Pathogenesis of Henoch-Schonlein purpura nephritis[J].Pediatr Nephrol,2010;25(1):179.

    5 Menegatti E,Davit A,F(xiàn)rancica S et al.Genetic factors associated with rheumatoid arthritis and systemic vasculitis:Evaluation of a panel of polymorphisms[J].Dis Markers,2009;27(5):217-223.

    6 Schmitt R,Carlsson F,Morgelin M et al.Tissue deposits of IgA-binding streptococcal M proteins in IgA nephropathy and Henoch-Schonlein purpura[J].Am J Pathol,2010;176(2):608-618.

    7 Hung S H,Yang Y H,Lee C C et al.Clinical predictors of self-limited urinalysis abnormality in childhood Henoch-Schonlein purpura nephritis[J].Acta Paediatr,2006;95(3):306-311.

    8 Hoek K L,Carlesso G,Clark E S et al.Absence of mature peripheral B cell populations in mice with concomitant defects in B cell receptor and BAFF-R signaling[J].J Immunol,2009;183(9):5630-5643.

    9 Castro I,Wright J A,Damdinsuren B et al.B cell receptor-mediated sustained c-Rel activation facilitates late transitional B cell survival through control of B cell activating factor receptor and NF-kappaB2[J].J Immunol,2009;182(12):7729-7737.

    10 O′Connor B P,Raman V S,Erickson L D et al.BCMA is essential for the survival of long-lived bone marrow plasma cells[J].J Exp Med,2004;199(1):91-98.

    11 Hong S D,Reiff A,Yang H T et al.B lymphocyte stimulator expression in pediatric systemic lupus erythematosus and juvenile idiopathic arthritis patients[J].Arthritis Rheum,2009;60(11):3400-3409.

    12 Fawzy S M,Gheita T A,El-Nabarawy E et al.Serum BAFF level and its correlations with various disease parameters in patients with systemic sclerosis and systemic lupus erythematosus[J].Egyptian Rheumatologlst,2011;33(1):45-51.

    13 Thorn M,Lewis R H,Mumbey-Wafula A et al.BAFF overexpression promotes anti-dsDNA B-cell maturation and antibody secretion[J].Cell Immunol,2010;261(1):9-22.

    14 Woo Y J,Yoon B Y,Jhun J Y et al.Regulation of B cell activating factor(BAFF)receptor expression by NF-κB signaling in rheumatoid arthritis B cells[J].Exp Mol Med,2011;43(6):350-357.

    [收稿2012-02-14 修回2012-05-28]
    (編輯 張曉舟)

    Study on association of BAFF and Henoch-schonlein purpura

    HOU Jia-Yi.Clinical Laboratory,Hospital of Traditional Chinese Medicine of Shanxi Province,Taiyuan 030012,China

    Objective:To observe the level of BAFF and immunoglobulin in different subtypes of Henoch-schonlein purpura (HSP),and to explore the role of BAFF in the pathogenesis of HSP.MethodsActive HSP patients were collected,including skin group(n=30),joint group(n=30),abdominal group(n=32),kidney group(n=31),mixed group(n=41),40 healthy people were chose as control group.The level of immunoglobulin was examined with Rate Nephelometry and ELISA method was used to detect BAFF.ResultsThe level of IgA was higher in mixed group than in control group,IgG and IgM did not increase in HSP;different subtypes of HSP patients expressed significantly higher level of BAFF in serum than the control group;the expression of serum BAFF moderately associated with the level of IgA in mixed group.ConclusionBAFF was related to enhancement of humoral immunity when HSP was in onset.

    Henoch-schonlein purpura;BAFF;Immunoglobulin

    R392.8

    A

    1000-484X(2012)08-0752-03

    10.3969/j.issn.1000-484X.2012.08.018

    ①本文為山西省中醫(yī)藥研究院院級課題基金項(xiàng)目(No.201105)

    侯佳宜(1983年-),女,免疫學(xué)碩士,檢驗(yàn)技師,主要從事自身免疫疾病發(fā)病機(jī)制方面的研究,E-mail:youhoujiayi0103@126.com。

    ·分子與細(xì)胞免疫學(xué)·

    猜你喜歡
    機(jī)制血清水平
    張水平作品
    血清免疫球蛋白測定的臨床意義
    中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:50:04
    Meigs綜合征伴血清CA-125水平升高1例
    慢性鼻-鼻竇炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表達(dá)及其臨床意義
    加強(qiáng)上下聯(lián)動 提升人大履職水平
    自制力是一種很好的篩選機(jī)制
    文苑(2018年21期)2018-11-09 01:23:06
    破除舊機(jī)制要分步推進(jìn)
    注重機(jī)制的相互配合
    打基礎(chǔ) 抓機(jī)制 顯成效
    中國火炬(2014年4期)2014-07-24 14:22:19
    血清β32-MG,Cys-C及U-mALB在高血壓腎損傷中的應(yīng)用
    午夜激情av网站| 1024香蕉在线观看| 日韩欧美免费精品| 99久久精品国产亚洲精品| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产在视频线精品| 动漫黄色视频在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产精品久久久久成人av| 青青草视频在线视频观看| 久久青草综合色| 精品卡一卡二卡四卡免费| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 丁香六月天网| 精品国产乱码久久久久久男人| 最黄视频免费看| √禁漫天堂资源中文www| 高清欧美精品videossex| 日韩欧美国产一区二区入口| 一个人免费在线观看的高清视频 | 不卡av一区二区三区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲免费av在线视频| 国产免费视频播放在线视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 女性生殖器流出的白浆| 一进一出抽搐动态| 男男h啪啪无遮挡| 国产亚洲av高清不卡| 精品人妻在线不人妻| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 一本色道久久久久久精品综合| 99久久综合免费| 国产精品久久久久久精品古装| 国产又色又爽无遮挡免| 国产成人精品久久二区二区91| 首页视频小说图片口味搜索| 国产成+人综合+亚洲专区| 99久久人妻综合| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久性视频一级片| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 亚洲av美国av| 成年人黄色毛片网站| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日本a在线网址| 99久久精品国产亚洲精品| 99九九在线精品视频| 91字幕亚洲| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 91精品伊人久久大香线蕉| 成人av一区二区三区在线看 | 日日爽夜夜爽网站| 乱人伦中国视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 性少妇av在线| netflix在线观看网站| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品九九99| 在线观看免费日韩欧美大片| 黄色a级毛片大全视频| 动漫黄色视频在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 中文字幕色久视频| 无限看片的www在线观看| 丁香六月天网| 亚洲精品自拍成人| 久久久久久久久免费视频了| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 91麻豆av在线| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久综合国产亚洲精品| 久久久久久人人人人人| 香蕉丝袜av| 少妇人妻久久综合中文| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 免费观看av网站的网址| 麻豆国产av国片精品| av网站在线播放免费| 制服人妻中文乱码| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 十八禁高潮呻吟视频| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲成国产人片在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 9色porny在线观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产欧美亚洲国产| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲av片天天在线观看| 青春草视频在线免费观看| 精品福利永久在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看 | 日本欧美视频一区| 十八禁人妻一区二区| 久久影院123| 在线观看舔阴道视频| 岛国在线观看网站| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 一本大道久久a久久精品| 亚洲国产欧美网| 日韩免费高清中文字幕av| 99国产精品一区二区三区| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲专区国产一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久久久久精品精品| 精品第一国产精品| 久久青草综合色| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产免费视频播放在线视频| av欧美777| 一级片免费观看大全| 午夜久久久在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 午夜久久久在线观看| 日韩一区二区三区影片| 国产男女超爽视频在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲全国av大片| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲国产精品一区三区| 91成人精品电影| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产一区二区 视频在线| 国产高清视频在线播放一区 | 9191精品国产免费久久| 97精品久久久久久久久久精品| 欧美 日韩 精品 国产| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲国产精品999| 成在线人永久免费视频| a在线观看视频网站| 一区在线观看完整版| 操美女的视频在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲情色 制服丝袜| 看免费av毛片| 国产精品久久久久久精品电影小说| 成年动漫av网址| 亚洲人成电影观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久精品成人免费网站| 99国产精品99久久久久| 久久天堂一区二区三区四区| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲精品国产av成人精品| 美女中出高潮动态图| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一级毛片精品| 欧美黑人精品巨大| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 无限看片的www在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产精品久久久久成人av| 日本91视频免费播放| 国产欧美日韩一区二区三 | 狠狠狠狠99中文字幕| 十八禁人妻一区二区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 老司机影院成人| 麻豆乱淫一区二区| 真人做人爱边吃奶动态| 啦啦啦在线免费观看视频4| www日本在线高清视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 大香蕉久久网| 永久免费av网站大全| 最新在线观看一区二区三区| 国产av国产精品国产| 久久久久久免费高清国产稀缺| 在线观看人妻少妇| 黄色视频不卡| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久久久国产精品人妻一区二区| 香蕉丝袜av| av天堂久久9| 亚洲精品国产av蜜桃| 大型av网站在线播放| 久久久久久久精品精品| 国产一区有黄有色的免费视频| 超色免费av| 国产1区2区3区精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 午夜福利视频精品| a级片在线免费高清观看视频| 黄色片一级片一级黄色片| 女性被躁到高潮视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 99热网站在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲国产精品一区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 高清欧美精品videossex| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 最新在线观看一区二区三区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 91大片在线观看| av线在线观看网站| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品久久久久成人av| 99精品欧美一区二区三区四区| 操美女的视频在线观看| 不卡一级毛片| 电影成人av| 国产成人免费无遮挡视频| 成年动漫av网址| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲人成77777在线视频| 两人在一起打扑克的视频| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 成人亚洲精品一区在线观看| 操出白浆在线播放| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲熟女毛片儿| 久久亚洲精品不卡| 国产精品.久久久| 精品国产乱码久久久久久男人| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产精品久久久久成人av| 免费少妇av软件| 永久免费av网站大全| 国产精品免费大片| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲全国av大片| 91av网站免费观看| svipshipincom国产片| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲五月婷婷丁香| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 在线av久久热| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费在线观看黄色视频的| 欧美精品亚洲一区二区| 男女免费视频国产| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产一区二区激情短视频 | 啦啦啦 在线观看视频| 欧美另类一区| 欧美在线黄色| 日本wwww免费看| 国产日韩欧美视频二区| 精品福利永久在线观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 三上悠亚av全集在线观看| 免费在线观看完整版高清| 十八禁人妻一区二区| 久久久国产一区二区| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲视频免费观看视频| 大香蕉久久成人网| 久久99热这里只频精品6学生| 好男人电影高清在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 国产av又大| 91精品国产国语对白视频| 嫩草影视91久久| 91成年电影在线观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲精品av麻豆狂野| 成人国产一区最新在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲综合色网址| 我要看黄色一级片免费的| 丝袜喷水一区| 男女免费视频国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美日韩av久久| 美女中出高潮动态图| 最新的欧美精品一区二区| 久久影院123| 亚洲熟女毛片儿| 欧美黑人精品巨大| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一级毛片精品| 精品乱码久久久久久99久播| 青春草亚洲视频在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲少妇的诱惑av| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产一区二区三区av在线| 久久久久国产精品人妻一区二区| 一级,二级,三级黄色视频| 五月天丁香电影| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| netflix在线观看网站| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲精品国产色婷婷电影| avwww免费| 国产男人的电影天堂91| 免费少妇av软件| 十分钟在线观看高清视频www| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产视频一区二区在线看| 母亲3免费完整高清在线观看| 无限看片的www在线观看| 老司机影院毛片| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产在线视频一区二区| 啦啦啦在线免费观看视频4| 在线精品无人区一区二区三| 久久久久久久精品精品| 成年人免费黄色播放视频| 久久热在线av| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲精品久久午夜乱码| 91精品三级在线观看| 两个人看的免费小视频| 久久中文看片网| 成人影院久久| 高清视频免费观看一区二区| 精品少妇久久久久久888优播| 1024香蕉在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲av美国av| 久久青草综合色| 99国产精品免费福利视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产真人三级小视频在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 少妇人妻久久综合中文| 久久久国产欧美日韩av| 中文字幕色久视频| 男女无遮挡免费网站观看| 人妻久久中文字幕网| 国产精品久久久av美女十八| 久久久国产一区二区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 老司机午夜福利在线观看视频 | 欧美黑人精品巨大| av天堂久久9| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲精品成人av观看孕妇| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲三区欧美一区| 免费观看a级毛片全部| 另类精品久久| 亚洲天堂av无毛| 亚洲三区欧美一区| 国产熟女午夜一区二区三区| 99九九在线精品视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产99久久九九免费精品| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频 | 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产精品一区二区免费欧美 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 黑丝袜美女国产一区| 美国免费a级毛片| 黄频高清免费视频| 欧美性长视频在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 电影成人av| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产一级毛片在线| 热99re8久久精品国产| 老熟女久久久| 老司机午夜福利在线观看视频 | 99re6热这里在线精品视频| 亚洲情色 制服丝袜| 十八禁网站免费在线| av在线播放精品| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 精品国产乱子伦一区二区三区 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 无限看片的www在线观看| 满18在线观看网站| 国产精品1区2区在线观看. | 99re6热这里在线精品视频| 脱女人内裤的视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产成人啪精品午夜网站| 在线永久观看黄色视频| 两个人看的免费小视频| 国产精品.久久久| 在线观看舔阴道视频| 欧美xxⅹ黑人| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲精华国产精华精| 国产精品一二三区在线看| 一区在线观看完整版| 嫩草影视91久久| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| tube8黄色片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 免费在线观看完整版高清| av在线播放精品| 亚洲精品第二区| 久久av网站| 亚洲国产av影院在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 午夜福利免费观看在线| 丰满迷人的少妇在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 少妇的丰满在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久精品亚洲av国产电影网| 九色亚洲精品在线播放| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产免费一区二区三区四区乱码| 99国产精品免费福利视频| 久久ye,这里只有精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 99国产精品免费福利视频| 中文字幕高清在线视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久久国产成人免费| 日本五十路高清| 在线av久久热| 久久久欧美国产精品| 看免费av毛片| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 无限看片的www在线观看| 国产精品 国内视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日本wwww免费看| 美女午夜性视频免费| 欧美另类一区| 岛国毛片在线播放| 一本大道久久a久久精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 热99re8久久精品国产| 免费少妇av软件| 搡老乐熟女国产| 国产一区二区三区综合在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 久久久久国内视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 各种免费的搞黄视频| 久久天堂一区二区三区四区| 99国产精品99久久久久| 大型av网站在线播放| 动漫黄色视频在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 他把我摸到了高潮在线观看 | 中文字幕制服av| 成人国产av品久久久| 国产一区二区三区综合在线观看| 无限看片的www在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 一级片'在线观看视频| 免费在线观看完整版高清| 丝袜美足系列| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲国产成人一精品久久久| 色综合欧美亚洲国产小说| 人妻一区二区av| 丰满少妇做爰视频| 中亚洲国语对白在线视频| 国产一级毛片在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 黑丝袜美女国产一区| 午夜激情av网站| 美女主播在线视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美精品av麻豆av| 在线天堂中文资源库| av不卡在线播放| 男女边摸边吃奶| 少妇粗大呻吟视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久精品亚洲av国产电影网| 在线观看人妻少妇| 欧美久久黑人一区二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲成人免费电影在线观看| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产欧美日韩一区二区三 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 久热爱精品视频在线9| 18禁黄网站禁片午夜丰满| av欧美777| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜视频精品福利| 国产男女内射视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 九色亚洲精品在线播放| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 在线观看免费高清a一片| 久久久久久久久久久久大奶| 嫩草影视91久久| 欧美国产精品一级二级三级| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一二三四在线观看免费中文在| 日韩有码中文字幕| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 色播在线永久视频| 十八禁人妻一区二区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产精品一区二区免费欧美 | 一区二区三区激情视频| 操美女的视频在线观看| 午夜福利,免费看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 欧美性长视频在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产真人三级小视频在线观看| av国产精品久久久久影院| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜视频精品福利| √禁漫天堂资源中文www| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲精品第二区| e午夜精品久久久久久久| 久久av网站| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 黄网站色视频无遮挡免费观看| 成人国语在线视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 超碰成人久久| 大香蕉久久成人网| 日本欧美视频一区| 91精品国产国语对白视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| videos熟女内射| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产伦人伦偷精品视频| 婷婷色av中文字幕| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日本精品一区二区三区蜜桃| 色老头精品视频在线观看| 女警被强在线播放| 99国产综合亚洲精品| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲综合色网址| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 欧美精品亚洲一区二区| 国产成人免费观看mmmm| 一二三四社区在线视频社区8| 手机成人av网站| 精品久久久久久电影网| 国产伦理片在线播放av一区| 老司机亚洲免费影院| 国产国语露脸激情在线看| 1024香蕉在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 美女主播在线视频| 另类亚洲欧美激情| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av福利片在线| 日韩精品免费视频一区二区三区| 丁香六月欧美| 国产成人影院久久av| 国产日韩欧美在线精品| 在线观看免费高清a一片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 精品亚洲成国产av| 国精品久久久久久国模美| 这个男人来自地球电影免费观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产成人av激情在线播放| 高清黄色对白视频在线免费看| 丝瓜视频免费看黄片| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲av欧美aⅴ国产| 999久久久国产精品视频| av一本久久久久| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 一个人免费在线观看的高清视频 | 中国美女看黄片| 国产野战对白在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频 |