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    咽舒噴霧劑組方合理性驗(yàn)證研究

    2012-02-02 06:06:16崔清華張雷明薛云麗田景振
    藥學(xué)研究 2012年11期
    關(guān)鍵詞:山豆根原方噴霧劑

    崔清華,張雷明,薛云麗,田景振

    (1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東濟(jì)南250335;2.煙臺大學(xué),山東煙臺254000;3.南京綠葉思科藥業(yè)有限公司,江蘇南京210061)

    咽舒噴霧劑是由山豆根、黃芩、丹皮、赤芍、生地、薄荷等11味藥材組成的復(fù)方醫(yī)院制劑,具有清熱養(yǎng)陰、解毒利咽、活血生津等功效。臨床用于治療各種急慢性咽炎,作用直接、迅速、持久。對復(fù)方研究時(shí)發(fā)現(xiàn)山豆根主要有效成分生物堿類會與其他黃酮類成分產(chǎn)生沉淀反應(yīng),導(dǎo)致有效成分損失,降低藥效,有必要對方中山豆根的去留做一篩選。另咽舒復(fù)方中大部分藥物為治療咽炎常用藥,而赤芍、生地這兩味藥材無論從化學(xué)成分還是藥理活性上均沒有文獻(xiàn)表明有治療咽炎作用,故對這兩味藥材逐一拆方考察[1],觀察精簡后的不同處方對有效組分含量及抗炎效果的影響,闡明方劑配伍的科學(xué)性,并為咽舒噴霧劑的劑型完善奠定基礎(chǔ)。

    1 材料

    扶他林乳膠劑(北京諾華制藥有限公司,批號X2045);咽舒噴霧劑組方所用藥材(煙臺綠葉有限公司,均符合《中國藥典》2010年版各項(xiàng)下質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求);硝酸鋁、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、三氯甲烷、溴麝香酚藍(lán)、磷酸二氫鉀等,均為分析純或化學(xué)純;AR3130分析天平(Adventurer公司);健康SPF級昆明種小鼠,體重(20±2)g[山東綠葉制藥有限公司實(shí)驗(yàn)動物中心,動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(魯)2009-0009];752紫外分光光度計(jì)(上海元析);PHS-3C pH計(jì)(上海三信)等。

    2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

    2.1 供試品溶液的制備 丹皮、薄荷置多功能提取器中提取揮發(fā)油,收集蒸餾液。山豆根等幾味,按簡單拆方法分別對不同組方下得藥材加10倍量水煎煮2次,每次1.5 h,合并煎煮液,濾過,濃縮至每毫升藥液中藥材量為0.1 g,加入揮發(fā)油,混勻,分別制備原方藥液、全方減山豆根、全方減赤芍、全方減生地共四種藥液,備用。

    2.2 總黃酮含量測定(亞硝酸鈉-硝酸鋁顯色法)[2]以蘆丁為對照品,取供試品溶液1 mL,置25mL容量瓶中,加水至6 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,搖勻,放置6 min,加10%硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,放置6 min,加氫氧化鈉試液10 mL,再加水至刻度,搖勻,放置15 min,以相應(yīng)的試劑為空白,照紫外-可見分光光度法,在500 nm處測定吸光度。

    2.3 總生物堿含量測定(酸性染料比色法)[3]以氧化苦參堿作對照品,取供試品溶液1 mL,置于60 mL分液漏斗中,精密加入pH 7.6的緩沖溶液8 mL,0.001 mol·L-1溴甲酚藍(lán)液2 mL,混勻后加入三氯甲烷10 mL,振搖萃取5 min,放置10 min,分層,分取三氯甲烷液加入含有0.2 g無水硫酸鈉的10 mL量瓶中,搖勻,放置10 min,以三氯甲烷作為空白,在414 nm波長下測定吸光度。

    2.4 抗炎作用[4]昆明種小鼠60只,雌雄各半,隨機(jī)分成6組:生理鹽水對照組、扶他林乳膠劑組、咽舒噴霧劑原方組、原方減山豆根組、原方減赤芍組、原方減生地組。每組小鼠左、右耳前、后兩面分別用棉棒涂生理鹽水及相應(yīng)藥物(分2次給藥,間隔30 min)。末次給藥30 min后,在各組小鼠右耳涂二甲苯12 μL(前后各6 μL),1 h后處死動物,用9 mm打孔器于每只小鼠的左右耳相同部位打下耳片,分別稱重,計(jì)算腫脹率及腫脹抑制率,比較組間差異的顯著性。

    腫脹值=右耳片重-左耳片重;

    腫脹率=腫脹值/左耳片重;

    腫脹抑制率=(對照組腫脹均值-用藥組腫脹均值)/對照組腫脹均值。

    2.5 結(jié)果 總黃酮含量測定標(biāo)準(zhǔn)曲線:C=2.147 7A+ 0.071,R2=0.999 2(0.38~1.14 mg·mL-1內(nèi)線性范圍良好)。

    總生物堿含量測定標(biāo)準(zhǔn)曲線:C=1.783 4A+0.037 2,R2=0.996 3(0.2~1.2 mg·mL-1內(nèi)線性范圍良好)。

    有效組分含量測定及抗炎效果見表1、表2。

    表1 咽舒噴霧劑不同組方總黃酮及生物堿含量測定結(jié)果(n=3)

    表2 咽舒噴霧劑不同組方對小鼠二甲苯致耳腫脹的影響(n=10)

    3 討論

    拆方研究可說明中藥復(fù)方的配伍關(guān)系和組方理論,通過拆方分析得出的規(guī)律性認(rèn)識,為研制中藥復(fù)方新藥提供可靠的依據(jù)。中藥復(fù)方是按君臣佐使配伍的,是中醫(yī)用藥的特色所在。現(xiàn)代復(fù)方藥理研究,對多個(gè)方劑進(jìn)行拆方等深入研究后,在一定程度上證實(shí)了方劑配伍的合理性。拆方研究對篩選方劑的有效成分,優(yōu)化方劑的配伍不失為一種好的方法[5]。

    組分含量和抗炎效果成正比關(guān)系,證明所選指標(biāo)有意義。有效組分結(jié)合藥效學(xué)雙重指標(biāo)得出的結(jié)論更具有科學(xué)性和使用性。原方減山豆根后,無論從有效組分含量還是抗炎作用效果上都相比原方有很大損失。證明山豆根在復(fù)方中的作用,其正面效果遠(yuǎn)大于負(fù)面效應(yīng),故應(yīng)保留。

    原方減赤芍后其有效組分和藥效損失均超過10%,大于單味藥材的平均值,故應(yīng)保留。原方減生地后組分含量有少量損失,藥理結(jié)果與原處方不相上下,考慮到可能存在長效作用等未知因素,故選擇尊重原方,保留地黃。

    本實(shí)驗(yàn)通過簡單拆方對咽舒復(fù)方中有爭議的藥味逐一減少以觀察療效變化,尋找組效關(guān)系。從中找出起主導(dǎo)作用的藥物,或各味藥物在復(fù)方中的地位,或各味藥之間的最佳配伍比例[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分顯示了原處方配伍的合理性和科學(xué)性。雖然沒有達(dá)到精簡處方的目的,但是從組分和藥理兩方面證實(shí)了山豆根在方中的君藥地位;赤芍和生地的存在顯示了中醫(yī)理論指導(dǎo)下的增效減毒作用。研究表明,咽舒噴霧劑組方合理,藥效明確,具備進(jìn)一步開發(fā)的價(jià)值。

    [1] 朱萱萱,紀(jì)偉,彭青,等.熱痹消治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的拆方研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2004,22(3):433-434.

    [2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:333.

    [3] 邵晶,倪京滿,郭玫,等.苦參藥材中總生物堿含量的測定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(36):15950-15951,15967.

    [4] 許建安.五鶴續(xù)斷抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2011,24(4):449-451.

    [5] 李凌艷,馬長勇.中藥復(fù)方研究的現(xiàn)狀與方法探析[J].齊魯藥事,2011,30(1):44-47.

    [6] 王麗靜,賈曉斌,陳彥,等.中藥復(fù)方拆方研究的思路與方法[J].中成藥,2008,30(9):1343-1346.

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