中藥雙黃補(bǔ)對(duì)牙周病防治機(jī)制研究進(jìn)展

于金兵

甘肅省武威市第二人民醫(yī)院口腔科，甘肅武威 730009

牙周病是發(fā)生在牙周支持組織的疾病，菌斑、牙石、咬合創(chuàng)傷等局部因素及糖尿病等全身系統(tǒng)性疾病因素均與牙周病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。其主要臨床表現(xiàn)有牙齦出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收、牙齒松動(dòng)移位，是造成牙齒缺失的主要疾病，對(duì)患者生活質(zhì)量影響較大。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)牙周病及其治療早有記載。中藥雙黃補(bǔ)由黃連、黃芩、骨碎補(bǔ)等中藥配伍而成，可通過三種配伍中藥綜合作用防治牙周病。國內(nèi)學(xué)者許彥枝等[1-4]通過大量研究發(fā)現(xiàn)雙黃補(bǔ)對(duì)人牙周膜細(xì)胞的總蛋白含量有提高作用，可促進(jìn)人牙周膜細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，使細(xì)胞代謝更旺盛，功能更活躍，并且可使成纖維細(xì)胞生長因子18水平升高，還有誘導(dǎo)人牙周膜細(xì)胞向成骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用，使細(xì)胞合成膠原的功能增強(qiáng)。在抑制牙周可疑致病菌方面，證明雙黃補(bǔ)煎液對(duì)牙齦卟啉單胞菌（Pg）、中間普氏菌（Pi）和具核梭桿菌（Fn）均有較明顯的抑菌作用。雙黃補(bǔ)防治牙周病的機(jī)制主要有促進(jìn)牙周組織再生修復(fù)、抑制炎癥反應(yīng)、抗菌及抗內(nèi)毒素等。

1 促進(jìn)牙周組織再生修復(fù)

牙周膜細(xì)胞具有趨化黏附、增殖、生物合成、分化為成骨細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞和形成礦化組織等多項(xiàng)生物學(xué)功能，通過增殖、分化可使病變牙周支持組織再生修復(fù)，對(duì)牙周病患者余留牙的保留與維持具有重要意義。雙黃補(bǔ)中黃芩的主要有效成分是黃芩苷，已有國內(nèi)外學(xué)者研究證實(shí)，黃芩苷可明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞增殖并增加細(xì)胞總蛋白[5-6]。李成章等[7]通過體外培養(yǎng)人牙周韌帶細(xì)胞與10 ng/mL的黃芩苷孵育5 d后通過透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)現(xiàn)用藥組細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等較對(duì)照組明顯增多，說明黃芩苷能促進(jìn)成牙周韌帶細(xì)胞的代謝和蛋白質(zhì)的合成。同樣，雙黃補(bǔ)另一主要成分黃連也可明顯增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞活性。余占海等[8]采用噻唑藍(lán)（MTT）比色法、考馬斯亮藍(lán)法、酶動(dòng)力學(xué)方法觀察不同濃度黃連有效成分鹽酸小檗堿對(duì)體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞活性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，濃度范圍0.010～0.020 g/L內(nèi)的鹽酸小檗堿作用于人牙周膜細(xì)胞，可促進(jìn)其增殖及生物合成作用，并能增強(qiáng)牙周膜細(xì)胞堿性磷酸酶活性。骨碎補(bǔ)及其有效成分提取物柚皮苷，也可對(duì)牙周膜細(xì)胞的增殖及分化能力產(chǎn)生影響，Sun等[9]發(fā)現(xiàn)骨碎補(bǔ)可促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，堿性磷酸酶表達(dá)活性增強(qiáng)，說明骨碎補(bǔ)可促進(jìn)成骨。國內(nèi)學(xué)者[10-11]研究發(fā)現(xiàn)，骨碎補(bǔ)可提高人牙周膜細(xì)胞增殖并增加堿性磷酸酶活性，有利于牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化，有利于牙周組織修復(fù)，這與Sun等[9]的研究結(jié)果一致。陳莉麗等[12]通過建立大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎研究骨碎補(bǔ)對(duì)牙槽骨吸收的影響，發(fā)現(xiàn)骨碎補(bǔ)提取液對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙槽骨吸收有明顯的療效，能抑制骨質(zhì)吸收，促進(jìn)骨質(zhì)再生。牙周膜細(xì)胞總蛋白含量的高低，可反映其功能的活躍程度，而堿性磷酸酶是成骨細(xì)胞發(fā)揮功能的重要指標(biāo)，以上研究均表明雙黃補(bǔ)有效成分在牙周組織的再生與修復(fù)中起到明顯作用。

2 抑制炎癥反應(yīng)

牙周病發(fā)病過程中，細(xì)菌及其毒性產(chǎn)物可誘導(dǎo)宿主發(fā)生免疫反應(yīng)，在淋巴細(xì)胞及多種基質(zhì)金屬蛋白酶或膠原酶作用下造成牙周軟組織破壞，并激活破骨細(xì)胞造成牙槽骨吸收。各種炎癥細(xì)胞因子如白介素 1（IL-1）、白介素 6（IL-6）、腫瘤壞死因子 α （TNF-α）及前列腺素 E2（PGE2）等發(fā)揮了重要作用，在牙周病患者的齦溝液中IL-1、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平明顯高于健康人。IL-1及TNF-α可直接或間接介導(dǎo)骨吸收[13]，所以與牙周病牙槽骨喪失密切相關(guān)。黃芩有清除氧自由基、調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等作用，而黃連對(duì)炎癥細(xì)胞因子的影響也已被證實(shí)，可有效降低牙周病變組織中IL-1、IL-6、TNF-α的表達(dá)[14-15]，抗炎作用明顯。PGE2可由IL-1刺激牙周膜細(xì)胞產(chǎn)生，在牙周病患者的齦溝液及牙周組織中表達(dá)顯著，其與牙周炎牙槽骨吸收關(guān)系密切[16]。李敏等[17]研究證實(shí)，黃芩苷可明顯抑制IL-1β刺激體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞分泌PGE2的水平。也有研究證實(shí)，黃芩苷可抑制IL-1β刺激人牙周細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶1酶原（pro-MMP-1）和基質(zhì)金屬蛋白酶 3 （MMP-3）表達(dá)[18]，而 M MP-1及 M MP-3在牙周細(xì)胞外基質(zhì)降解的過程中起到了重要作用。故以黃連、黃芩、骨碎補(bǔ)配伍而成的雙黃補(bǔ)可通過抑制牙周病患者牙周組織炎癥，減少牙周組織破壞吸收，促進(jìn)組織再生等達(dá)到治療效果。

3 抗菌及抗內(nèi)毒素作用

牙周組織中的菌斑細(xì)菌及其毒性產(chǎn)物，是牙周病的始動(dòng)因素，正是這些牙周可疑致病菌及其毒性產(chǎn)物激發(fā)了宿主免疫反應(yīng)，造成牙周組織炎癥及破壞。雙黃補(bǔ)中的黃連、黃芩均有較強(qiáng)的抗菌作用。黃連抗菌譜廣，白喉?xiàng)U菌、金球菌等G+菌，大腸桿菌及淋球菌等G－菌均對(duì)其敏感，同時(shí)還有抵抗細(xì)菌內(nèi)毒素（LPS）毒性的作用[19]。黃吉燕等[20]研究證實(shí)，對(duì)于牙周可疑致病菌，如牙齦卟啉單胞菌（Pg）、具核梭桿菌（Fn）、伴放線放線菌（Aa）等，黃連及其提取物具有明顯的抑菌作用。張良等[21]在體外厭氧環(huán)境測(cè)定黃芩提取物對(duì)牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌、伴放線放線桿菌、具核梭桿菌、血鏈球菌五種常見牙周細(xì)菌的最小抑菌濃度 （MIC）和最小殺菌濃度（MBC），結(jié)果顯示黃芩對(duì)各實(shí)驗(yàn)菌株均有明顯抑制作用。LPS是G－厭氧菌的胞壁外膜中的脂多糖，是牙周炎癥的主要啟動(dòng)因子之一，可通過影響牙周膜細(xì)胞的生長和增殖，損傷細(xì)菌超微結(jié)構(gòu)，抑制細(xì)胞DNA合成等途徑引起和加重牙周炎癥反應(yīng)[22]。有研究表明，黃芩苷可抑制LPS毒性作用，保護(hù)人牙周細(xì)胞活性[23]。骨碎補(bǔ)除了促進(jìn)牙周組織修復(fù)與再生外，也具有抑菌作用，已有研究證實(shí)其可抑制牙齦卟啉單胞菌胰酶樣蛋白酶和糖苷酶的活性，胰酶樣蛋白酶和糖苷酶是兩種蛋白水解酶，可降解宿主牙周組織中的蛋白及膠原等，故骨碎補(bǔ)可降低牙齦卟啉單胞菌的毒力，抑制菌斑形成，減輕牙周支持組織的破壞[24]。

4 討論

中醫(yī)認(rèn)為，牙周病是肝腎虧虛、氣血不足所致，與五臟六腑、氣血風(fēng)熱關(guān)系密切。利用天然藥物治療牙周疾病毒副作用小，且中醫(yī)重視辨證施治，將牙周炎分為胃火上蒸、腎陰虧虛、氣血不足三型，注重局部和全身的整體聯(lián)系，有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。目前以中醫(yī)藥為代表的天然藥物治療牙周病的研究越來越多，但是單獨(dú)應(yīng)用一種藥物，不可避免地存在不足，雙黃補(bǔ)由三種中藥配伍制成，從促進(jìn)牙周組織再生修復(fù)、抑制炎癥反應(yīng)、抗菌及抗內(nèi)毒素等多方面發(fā)揮治療效果，其中黃芩和黃連具有更明顯的抗炎、抗菌作用，而骨碎補(bǔ)具有更好地促進(jìn)牙周組織修復(fù)與再生的作用。三種藥物相輔相成、聯(lián)合作用，促進(jìn)牙周病患者的痊愈，且因其是天然藥物，無明顯毒副作用，更易被患者接受。故將雙黃補(bǔ)開發(fā)、研制成各種劑型，通過不同作用途徑用于防治牙周病或作為牙周基礎(chǔ)治療的輔助用藥，具有廣闊的應(yīng)用前景。

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