不同廠家生產(chǎn)的硝苯地平片體外溶出度的比較

王 翼，王 華，詹長娟，陳 娟

（1.南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院化工學(xué)院，泰州225300；2.南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院化工學(xué)院2008級本科生，泰州225300）

硝苯地平為鈣通道阻滯劑，臨床上廣泛用于治療高血壓和心絞痛［1］。該藥的溶出度較小，對于難溶性藥物，溶出度直接影響藥物在體內(nèi)的吸收。目前，《英國藥典》2010版、《美國藥典》第34版和《中華人民共和國藥典》2010版均建立了硝苯地平制劑的溶出度檢測方法，但是各國藥典對硝苯地平制劑溶出度的檢測方法和溶出限度存在較大差異。國內(nèi)生產(chǎn)硝苯地平片的廠家很多，但是不同廠家的處方和生產(chǎn)工藝不同，從而導(dǎo)致不同廠家的硝苯地平片溶出度有差異。本研究對國內(nèi)5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片的溶出度進行了考察，以期為評定和控制藥品質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 AL104電子天平（梅特勒－托利多儀器有限公司）；UV－2450紫外－可見分光光度計（日本島津公司）；ZRS－8L智能溶出實驗儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；KH－400KDV高功率數(shù)控超聲波清洗器（江蘇省昆山市禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）。

1.2 藥品和試劑 國內(nèi)5個廠家（代號A～E）生產(chǎn)的硝苯地平片（規(guī)格10mg／片，A：批號110801，B：批號110305，C：批號C110801，D：批號20111219，E：批號1201161）；硝苯地平原料藥（含量99.76%，陜西西岳制藥有限公司，批號1105001）；乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉（化學(xué)純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；磷酸二氫鉀（分析純，上海威方精細化工有限公司）；氫氧化鈉（分析純）、人工胃液（不含蛋白酶）、鹽酸（分析純）、氯化鈉（分析純）、甲醇（分析純）均由江蘇省無錫市佳妮化工有限公司提供；水為重蒸水，由南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院化工學(xué)院自制。

2 方法和結(jié)果

2.1 硝苯地平的含量測定 準(zhǔn)確稱取硝苯地平原料藥25.0mg，置100ml棕色容量瓶中，加70ml甲醇超聲使之完全溶解，然后加甲醇至刻度，定容即得硝苯地平母液。準(zhǔn)確移取10ml母液置于100ml棕色容量瓶中，加溶出介質(zhì)定容至刻度，得到硝苯地平儲備液。以溶出介質(zhì)為對照，將儲備液在190～500nm范圍內(nèi)進行紫外掃描，測得最大吸收波長。稀釋儲備液，得到系列濃度的硝苯地平工作溶液，在最大吸收波長處分別測定吸光度，計算相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。

2.2 硝苯地平片的溶出度測定

2.2.1 根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版測定 根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版［2］，采用槳法測定硝苯地平片的溶出度，溶出介質(zhì)為900ml 0.25%十二烷基硫酸鈉（SDS）溶液，轉(zhuǎn)速為120r／min。采用紫外分光光度法，硝苯地平的最大吸收波長為237nm，按2.1項下方法對吸光度（A）和濃度（c）進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.057 8 c＋0.01（r＝0.999 6），在2.45～12.25μg／ml范圍內(nèi)，濃度與吸光度呈良好線性關(guān)系。依次測定A、B、C、D、E 5個廠家的硝苯地平片的溶出度，繪制溶出曲線，見圖1（A）。5個廠家的硝苯地平片在60min的累積溶出度分別為81.33%、92.03%、93.66%、87.22%和95.24%，均＞75%，符合《中華人民共和國藥典》2010年版的要求。10min時，5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片的溶出度為1.56%～66.98%不等，表明5種硝苯地平片的溶出速度相差很大。

2.2.2 根據(jù)《英國藥典》2010版測定硝苯地平片的溶出度 根據(jù)《英國藥典》2010版［3］，采用槳法測定硝苯地平片的溶出度，以900ml 0.1mol／L鹽酸溶液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50r／min。采用紫外分光光度法，硝苯地平的最大吸收波長為238nm，按2.1項下方法，對A和c進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.059 2 c－0.005 6（r＝0.999 9），濃度在5～15μg／ml范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。依次測定A、B、C、D、E 5個廠家的硝苯地平片的溶出度，繪制溶出曲線，見圖1（B）。5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片在45min的累積溶出度分別為32.02%、60.83%、31.31%、48.34%和44.61%，都＜75%，未達到《英國藥典》2010年版的要求。

2.2.3 根據(jù)《美國藥典》第34版測定硝苯地平片的溶出度 《美國藥典》第34版中硝苯地平片的溶出度測定方法與《英國藥典》相同，但溶出介質(zhì)為人工胃液（不含胃蛋白酶）［4］。采用紫外分光光度法，硝苯地平的最大吸收波長為238nm，按2.1項下方法，對A和c進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.059 2 c－0.005 6（r＝0.999 9）。按2.2.2項下方法操作，得到5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片的溶出曲線，見圖1（C）。5個廠家的硝苯地平片在20min的累積溶出度分別為6.93%、20.06%、10.73%、26.29%和21.91%，都遠遠小于《美國藥典》要求的80%，不符合要求。

2.3 硝苯地平片在另外3種溶出介質(zhì)中的溶出度 采用紫外分光光度法測定硝苯地平片的溶出度，溶出介質(zhì)為水時，硝苯地平的最大吸收波長為237nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.084 c－0.006 1（r＝0.999 8）；溶出介質(zhì)為pH4.5乙酸鈉緩沖液時，最大吸收波長為239nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.077 c＋0.002 4（r＝0.999 9）；溶出介質(zhì)為pH6.8磷酸鹽緩沖液時，最大吸收波長為237nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A＝0.082 2 c－0.001 9（r＝0.999 9）。以上標(biāo)準(zhǔn)曲線方程的線性范圍均為2.45～12.25μg／ml。按照《中華人民共和國藥典》2010年版方法，分別以經(jīng)過脫氣處理的水、pH4.5的乙酸鈉緩沖液以及pH6.8的磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為120r／min，測定硝苯地平片的溶出度，得到溶出曲線見圖2（A、B、C）。

2.4 不同溶出介質(zhì)對硝苯地平片溶出度的影響 采用相似因子f2法［5］，對5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片在0.25%SDS溶液、0.1mol／L鹽酸溶液、人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出度進行評價。相似因子的計算公式為：

圖1 5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片的溶出曲線Figure 1 Dissolution curves of nifedipine tablets manufactured by 5pharmaceutical factories

圖2 5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線Figure 2 Dissolution curves of nifedipine tablets manufactured by 5 pharmaceutical factories in different dissolution media

如果50≤f2≤100，則表示硝苯地平片在兩種溶出介質(zhì)中的溶出曲線相似。式中n為時間點的個數(shù)，Rt為硝苯地平在對照溶液中時間t的溶出度，Tt為硝苯地平在試驗溶液中時間t的溶出度。

2.4.1 以0.1mol／L鹽酸溶液為對照溶液 以0.1mol／L鹽酸溶液為對照溶液，以人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液為實驗溶液。結(jié)果發(fā)現(xiàn)5個廠家生產(chǎn)的硝苯地平片在上述4種溶出介質(zhì)中的溶出曲線與在0.1mol／L鹽酸溶液中的溶出曲線的相似因子f2為50.93～77.45，均在50～100范圍內(nèi)，表明硝苯地平在這4種溶出介質(zhì)中的溶出行為與在0.1mol／L鹽酸溶液中的溶出行為相似。

2.4.2 以0.25%SDS溶液為對照溶液 以0.25% SDS溶液為對照溶液，以0.1mol／L鹽酸溶液、人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液為實驗溶液。結(jié)果發(fā)現(xiàn)硝苯地平在上述5種溶出介質(zhì)中的溶出曲線與在0.25%SDS溶液中的溶出曲線的相似因子f2為 9.29～27.61，遠＜50。表明硝苯地平在0.1mol／L鹽酸溶液、人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出行為與在0.25%SDS溶液中的溶出行為不相似。

3 討 論

《中華人民共和國藥典》2010年版、《英國藥典》2010年版和《美國藥典》第34版測定硝苯地平溶出度的溶出介質(zhì)分別為0.25%SDS溶液、0.1mol／L鹽酸溶液和人工胃液，溶出度的限度標(biāo)準(zhǔn)分別為“60min時累積溶出度為標(biāo)示量的75%”，“45min時累積溶出度為標(biāo)示量的75%”，“20min時累積溶出度為標(biāo)示量的80%”［2－4］，并且測定溶出度的轉(zhuǎn)速也不同。《中華人民共和國藥典》測定方法的轉(zhuǎn)速最高，為120r／min，《英國藥典》和《美國藥典》測定方法的轉(zhuǎn)速均為50r／min?！吨腥A人民共和國藥典》的要求標(biāo)準(zhǔn)最低，《美國藥典》的要求標(biāo)準(zhǔn)最高。本研究發(fā)現(xiàn)，溶出度符合《中華人民共和國藥典》標(biāo)準(zhǔn)的硝苯地平片并不符合《英國藥典》和《美國藥典》的要求，由此也間接證實了《中華人民共和國藥典》與《英國藥典》和《美國藥典》在要求上的差異。另外，在相同測定條件下，硝苯地平片在0.25%SDS溶液中的溶出度遠遠高于在0.1mol／L鹽酸溶液、人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出度，且差異較大，根據(jù)相似因子f2法測定，不存在相似性。而在0.1mol／L鹽酸溶液、人工胃液（不含胃蛋白酶）、水、pH4.5乙酸鈉緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液中，硝苯地平片的溶出行為相似，表明硝苯地平的溶出度受pH值的影響較小。分析原因，可能是由于硝苯地平本身作為難溶性藥物，在SDS溶液中溶解度大大提高，溶出度也相應(yīng)增加。但是，SDS溶液與胃液相差較大，以SDS溶液作為溶出介質(zhì)的溶出度與藥物的體內(nèi)溶出度的差異和相關(guān)性還有待進一步研究。根據(jù)《英國藥典》，溶出介質(zhì)為0.1mol／L鹽酸溶液，配制方法為：量取鹽酸8.2ml，用水稀釋至1 000ml，即得，pH值為1.01。根據(jù)《美國藥典》，溶出介質(zhì)為人工胃液（不含胃蛋白酶），配制方法為：精密稱取2.0g氯化鈉，量取7.0ml鹽酸，并用蒸餾水稀釋至1 000ml，即得，pH值為1.09。作者認為兩種溶出介質(zhì)的pH值相差不大，并且硝苯地平的溶出度受pH值影響較小，所以使用相同的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行計算。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典臨床用藥須知（2010年版）.化學(xué)藥與生物制品卷［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：239.

State Pharmacopoeia Committee.Instructions for clinical medication of Pharmacopoeia of the People’Republic of China（2010 ed）.Volume of chemical drugs and biological agents［S］.Beijing：Chinese Medical Science Press，2010：239.In Chinese.

［2］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典.2010年版二部［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：944，附錄85.

State Pharmacopoeia Committee.Pharmacopoeia of the People’s Republic of China.2010ed.Volume 2［S］.Beijing：Chinese Medical Science Press，2010：944，appendix 85.In Chinese.

［3］ British Pharmacopoeia Committee.British Pharmacopoeia.2010ed.Volume 3［S］.London：The Stationery Office，2010：747.

［4］ United States Pharmacopeia Committee.United States Pharmacopoeia.34th ed［S］.Maryland：The Pharmaceutical Association，2011：3658.

［5］ 謝沐風(fēng).溶出曲線相似性的評價方法［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（4）：308－311.

Xie MuFeng.Evaluation methods of comparability of dissolution curve［J］.Chin J Pharmaceuticals，2009，40（4）：308－311.In Chinese with English abstract.