紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠體內(nèi)體外血栓形成的影響

蘇慧，劉萍，溫薇，蘇云明

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

中藥紅花為菊科植物紅花干燥管狀花，性溫，味辛，具有活血化瘀的功效。紅花黃色素為紅花的主要活性成分，研究證實(shí)［1－5］，紅花黃色素能明顯減輕心肌缺血及缺血再灌注損傷，抑制血小板聚集并改善血流動(dòng)力學(xué)［6］。本實(shí)驗(yàn)通過大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成及體外血栓形成實(shí)驗(yàn)，觀察紅花黃色素凍干粉針對(duì)體內(nèi)、體外血栓形成的影響，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1．1 實(shí)驗(yàn)藥物 注射用紅花黃色素凍干粉針由烏魯木齊郎潤(rùn)醫(yī)藥開發(fā)有限公司提供;規(guī)格:80mg/支;用法:每天1支，用時(shí)以0．9%生理鹽水15～20ml溶解。

1．2 陽性對(duì)照藥 復(fù)方丹參注射液由上海第九制藥廠提供;規(guī)格:2m l/支;用法:靜脈注射4m l/次，溶于20m l 50%葡萄糖溶液中，1日1～2次。

1．3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠，體質(zhì)量250～300g，雌雄各半，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全性評(píng)價(jià)中心提供;動(dòng)物合格證號(hào):09－3－3。

1．4 實(shí)驗(yàn)儀器 LBY－S5型血栓形成儀(北京宇華國(guó)際技術(shù)公司);DG－1型電熱干燥箱(重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備

作者簡(jiǎn)介:蘇慧(1979－)，女，講師，主要研究方向:中藥現(xiàn)代藥理學(xué)研究。

收稿日期:2012－07－15

修回日期:2012－08－14

廠);DT100分析天平(北京光學(xué)儀器廠);CS213電熱培養(yǎng)箱(重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2．1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成的影響

取50只Wistar大鼠，稱質(zhì)量后隨機(jī)分5組，每組10只，以0．3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉，仰位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上，實(shí)施手術(shù)。彎剪剪去頸部位毛，正中切開頸部皮膚，鈍剝離分離右頸總動(dòng)脈及左頸外靜脈，將事先充滿肝素生理鹽水(50u/ml)的聚乙烯管(分三段連結(jié)，在中段放入長(zhǎng)6cm的4號(hào)手術(shù)線)的一端插入左頸外靜脈后，從聚乙烯管注入肝素50u/kg，夾住管壁，將右頸總動(dòng)脈近心端以止血夾阻斷血流，眼科剪剪一“△”口，將聚乙烯管另一端插入右頸總動(dòng)脈，結(jié)扎，立即舌下靜脈注射紅花黃色素凍干粉針溶液，低劑量組7.2mg/kg;中劑量組14.4mg/kg;高劑量組28.8mg/kg;陽對(duì)藥復(fù)方丹參注射液1.8ml/kg;陰性對(duì)照組給予等體積生理鹽水，10min后打開止血夾開放血流，血液從右頸總動(dòng)脈經(jīng)聚乙烯管返回左頸外靜脈，開放血流15min后，中斷血流，迅速取下聚乙烯管，取出手術(shù)線并稱重，以總重量減去線重計(jì)算血栓濕重。2．2 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠體外血栓形成的影響

取50只Wistar大鼠，隨機(jī)分為5組，每組10只，0．3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉大鼠，仰位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上，手術(shù)剝離頸總動(dòng)脈及股靜脈。舌靜脈給藥，劑量同上，10min后頸總動(dòng)脈插管取血1．8ml，注入標(biāo)好刻度線的血栓硅膠管中，套緊血栓管裝入體外血栓形成儀，啟動(dòng)轉(zhuǎn)盤，計(jì)時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)15min后，停機(jī)，取下血栓管，將管內(nèi)血液及已形成的血栓迅速倒在預(yù)先鋪好濾紙的平皿中，用眼科鑷子輕輕由一端提出血栓，使血栓下垂，移放干燥濾紙上，用分規(guī)刻度尺測(cè)血栓長(zhǎng)度，后提起血栓重新放在稱量好的濾紙上，稱其濕重后，置恒溫烤箱60℃烘烤30min，稱干重。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3．1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成的影響

復(fù)方丹參組及紅花黃色素凍粉針各劑量組與生理鹽水組組間比較用t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，復(fù)方丹參組與紅花黃色素凍干粉針各劑量組均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01或P＜0．005)，說明紅花黃色素凍干粉針及復(fù)方丹參均具有明顯的抑制大鼠體內(nèi)血栓形成的作用，且紅花黃色素凍干粉針中劑量組作用優(yōu)于高、低劑量組及復(fù)方丹參組。結(jié)果見表1。

表1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠血栓形成的影響(±s，n=10)

表1 紅花黃色素凍干粉針對(duì)大鼠血栓形成的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005。

組別 劑量(mg/kg) 血栓濕重(mg)生理鹽水組 等體積62．89 ±20．41復(fù)方丹參組 1．8(ml) 33．59 ±13．30＊＊＊紅花黃色素凍干粉針低劑量組 7．2 35．85 ±16．52＊＊紅花黃色素凍干粉針中劑量組 14．4 30．30 ±13．18＊＊＊紅花黃色素凍干粉針高劑量組 28．8 35．94 ±14．78＊＊

3．2 紅花黃色素凍粉針對(duì)大鼠體外血栓形成的影響

紅花黃色素凍干粉針各劑量組及復(fù)方丹參注射液組與生理鹽水組組間比較用t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，紅花黃色素凍干粉針各組及復(fù)方丹參組血栓長(zhǎng)度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0．05或P＜0．005);紅花黃色素凍干粉針各組及復(fù)方丹參組血栓濕重均有顯著性差異(P＜0．05或P＜0．01或P＜0．005);紅花黃色素凍干粉針各組能減少血栓干重形成，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而復(fù)方丹參組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0．01);結(jié)果顯示，紅花黃色素凍干粉針及復(fù)方丹參注射液均有抑制血栓形成的作用，其中紅花黃色素凍干粉針中劑量組優(yōu)于低、高劑量組，與復(fù)方丹參組作用相當(dāng)。結(jié)果見表2。

表2 紅花黃色素對(duì)大鼠體外血栓形成的影響(±s，n=10)

表2 紅花黃色素對(duì)大鼠體外血栓形成的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，*P ＜0．05，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005

組別 劑量(mg/kg) 血栓長(zhǎng)度(mm) 血栓濕重(mg) 血栓干重(mg)生理鹽水組 等體積103．0 ±51．9 578．7 ±363．0 64．33 ±36．0復(fù)方丹參組 1．8(ml) 24．0±30．4＊＊＊ 105．2±103．5＊＊＊ 21．12±14．5＊＊凍干粉針低劑量組 7．2 53．0 ±26．9* 267．6 ±155．1* 49．72 ±31．7凍干粉針中劑量組 14．4 29．7±25．3＊＊＊ 152．9±127．2＊＊ 35．83±31．9凍干粉針高劑量組 28．8 47．6 ±52．7* 215．7 ±220．7*41．23 ±41．1

通過大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成和體外血栓形成實(shí)驗(yàn)，觀察紅花黃色素凍干粉針的抗血栓作用，證實(shí)紅花黃色素凍干粉針具有明顯的抑制大鼠體內(nèi)與體外血栓形成作用，其中在體內(nèi)血栓形成試驗(yàn)中，紅花黃色素凍干粉針組藥效優(yōu)于復(fù)方丹參組。在體外血栓形成試驗(yàn)中，紅花黃色素凍干粉針對(duì)血栓濕重、干重影響與復(fù)方丹參組作用相當(dāng)。說明紅花黃色素凍干粉針具有較好的活血化瘀作用，具有較好的臨床應(yīng)用前景。

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［2］林楚生，方懿珊，林昱，等．紅花黃色素對(duì)腦梗死患者凝血機(jī)制的影響［J］．基層醫(yī)學(xué)論壇，2010，14(16):502 －503．

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［5］楊志福，文愛東，賈敏，等．紅花黃色素對(duì)急性血瘀大鼠微循環(huán)及血液流變學(xué)部分指標(biāo)的影響［J］．中藥材，2001，24(4):283 －284．

［6］萬先惠，秦亞利，顏濤．紅花注射液藥理作用研究進(jìn)展［J］．中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，39(6):109 －110．