毛細(xì)管電泳技術(shù)在藥學(xué)研究的應(yīng)用概述

于虹敏，林文津，徐榕青，張亞敏

1.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福建 福州 350001;2.福建省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，福建 福州 350001

毛細(xì)管電泳技術(shù) (CE)是在80年代后期出現(xiàn)并逐漸應(yīng)用到藥學(xué)等領(lǐng)域的，其最高柱效可達(dá)105理論板數(shù)，最高靈敏度可達(dá)10－19 mol，擁有區(qū)帶電泳，凝膠電泳等多種形式［1］。CE正在逐漸成為藥物鑒定的參考或標(biāo)準(zhǔn)方法，2010版藥典化藥品種中就采用了分離效能較高的毛細(xì)管電泳法，其中抑肽酶增加的去丙氨酸－去甘氨酸－抑肽酶和去丙氨酸－抑肽酶檢查就是采用毛細(xì)管電泳法。本文對(duì)毛細(xì)管電泳技術(shù)在藥學(xué)領(lǐng)域定性定量研究中的應(yīng)用作一概述。

1 定量分析

藥物主成分測(cè)定、雜質(zhì)分析、產(chǎn)品合格檢驗(yàn)、生產(chǎn)過(guò)程控制、真?zhèn)萎a(chǎn)品鑒別、藥物品質(zhì)測(cè)試等工作都離不開(kāi)定量工作，因此定量分析是制藥行業(yè)必不可少的內(nèi)容。李喜鳳等［2］應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定蒲公英中主要有效成分咖啡酸、綠原酸和阿魏酸的含量。吳敏［3］等應(yīng)用毛細(xì)管電泳法同時(shí)測(cè)定中成藥及保健品中人參皂苷 Rg1、Re、紅景天苷、淫羊藿苷、腺苷5種苷類(lèi)成分的含量。

2 定性分析

CE本身和色譜一樣，并不具備結(jié)構(gòu)鑒別能力，所以不能直接用于藥物的定性分析。但利用其分離特性并結(jié)合其他技術(shù)，CE也可以用于定性分析。

2.1 復(fù)雜樣品的指紋圖譜

徐都冷等［4］應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳技術(shù)建立蒙藥材森登的指紋圖譜，并對(duì)7種不同產(chǎn)地的森登進(jìn)行了分析，初步建立了以6個(gè)共有峰為特征指紋信息的 HPCE指紋圖譜。李偉東等［5］以10個(gè)批次的通塞脈微丸為樣品建立了通塞脈微丸的毛細(xì)管電泳指紋圖譜，確認(rèn)共有指紋峰16個(gè)，并確定了甘草苷、甘草素、甘草酸單銨鹽、肉桂酸、綠原酸、阿魏酸的峰。蘇恒等［6］采用高效毛細(xì)管電泳法，研究了江浙蝮蛇蛇毒蛋白指紋圖譜，為建立更全面的色譜指紋圖譜，滿(mǎn)足蛇毒的全面質(zhì)量管理的需要提供了依據(jù)。

2.2 手性分離分析

李英杰等［7］提出了高效毛細(xì)管電泳拆分手性藥物中間體1－甲基－3－苯基丙胺的方法，分離快捷，為進(jìn)一步開(kāi)展1－甲基－3－苯基丙胺對(duì)映體的研究提供了依據(jù)。黃碧云等［8］建立一種快速有效拆分苯磺酸氨氯地平對(duì)映體的分析方法。該法可快速有效地分離苯磺酸氨氯地平對(duì)映體，可用于其手性拆分及光學(xué)純度測(cè)定。

2.3 藥物篩選

凌笑梅等［9］采用毛細(xì)管電泳法研究了凝血酶和水蛭素及肝素問(wèn)的相互作用，并測(cè)定了凝血酶和水蛭素的結(jié)合常數(shù)。林炳承［10，12］課題組以肝素為模型藥物，采用間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)技術(shù)在玻璃芯片上研究了肝素與牛血清白蛋白之間的相互作用。該作者［12］還采用毛細(xì)管電泳方法研究15種不同鏈長(zhǎng)和不同硫酸基含量的硫酸寡聚糖 (DexS)和G－CSF的相互作用。采用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察被篩選出的寡聚糖與G－CSF結(jié)合后對(duì)小鼠白血病細(xì)胞增生、細(xì)胞周期、細(xì)胞表面抗原的表達(dá)和細(xì)胞形態(tài)的影響，以證明毛細(xì)管電泳所篩選出的DexS具有促進(jìn)細(xì)胞分化等生物學(xué)活性。

3 展望

綜上所述，CE可以對(duì)藥物及其產(chǎn)品進(jìn)行含量測(cè)定、指紋分析、組分定性、純度鑒定等;利用CE的峰參數(shù)不僅可以對(duì)中藥的來(lái)源、真?zhèn)?、品質(zhì)進(jìn)行鑒定或判別，還可以對(duì)制藥的過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控或動(dòng)態(tài)分析。此外，CE還可以分析小分子和大分子藥物，已成為基因工程藥物的一種有效的分析和鑒定手段。CE還能夠用以研究藥物的代謝過(guò)程，測(cè)定代謝產(chǎn)物、分析各種體液中的藥物成分及其分布、研究藥物分子的相互作用、探討藥物的毒理等。相信隨著CE技術(shù)不斷成熟，必將會(huì)得到更加廣泛的應(yīng)用。

［1］林炳承．生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展，1992，19(4):269－258．

［2］李喜鳳，郝哲，邱天寶，等．HPCE同時(shí)測(cè)定蒲公英3種有機(jī)酸的含量［J］．中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥，2011，28(4):350－353．

［3］吳敏，盧佳，孫成均，等．HPCE法同時(shí)測(cè)定保健品及中成藥中的5種苷類(lèi)成分［J］．華西藥學(xué)雜志，2011，26(2):165～167．

［4］徐都冷，紅顏，巴根那，等．蒙藥森登HPCE法的指紋圖譜研究［J］．中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2011，1(1):31－33．

［5］李偉東，張志杰，蔡寶昌，等．通塞脈微丸高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜的研究［J］．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16(17):53－56．

［6］蘇恒，魏曉東，趙丈杰，等．蝮蛇蛇毒蛋白指紋圖譜研究及應(yīng)用［J］．中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40(4):288－291．

［7］李英杰，孫鵬，秦世麗，等．高效毛細(xì)管電泳法分離1－甲基－3－苯基丙胺對(duì)映體［J］．理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2010，(46):170－171．

［8］黃碧云，趙鑫，袁牧，等．苯磺酸氨氯地平對(duì)映體的高效毛細(xì)管電泳手性分離［J］．藥學(xué)進(jìn)展2009，33，(9):222－226．

［9］凌笑梅，劉一，賴(lài)先銀，等．采用毛細(xì)管電泳方法以凝血酶為靶點(diǎn)篩選天然藥物提取化合物［J］．高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào)，2007，2(28):234－237．

［10］林炳承，等．毛細(xì)管電泳篩選與集落細(xì)胞刺激因子有相互作用的寡聚糖及其生物活性［J］．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，11(8):1276－1281．

［11］ LIU XJ，LI ANG AY．LIN BC，et a1．Studying drug－plasma protein interactions by two－ injector microchip electrophoresis frontal analysis［J］．Electrophoresis，2006，27(24):5128 －5131．

［12］ LIU XJ，LIU X，LIN BC，et a1．Studying protein－drug interaction by microfluidic chip affinity capillary electrophoresis with indirect laser－induced fluorescence detection［J］．Electrophoresis，2006，27(15):3125 －3128．