疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中的“5+1”

廖國(guó)東

（茂名市疾病預(yù)防控制中心，廣東 茂名 525000）

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室是疾病預(yù)防控制工作中一個(gè)十分重要的技術(shù)支持部門(mén)，主要承擔(dān)著各種突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急檢驗(yàn)、傳染病監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)、食品及環(huán)境衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)、醫(yī)療及托幼機(jī)構(gòu)消毒效果監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)、生活飲用水監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)等任務(wù)[1]，所出具的檢驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、疾病預(yù)防控制工作的重要基礎(chǔ)和參考。如此重大的意義決定了疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須時(shí)刻注重實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證。本文就是通過(guò)對(duì)影響疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié)進(jìn)行總結(jié)和分析，為各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作提供參考。

1 材料與方法

依據(jù)ISO/IECl7025：2005《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》[2]、《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國(guó)認(rèn)實(shí)函[2006]141號(hào)）[3]、《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國(guó)認(rèn)實(shí)[2010]49號(hào)）[4]的相關(guān)要求，結(jié)合本中心微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作進(jìn)行回顧性總結(jié)和分析。

2 結(jié) 果

2.1 實(shí)驗(yàn)人員條件

2.1.1 客觀方面

微生物實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員過(guò)硬的檢驗(yàn)水平是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的重要條件。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要，從專(zhuān)業(yè)、學(xué)歷和職稱(chēng)等方面合理配置足夠的檢驗(yàn)人員，滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)的要求；檢驗(yàn)人員上崗前應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)化的檢驗(yàn)技術(shù)和操作技能培訓(xùn)，并經(jīng)考核合格后持證上崗。

2.1.2 主觀方面

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)人員應(yīng)有高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)的工作態(tài)度，認(rèn)真對(duì)待每一次實(shí)驗(yàn)和每一份標(biāo)本，最大限度地避免實(shí)驗(yàn)誤差，確保檢測(cè)結(jié)果客觀公證、準(zhǔn)確可靠。

2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備配置

2.2.1 合理配置所需的儀器設(shè)備

先進(jìn)優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備是微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)工作的基本硬件要求。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本轄區(qū)的實(shí)際情況和檢測(cè)工作的需要正確配置所需的儀器設(shè)備，包括恒溫培養(yǎng)箱、冰箱與低溫冰箱、高壓蒸汽滅菌器、生物安全柜、實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增儀等，以滿(mǎn)足當(dāng)前疾病預(yù)防控制工作的需要，特別是要滿(mǎn)足食物中毒、傳染病疫情等突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢驗(yàn)的需要。

2.2.2 加強(qiáng)儀器設(shè)備的管理

為確保上述儀器設(shè)備能正常運(yùn)行和高效地為實(shí)驗(yàn)工作服務(wù)，應(yīng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的管理工作，對(duì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的設(shè)備要進(jìn)行有效的控制，包括建立儀器設(shè)備檔案、確定儀器設(shè)備保管人、制作儀器設(shè)備操作規(guī)程（SOP文件）、加貼儀器設(shè)備狀態(tài)標(biāo)識(shí)、規(guī)范儀器設(shè)備使用和維修的登記、對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行檢定/校準(zhǔn)和定期維護(hù)等。

2.3 實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用

2.3.1 盡量應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法

應(yīng)優(yōu)先選用現(xiàn)行有效的國(guó)家、行業(yè)、地方、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的檢驗(yàn)方法，并對(duì)這類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行學(xué)習(xí)和受控，編制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件），在實(shí)際工作中嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法及其標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件）開(kāi)展實(shí)驗(yàn)工作。

2.3.2 非標(biāo)方法應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證和審批

有部分實(shí)驗(yàn)工作確實(shí)沒(méi)有現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法時(shí)，可從知名的技術(shù)組織或有關(guān)科技文獻(xiàn)、權(quán)威期刊公布的方法中選擇合適的方法，或者自行研制實(shí)驗(yàn)方法。但這類(lèi)方法在開(kāi)始正式使用之前應(yīng)按相關(guān)程序?qū)υ摲椒ㄟM(jìn)行準(zhǔn)確性和精密度的驗(yàn)證和鑒定。

2.4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境建設(shè)

2.4.1 建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室

隨著我國(guó)各種重大傳染病監(jiān)測(cè)力度的不斷加強(qiáng)，如艾滋病監(jiān)測(cè)、流感監(jiān)測(cè)、手足口病監(jiān)測(cè)等，我國(guó)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)面臨越來(lái)越多的高生物危險(xiǎn)性標(biāo)本，這就要求疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室的總體布局和各部位的安排要充分考慮減少潛在的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部設(shè)置明顯的分區(qū)（污染區(qū)、半污染區(qū)、清潔區(qū)）標(biāo)識(shí)，采取有效的隔離措施防止交叉污染，確保標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)人員和外環(huán)境的安全。

2.4.2 規(guī)范實(shí)驗(yàn)室的管理

根據(jù)工作流程和實(shí)驗(yàn)要求對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范化管理，室內(nèi)溫度控制在18～26℃，相對(duì)濕度控制在45%～65%；利用沉降法定期監(jiān)測(cè)無(wú)菌室或潔凈實(shí)驗(yàn)室的空氣潔凈度及紫外線(xiàn)強(qiáng)度，并要進(jìn)行消毒效果監(jiān)測(cè)，以保證符合樣品檢測(cè)所需的環(huán)境要求。

2.5 實(shí)驗(yàn)材料選擇

2.5.1 選用合格的供應(yīng)商

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室需要用到的實(shí)驗(yàn)材料種類(lèi)非常多，包括各種培養(yǎng)基、診斷血清、染色液、生化及免疫試劑、試管、一次性吸嘴等。這些實(shí)驗(yàn)材料的生產(chǎn)廠家多、材料質(zhì)量好差摻雜，稍有不慎就會(huì)造成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商的選擇原則是國(guó)內(nèi)外知名品牌和市場(chǎng)信譽(yù)度高的產(chǎn)品、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)，并且要求供應(yīng)商應(yīng)出具三證資質(zhì)證明（許可證、注冊(cè)證、經(jīng)銷(xiāo)證）。

2.5.2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的驗(yàn)收

驗(yàn)收人員在驗(yàn)收實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，應(yīng)仔細(xì)核對(duì)實(shí)驗(yàn)材料名稱(chēng)、規(guī)格、批號(hào)、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期及密封狀況等。對(duì)于一些特殊的實(shí)驗(yàn)材料還應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)收試驗(yàn)，如革蘭氏染色液應(yīng)分別用革蘭氏陽(yáng)性和陰性標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行染色試驗(yàn)；各種生化試劑和培養(yǎng)基應(yīng)選用已知特性的標(biāo)準(zhǔn)菌株分別進(jìn)行性能試驗(yàn)等，符合要求者才可使用。

2.6 實(shí)驗(yàn)過(guò)程質(zhì)量控制

2.6.1 樣品的采集和流轉(zhuǎn)

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前應(yīng)按實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的要求正確采集樣品，并規(guī)范保存和運(yùn)送，否則會(huì)對(duì)結(jié)果造成很大的影響，如進(jìn)行艾滋病CD4檢測(cè)的血液樣品在采集時(shí)應(yīng)使用抗凝劑且不能在冰箱保存、培養(yǎng)腦膜炎雙球菌的樣品應(yīng)在室溫下運(yùn)送和保存等等，只有熟悉各類(lèi)樣品的采集方法和保存方式，才能確保下一步的實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行下去。

2.6.2 實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)原始記錄

要嚴(yán)格按照微生物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不得隨意改動(dòng)操作程序；嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，并要做好生物安全防護(hù)；通過(guò)對(duì)照（包括空白、陰性和陽(yáng)性對(duì)照）對(duì)PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)詳細(xì)書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)原始記錄，記錄的信息包括檢驗(yàn)步驟、檢驗(yàn)結(jié)果、檢驗(yàn)人、所用儀器設(shè)備、試劑、環(huán)境溫濕度等，以保證在必要時(shí)可以再現(xiàn)檢測(cè)過(guò)程。

2.6.3 數(shù)據(jù)處理及報(bào)告核發(fā)

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出來(lái)后應(yīng)按規(guī)范進(jìn)行科學(xué)的處理，包括引用正確的計(jì)量單位、有效數(shù)字的正確修約及平均值的計(jì)算等；實(shí)驗(yàn)報(bào)告在發(fā)出之前要經(jīng)過(guò)復(fù)核，校核無(wú)誤后，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)編制、出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

2.6.4 實(shí)驗(yàn)資料歸檔

全部實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)將采樣記錄、實(shí)驗(yàn)原始記錄、留底報(bào)告等有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料整理歸檔，按相關(guān)規(guī)定條件和期限保管。

3 討 論

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是一項(xiàng)十分艱巨的工作，特別是對(duì)于疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室而言，由于其主要從事的是產(chǎn)品、公共場(chǎng)所等樣品的衛(wèi)生指標(biāo)菌檢驗(yàn)以及傳染病監(jiān)測(cè)和突發(fā)公共衛(wèi)生事件中相關(guān)病原微生物的檢驗(yàn)工作，所出具的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、突發(fā)公共衛(wèi)生事件有效應(yīng)對(duì)的重要技術(shù)支持和依據(jù)，具有一定的法律效力，因而疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證，這樣才能確保有關(guān)衛(wèi)生行政執(zhí)法能夠順利實(shí)施和確保突發(fā)公共衛(wèi)生事件的有效應(yīng)對(duì)。實(shí)際上，在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的工作中，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的因素是很多的，本文所討論的“人、機(jī)、法、環(huán)、料+過(guò)程控制”這六方面是任何一個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室都必須認(rèn)真抓好的質(zhì)量控制工作中的最基本的也是最關(guān)鍵的要素，只要這六方面做好了，整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作也就上檔次了。

[1]劉曉明,潘明亮.在經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)建設(shè)衛(wèi)生檢驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室的設(shè)想[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2005,11(9):124-125.

[2]《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》(ISO/IECl7025:2005)[S].2005.

[3]《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》(國(guó)認(rèn)實(shí)函[2006]141號(hào))[S].2006.

[4]《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》(國(guó)認(rèn)實(shí)[2010]49號(hào))[S].2010.