辛伐他汀對大鼠隨意皮瓣成活的影響及其可能的作用機制

曹寶鑫 宋敏

隨意皮瓣的部位和縱軸線的走向都不會受到軸心血管的限制，所以在修復(fù)與重建組織缺損的時候被廣泛使用。因為隨意皮瓣不具備知名血管，所以在其遠端特別容易出現(xiàn)缺血壞死，在臨床上受到了很多限制。在制作皮瓣的時候，缺血再灌注損傷特別的容易導(dǎo)致皮瓣壞死。所以，對皮瓣的微循環(huán)系統(tǒng)進行改善、并且皮瓣血運量增加才能使皮瓣的成活率得到提高。最近，很多的學(xué)者實驗發(fā)現(xiàn)他汀類的藥物對于愈合和缺血都有重要的作用。本文將辛伐他汀注入大鼠的腹腔內(nèi)，對其背部隨意皮瓣進行觀察，確定其對成活能力的影響，探討藥物的作用機制。將研究報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取健康清潔級雄性SD大鼠112只，年齡6周，體重(210±20)g，隨機進行劃分兩組，研究組和對照組，各有56只。

1.2 隨意皮瓣制作 手術(shù)之前1 d要使用8%硫化鈉把大鼠背部進行脫毛，手術(shù)之前6 h開始禁水禁食，使用350 mg/kg，10%水合氯醛注射腹腔來麻醉，得到滿意效果后，在大鼠的背部制作隨意皮瓣，結(jié)扎出血點，保證沒有繼續(xù)出血，皮瓣縫合，并且將切口周圍用藥膏涂抹，保證同一人操作手術(shù)而且必須是無菌環(huán)境。在手術(shù)之后的三四分鐘和1～7 d內(nèi)的同一個時間，研究組的大鼠進行5 mg/kg辛伐他汀的腹腔注射，1次/d;而對照組在同樣的條件下注射等容積的生理鹽水。單籠喂養(yǎng)大鼠，術(shù)后7 d將大鼠處死，并取材觀察。

1.3 檢測指標(biāo) 手術(shù)之后看大鼠是不是依然存活，觀察皮瓣顏色質(zhì)地和壞死的情況。皮瓣成活率的計算兩組分別抽取大鼠24只，對皮瓣情況進行整個拍攝，分析測定隨意皮瓣的成活面積和總的面積，計算皮瓣成活率。隨機分別抽取大鼠16只，沿著皮瓣的中軸線近、中、遠進行皮瓣組織切取，所需要的大小是1.0 cm×1.0 cm，固定時使用10%甲醛，石蠟進行包埋，厚切片4 μm，HE染色，使用光鏡對病理學(xué)進行結(jié)果觀察。檢測使用免疫組織化學(xué)法，制作切片，使用兔抗大鼠抗體、顯色劑等試劑進行染色，和周圍的結(jié)締組織分離，光鏡拍照觀察，計算兩組隨意皮瓣的近、中、遠血管均值和標(biāo)準(zhǔn)差。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，比較結(jié)果用t進行檢驗，P＜0.05可以認為具有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

所以大鼠都在實驗完成的時候存活。手術(shù)之后1 h，兩個小組都沒有出現(xiàn)很明顯的差異，肉膜的下面沒有積液，顏色紅色光澤。手術(shù)之后24 h，對照組的肉膜下面出現(xiàn)小塊的淤血，水腫狀，顏色變至灰暗;研究組的肉膜下面沒有出現(xiàn)淤血塊，水腫的程度也很輕，血管擴張，顏色依舊鮮艷。手術(shù)在后48 h，對照組皮瓣遠端明顯腫脹，近端液出現(xiàn)腫脹;研究組相對較輕。在手術(shù)后的72 h，皮瓣遠端組織腫脹顏色出現(xiàn)黑灰色，研究組出現(xiàn)的程度要小很多。手術(shù)之后第7天，兩組的皮瓣中、遠位置都有了一些壞死區(qū)域，壞死部位出現(xiàn)焦痂樣、皺縮、變硬、針刺沒有出血，皮瓣的成活的那些在質(zhì)地和顏色上面觀察和周圍皮膚差別不大;研究組皮瓣的壞死面積要小很多，而且皺縮也輕。手術(shù)之后第7天，研究組皮瓣成活率達到67.3%;對照組成活率則是48.8%，具備明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。觀察HE染色發(fā)現(xiàn)皮瓣的壞死組織形態(tài)較為一致，大部分是肌變性的壞死情況，和缺血性的壞死情況較為一致。研究組的血管數(shù)目在成活區(qū)中比較對照組要多。在手術(shù)第7天，研究組的經(jīng)微血管數(shù)要明顯地比對照組多，而且差異基本統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

通過本文研究發(fā)現(xiàn)，辛伐他汀可以使得隨意皮瓣增加成活面積，毛細血管也增加了生長的密度并且可以誘發(fā)生成新的血管，使得缺血皮瓣有了較高的成活率，并能保證其生存的質(zhì)量;在腹腔中將辛伐他汀注入有效地促進了隨意皮瓣的成活［1，2］。而且皮瓣較高比較低，而且安全性高，可以稱得上是物美價廉，能夠較為合適的在臨床治療中得到應(yīng)用。而且從形態(tài)學(xué)的方面來看，也較為形象的反應(yīng)了生成血管時候其量能的變化［3］。而對于辛伐他汀在皮瓣生長中，其機制和各種變化是否有緊密聯(lián)系還需要進一步的研究。

［1］劉鴻雁，彭海濤，劉旺華.辛伐他汀對大鼠隨意皮瓣成活影響的實驗研究.西部醫(yī)學(xué)，2012，24(2):116-117.

［2］向小燕，岑瑛，張艷閣.烏司他丁對大鼠隨意皮瓣存活影響的實驗研究.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2006，1:62-63.

［3］蔡羽中，何愛詠，王欣文，等.辛伐他汀與BMP-2促進兔橈骨骨折愈合的對比觀察研究.生物醫(yī)學(xué)工程與臨床，2011，1:23-24.