科技進(jìn)展

豬戊型肝炎病毒的快速檢測(cè)方法

豬是戊型肝炎病毒 (HEV)的儲(chǔ)存器，最近研究表明該病毒從豬到人跨物種傳染。HEV大多通過(guò)未煮熟的肉或者內(nèi)臟傳播，本研究建立了一步RT-LAMP快速檢測(cè)豬戊型肝炎病毒。設(shè)計(jì)ORF3基因特異性的引物，RT-LAMP的檢測(cè)敏感性為101拷貝/μL RNA模板，比RT-nPCR檢測(cè)方法敏感10倍。通過(guò)豬的其它病毒檢測(cè)該試驗(yàn)的特異性 （豬的其它病毒用RT-LAMP方法沒(méi)有檢測(cè)出來(lái)）。此外，總共41個(gè)膽汁樣品用RT-LAMP和RT-nPCR方法檢測(cè)。RT-nPCR檢測(cè)出18個(gè)陽(yáng)性樣品，RT-LAMP檢測(cè)出36個(gè)陽(yáng)性樣品，顯示RTLAMP試驗(yàn)的敏感性比傳統(tǒng)的RT-nPCR要高。RT-LAMP可以用于臨床診斷豬戊型肝炎病毒。 （王蕾 編譯，譯自 《病毒學(xué)文獻(xiàn)》）

譯自：Zhang LQ,Zhao FR,Liu ZG,et al.Simple and rapid detection of swine hepatitis E virus by reverse transcription loopmediated isothermal amplification.Arch Virol， 2012 Aug 2.[Epub ahead of print]

年齡對(duì)PRV疫苗免疫豬的Th1反應(yīng)的影響

小鼠模型研究已經(jīng)證實(shí)，隨著年齡的增加，機(jī)體的免疫功能逐漸下降，但是對(duì)于豬的這方面研究數(shù)據(jù)欠缺。豬的許多生理學(xué)和病理生理學(xué)數(shù)據(jù)可以用于研究人，研究豬對(duì)于核實(shí)小鼠數(shù)據(jù)非常重要，因此，挑選老年豬作為動(dòng)物模型進(jìn)行這方面的研究。

在這個(gè)研究中，我們證實(shí)了隨著年齡的增加，免疫PRV疫苗的豬Th1免疫反應(yīng)下降，減少PRV特異性T細(xì)胞增殖、IgG2/IgG1及Th1細(xì)胞因子的產(chǎn)生。更重要的是，Th1反應(yīng)受損與CD4（+）T細(xì)胞的減少和CD4(+)CD8（+）T細(xì)胞的增加有關(guān)。綜合分析這些數(shù)據(jù)，證實(shí)了老年豬免疫PRV疫苗后，Th1免疫反應(yīng)的下降 ，這個(gè)結(jié)果可以幫助解釋隨著被免疫動(dòng)物年齡的增加，疫苗免疫效率下降，動(dòng)物感染后發(fā)病率和死亡率增加。 （王蕾 編譯，譯自 《分子免疫學(xué)》雜志）

譯自：Ma M,Wang L,Yang J,et al.Age-related impaired Th1 responses to PRV vaccine in vivo in aged pigs.Mol Immunol.2012 Jun 27;52(3-4):217-223.[Epub ahead of print]

從中國(guó)分離的G9P[23]豬輪狀病毒的分子特性

G9輪狀病毒是公認(rèn)的在全世界傳播的基因型。G9型A組輪狀病毒——G9P[23]株是非常罕見(jiàn)的，本研究對(duì)其進(jìn)行了序列分析，將其命名為輪狀病毒A pig/China/NMTL/2008/G9P[23]，簡(jiǎn)寫為NMTL，它是從中國(guó)的腹瀉仔豬中分離出來(lái)的。核苷酸序列分析顯示VP7基因匯聚在G9譜系VId，VP4基因匯聚在罕見(jiàn)的P[23]基因型。NMTL是首次在中國(guó)報(bào)道的豬G9型毒株。因此，為了解NMTL株進(jìn)化多樣性，所有的基因片段用于系統(tǒng)發(fā)生分析。新的輪狀病毒分類系統(tǒng)將NMTL序列分為G9-P[23]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1基因型，與人的Wa樣和豬的Wa樣毒株具有密切的關(guān)系。

這個(gè)結(jié)果顯示 (1)NMTL的NSP2和NSP4基因顯示與人的A組輪狀病毒具有高度的遺傳相關(guān)， (2)VP2和VP4基因聚類豬和類豬人病毒， (3)VP1基因脫離Wa樣人和豬聚類。這個(gè)報(bào)告提供了額外證據(jù)支持了人類和豬的基因組有親緣關(guān)系。 （王蕾 編譯，譯自 《病毒學(xué)文獻(xiàn)》）

譯自：Shi H,Chen J,Li H,et al.Molecular characterization of a rare G9P[23]porcine rotavirus isolate from China.Arch Virol，2012 Jun 23.[Epub ahead of print]

I型的PRRSV的Nsp7表達(dá)和血清學(xué)反應(yīng)性

本研究的目的是表達(dá)歐洲基因型PRRSV的一個(gè)重組的非結(jié)構(gòu)蛋白——Nsp7，評(píng)估它在血清學(xué)診斷中的敏感性和特異性。

一個(gè)編碼Nsp7蛋白的基因在大腸桿菌中表達(dá)，用固定化金屬離子親和層析 （IMAC）進(jìn)行純化，純化蛋白的血清學(xué)反應(yīng)性用間接ELISA檢測(cè)評(píng)估。血清樣品來(lái)自PRRS陽(yáng)性豬場(chǎng)的未感染且免疫PRRS滅活苗的豬。Nsp7被證明適合作為PRRS特異抗體的血清學(xué)檢測(cè)抗原，診斷敏感性達(dá)到82.2%，特異性達(dá)到97.6%。與IDEXX ELISA試劑盒比較，非結(jié)構(gòu)蛋白更適合用于區(qū)分感染豬和免疫滅活苗的豬。因?yàn)闇缁蠲缑庖吆?，?duì)于N蛋白的抗體反應(yīng)較低。 （王蕾 編譯，譯自 《獸醫(yī)科學(xué)研究》雜志）

譯自：JankováJ,Celer V.Expression and serological reactivity of Nsp7 protein of PRRS genotype I virus.Res Vet Sci，2012 Jul 11.[Epub ahead of print]

豬耳壞疽綜合征調(diào)查

這個(gè)研究的目的是確定奧地利9個(gè)農(nóng)場(chǎng)中72只5.5～10周齡豬患耳壞疽綜合征 （PENS）的原因。所有仔豬進(jìn)行活體采樣 （耳廓組織）并收集起來(lái)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)、組織學(xué)檢測(cè)及原位雜交檢測(cè)PCV2。同時(shí)采集血清樣品進(jìn)行血清學(xué)分析和病毒的PCR，飼料進(jìn)行霉菌毒素的檢測(cè)。PENS最初的損傷主要是表皮的壞疽。在44個(gè)耳廓組織樣品中分離出鏈球菌，從36個(gè)耳廓組織樣品中分離出葡萄球菌。所有樣品用原位雜交和qPCR沒(méi)有檢測(cè)到PCV2。檢測(cè)出7個(gè)仔豬為豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽(yáng)性，一個(gè)仔豬檢測(cè)到疥螨的抗體，在15個(gè)樣品中沒(méi)有檢測(cè)到病原。研究發(fā)現(xiàn)病毒和寄生蟲(chóng)檢測(cè)陽(yáng)性的樣品，其細(xì)菌檢測(cè)一般也為陽(yáng)性。在飼料中檢測(cè)到了脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、玉米烯酮和麥角堿。本研究揭示了PENS是由多種因素導(dǎo)致的。 （王蕾 編譯，譯自 《獸醫(yī)雜志》）

譯自：Weissenbacher-Lang C,Voglmayr T,Waxenecker F,et al.Porcine ear necrosis syndrome:A preliminary investigation of putative infectious agents in piglets and mycotoxins in feed.Vet J，2012 Jul 9.[Epub ahead of print]

玉米干酒糟及其可溶物、液體濃縮可溶物、蒸餾釜餾出物和糖漿球?qū)ιL(zhǎng)豬氨基酸消化率的影響

DDGS的氨基酸消化率較低，且變異較大，這可能是在生產(chǎn)過(guò)程中因熱處理導(dǎo)致糖分含量減少，使?fàn)I養(yǎng)成分遭到破壞。生產(chǎn)DDGS過(guò)程中的酒糟可溶物與玉米結(jié)合形成的 “糖漿球”，其氨基酸消化率未見(jiàn)文獻(xiàn)中報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯坑绊慏DGS氨基酸消化率的成分是否與 “糖漿球”有直接聯(lián)系。試驗(yàn)原料分為DDGS、完整的 “糖漿球” （ISB）、粉碎后的 “糖漿球” （GSB）、液體濃縮可溶物 （LCS）以及蒸餾釜餾出物 （PDTS），這些原料都是從同一批玉米原料中分離獲得，LCS是通過(guò)將發(fā)酵原料蒸發(fā)而得到的。每種原料都作為一個(gè)唯一提供氨基酸來(lái)源的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)采用6×6雙拉丁方設(shè)計(jì)，每期為7天，前5天為適應(yīng)期，第6、7天為食糜收集期，通過(guò)回腸瘺管每天收集8小時(shí)的食糜；6個(gè)處理包括5種試驗(yàn)日糧，1個(gè)無(wú)氮日糧。兩個(gè) “糖漿球”日糧組的氨基酸表觀回腸消化率 （AID）和標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率 （SID）略高于 （P＜0.05）DDGS組，部分氨基酸差異不顯著。LCS處理組和DDGS處理組的AID賴氨酸、SID賴氨酸，以及一小部分氨基酸差異不顯著 （如：LCS SID賴氨酸為63.1%，DDGSSID賴氨酸為61.5%）；但是LCS處理組其他氨基酸的消化率顯著低于DDGS組 （P＜0.05），其中SID蛋氨酸最為明顯 （41.9%vs82.8%）。LCS組中的AID和SID粗蛋白質(zhì)都顯著低于 ISB組和 GSB組 （SID：67.8%vs 85.5%vs 85.9%），其他所有氨基酸也顯著降低 （P＜0.05）。PDTS組中 AID和SID粗蛋白質(zhì)以及大部分氨基酸 （包括賴氨酸）最低。綜上所述， “糖漿球”與氨基酸消化率降低沒(méi)有直接聯(lián)系，LCS的必需氨基酸消化率顯著低于DDGS，這表明DDGS氨基酸消化率降低的原因并非是熱處理。 （彭華 編譯，譯自 《動(dòng)物科學(xué)雜志》）

譯自：Soares JA,Stein HH,Singh V,et al.Amino acid digestibility of corn distillers dried grains with solubles,liquid condensed solubles,pulse dried thin stillage,and syrup balls fed to growing pigs.JAnim Sci,2012,90,1255-1261.

DDGS與復(fù)合酶單獨(dú)或者聯(lián)合添加對(duì)生長(zhǎng)豬組織重量、小腸形態(tài)以及絕食條件下全身氧氣消耗的影響

本試驗(yàn)選用24頭生長(zhǎng)豬 （平均體重19.9±0.5kg），研究了玉米小麥 （1:1）DDGS日糧中添加復(fù)合酶對(duì)內(nèi)臟組織重量、小腸形態(tài)以及絕食條件下全身氧氣消耗的影響 （FWBOC）。分為3個(gè)試驗(yàn)處理，每個(gè)處理8頭豬，試驗(yàn)期為28天，單欄飼養(yǎng)。日糧處理為玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧添加0%、30%DDGS，以及30%DDGS+復(fù)合酶處理組。所有處理日糧均滿足NRC（1998）生長(zhǎng)豬推薦量。每日飼喂量為4%體重。在試驗(yàn)第15天，每個(gè)處理選取4頭豬，采用開(kāi)放式循環(huán)測(cè)熱儀測(cè)定FWBOC（絕食后24～30小時(shí)）。試驗(yàn)第28天，屠宰取樣，測(cè)定內(nèi)臟重量、回腸和盲腸食糜粘度和小腸形態(tài)。不同的日糧處理對(duì)結(jié)束體重，F(xiàn)WBOC和食糜粘度差異不顯著。對(duì)照組的絕食體重顯著高于DDGS組 （P=0.02），但是DDGS+復(fù)合酶組和其他兩個(gè)組差異均不顯著。各處理間每公斤絕食體重下肝臟、脾臟、胰腺、心臟、胃、小腸以及盲腸重量差異不顯著。但是，DDGS處理組的結(jié)腸+直腸重量和全消化道系統(tǒng)的重量顯著高于對(duì)照組，DDGS+復(fù)合酶處理組與對(duì)照組結(jié)腸+直腸重量和PDV差異不顯著。雖然十二指腸、空腸和結(jié)腸的形態(tài)學(xué)差異不顯著，但是DDGS處理組有降低回腸絨毛高度以及絨毛高度隱窩深度的比例的趨勢(shì) （P＜0.10）。綜上所述，添加30%DDGS降低了屠宰率，提高了內(nèi)臟組織重量，但是在DDGS日糧中添加復(fù)合酶時(shí)，這種負(fù)面作用得到了緩解，與對(duì)照組無(wú)顯著差異。 （彭華 編譯，譯自 《動(dòng)物科學(xué)雜志》）

譯自：Agyekum AK,Slominski BA,and Nyachoti CM.Organ weight,intestinalmorphology,and fasting whole-body oxygen consumption in growing pigs fed diets containing distillers dried grains with solubles alone or in combination with amulti-enzyme supplement.JAnim Sci,2012[Published ahead of print].