白芥子中脂溶性成分的氣相色譜-質譜聯(lián)用分析

李日葵，林一星

(1．海南省中醫(yī)院藥學部，?？?570203；2．海南省藥檢所，?？?570216)

白芥子為十字花科植物白芥SinapisalbaL．的干燥成熟種子，白芥子辛、溫，歸肺經，具有溫肺豁痰利氣、散結通絡止痛之功能[1]。中醫(yī)臨床常用于治療哮喘、腫毒、風濕、乳腺增生等疾病。近年來，隨著人們對其研究的深入，白芥子的一些新的藥理作用已被逐漸認識，如抗氧化、抗輻射、抗衰老以及抑制前列腺增生[2]。白芥子的主要成分有白芥子苷(sinalbin)、芥子堿(sinapine)、芥子酸(sinapic acid)等[3]。另外白芥子含油量較高，以芥酸、油酸為主。為了更好地綜合開發(fā)利用白芥子油脂資源，本研究運用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術(GC-MS)對白芥子中脂肪酸及其他脂溶性成分進行分析和鑒定，為進一步合理開發(fā)利用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料 (1)白芥子購于海南國瑞堂藥業(yè),經海南省藥檢所中藥室藥師鑒定為十字花科植物白芥SinapisalbaL．的干燥種子，符合《中國藥典》2010版之規(guī)定品種。(2)石油醚、無水乙醚、苯、氫氧化鉀、Na2SO4、無水甲醇等均為分析純。(3)GC6890N/5975BMS GC-MS儀，為美國Agilent公司產品。

1.2方法

1.2.1白芥子脂肪酸及其脂溶性成分的提取 白芥子粉碎過40目篩，稱取20.00 g，用定量濾紙包裹后置于索氏提取器中，加入石油醚(60～90 ℃)300 mL,80 ℃回流8 h，回收石油醚，得黃色油狀物。提取3個平行樣，其平均值為5.07 g。

1.2.2脂肪酸的甲酯化[4]以上粗脂置燒瓶中，按1 mL/0.1 g加入濃硫酸-甲醇(2∶98)混合液，于70 ℃回流60 min，冷卻后，用15 mL 正己烷分3次萃取并合并，加無水Na2SO4干燥。用0.45 μm微孔濾膜過濾備用。

1.2.3脂肪酸組成及脂溶性成分GC-MS分析測定 (1)GC-MS條件：色譜柱為HP-5彈性石英毛細管柱(30 m×250 μm，0.25 μm)，載氣為99.999%氦氣，流量為1 mL/min，柱前壓為63 kPa，進樣口溫度為250 ℃，接口溫度為280 ℃，柱溫初為80 ℃。先以8 ℃/min升溫至150 ℃，再以5 ℃/min升溫至210 ℃保持3 min，最后以4 ℃/min升溫至280 ℃保持10 min。進樣量為0.2 μL；分流比為40∶1。(2)MS條件：EI離子源，70 eV，離子源溫度為230 ℃，連接器溫度為250 ℃，溶劑延遲3 min，加速電壓為250 eV，掃描質量范圍為50～550 arnu。白芥子中脂肪酸、烷烴及其衍生物成分的分析，對總離子流圖中的各峰進行質譜掃描后得到質譜圖，通過NIST2.0標準質譜圖庫進行檢索，確認各化合物；通過GC-MS工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法計算各化合物相對的質量分數(shù)。

2 結 果

白芥子提取液甲酯化產物運用GC-MS分析，共檢測出25個峰，鑒定了其中23個色譜峰，其中有18個脂肪酸和5個非脂肪酸類成分(表1)。所鑒定的23個化合物的含量占油脂甲酯化物總量的99.91%，其中脂肪酸含量占油脂甲酯化物總量的99.51%。白芥子中不飽和脂肪酸含量占油脂甲酯化物總量的90.13%，總脂肪酸含量的90.21%，為白芥子的主要成分。主要脂肪酸成分為芥酸(45.93%)、油酸(23.66%)、亞油酸(9.72%)和順-11-二十碳烯酸(4.81%)。

表1 白芥子中的脂肪酸及其他脂溶性成分

3 討 論

不飽和脂肪酸多具有抗炎癥、抗腫瘤、調節(jié)血脂、提高免疫力、預防心血管疾病及治療精神分裂病等多種生理功能[5-7]。白芥子中不飽和脂肪酸含量占油脂甲酯化物總量的90.13%，總脂肪酸含量的90.21%，為白芥子的主要成分。主要為芥酸、油酸、亞油酸和順-11-二十碳烯酸的含量較高，具有一定的保健作用[8-10]。與Vorobev[11]報道的黃芥子的脂肪酸成分，以及陳振德等[12]、吳國欣等[13]報道的白芥子脂肪酸成分基本一致。但未檢測到棕櫚酸、十四酸、十五酸以及十九酸。本實驗所測得芥酸的含量遠比文獻報道的高[14]。

另外，在白芥子中還發(fā)現(xiàn)了2-己烷基環(huán)丙烷癸酸和2-己烷基環(huán)丙烷辛酸兩種較為少見的奇數(shù)碳脂肪酸，首次從白芥子中鑒定的成分或成分的甲酯化產物為2-己烷基環(huán)丙烷辛酸甲酯，在相關白芥子的文獻中未見報道。高毓?jié)萚15]在狗肝菜中發(fā)現(xiàn)了2-己烷基環(huán)丙烷辛酸和2-辛烷基環(huán)丙烷辛酸兩種脂肪酸，并認定其對狗肝菜藥材的定性鑒別有一定的指導意義。因此，2-己烷基環(huán)丙烷辛酸和2-己烷基環(huán)丙烷癸酸兩種少見脂肪酸的發(fā)現(xiàn)，對藥材白芥子的定性鑒別有一定的指導意義，能否作為白芥子藥材定性標準之一，有待進一步驗證。

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