• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    白細(xì)胞介素-2及其相關(guān)藥物的應(yīng)用研究進展

    2011-12-09 01:17:24常瑞雪顏天華王秋娟郭青龍
    藥學(xué)進展 2011年1期
    關(guān)鍵詞:介素免疫性白細(xì)胞

    常瑞雪, 顏天華, 王秋娟, 郭青龍

    (中國藥科大學(xué)生理教研室,江蘇南京 210009)

    白細(xì)胞介素-2及其相關(guān)藥物的應(yīng)用研究進展

    常瑞雪, 顏天華, 王秋娟*, 郭青龍**

    (中國藥科大學(xué)生理教研室,江蘇南京 210009)

    綜述白細(xì)胞介素-2及抗白細(xì)胞介素-2受體單克隆抗體的應(yīng)用研究進展。白細(xì)胞介素-2是一種在機體的免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要而復(fù)雜作用的細(xì)胞因子,既可促進淋巴細(xì)胞增殖,增強免疫功能,又能限制T細(xì)胞反應(yīng)而增強機體的免疫耐受,故可用于治療腫瘤和感染性疾病及自身免疫性疾病。

    白細(xì)胞介素-2;自身免疫性疾病;免疫耐受;抗白細(xì)胞介素-2受體單克隆抗體

    細(xì)胞因子是由多種細(xì)胞分泌的小分子蛋白的總稱,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、免疫應(yīng)答和參與炎癥反應(yīng)等多種生物學(xué)功能,而白細(xì)胞介素-2(IL-2)即是其中一種。1976年Morgan等在小鼠脾細(xì)胞上清液中首次發(fā)現(xiàn)有一種能促進和維持T細(xì)胞體外生長的因子,并稱其為T細(xì)胞生長因子(TCGF),1979年被正式命名為IL-2。隨后有關(guān)IL-2的應(yīng)用研究取得了突飛猛進的發(fā)展。

    1 白細(xì)胞介素-2及其受體

    IL-2是一種具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子,是由位于第4號染色體上的單個基因編碼的一種單鏈多肽分子,分子質(zhì)量為15 500,由133個氨基酸組成,其肽鏈上第58、105和125位是半胱氨酸(Cys)殘基,翻譯后的加工包括在58位和105位半胱氨酸殘基間形成二硫鍵以及第3位蘇氨酸(Thr)的糖基化,其中二硫鍵對于其活性的保持具有重要的作用而Thr糖基化對其活性沒有影響。目前已可完全用基因工程的方法生產(chǎn)人IL-2,而且為了提高重組人IL-2(rhIL-2)的穩(wěn)定性及活性,常將野生型 IL-2 改造成三重突變體(C125A/L18M/L19S),即利用點突變技術(shù)將編碼rhIL-2第125位半胱氨酸的基因序列突變?yōu)楸彼嵝蛄校幋a18位亮氨酸的序列突變?yōu)榈鞍彼嵝蛄?,編碼19位亮氨酸的序列突變?yōu)榻z氨酸序列。常用的rhIL-2突變體表達(dá)系統(tǒng)有巴斯德畢赤酵母系統(tǒng)和大腸桿菌系統(tǒng)[1-2]。另外,由于IL-2的血漿半衰期僅約為2 h,臨床上為維持其療效常須大劑量頻繁注射,這不僅導(dǎo)致其毒性增加,還提高了治療成本。為了解決這個問題,目前國內(nèi)已經(jīng)研制出一種長效IL-2,即人血清白蛋白與 IL-2 的融合蛋白(HAS/IL-2),并已獲得專利[3],該融合蛋白在小鼠體內(nèi)的血漿半衰期是普通rhIL-2的10倍以上,因此其在人體內(nèi)的藥效有望維持更長時間。

    IL-2通過與效應(yīng)細(xì)胞膜上的專屬性受體(IL-2R)結(jié)合而發(fā)揮作用,高親和力的IL-2R由3種亞基組成:IL-2Rα(CD25)、IL-2Rβ(CD122)和 IL-2γ (CD132)[4]。其中,α鏈的胞漿區(qū)最短僅由13個氨基酸組成,而β和γ鏈的胞漿區(qū)則分別含286和86個氨基酸,因此α亞基不參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo),而β和γ亞基則能結(jié)合大量信號分子活化多條信號通路。單獨的IL-2Rα亞基或 β亞基對 IL-2的親和力很低(Kd≈10 nmol/L ,Kd≈100 nmol/L),單獨的 IL-2Rγ亞基對IL-2的親和力幾乎為零,而β和γ亞基結(jié)合也只能形成中等親和力的受體(Kd≈1 nmol/L),只有α、β、γ三者結(jié)合才能產(chǎn)生高親和力的 IL-2R (Kd≈10 pmol/L)[5]。

    當(dāng)IL-2Rα從細(xì)胞膜上經(jīng)酶解脫落后進入血液,就形成了可溶性 IL-2R(sIL-2R),在體液中,sIL-2R可以與細(xì)胞膜表面的IL-2R競爭結(jié)合 IL-2,結(jié)果造成膜 IL-2R 與 IL-2結(jié)合減少,使 IL-2對靶細(xì)胞作用減弱。正常人的血清和尿液中可檢出低水平的sIL-2R,而當(dāng)機體發(fā)生某些疾病如病毒性感染、惡性腫瘤、創(chuàng)傷和自身免疫性疾病時,sIL-2R在血清和其他體液中水平增高,且與病情密切相關(guān)[6-7]。例如,張平安等[8]研究發(fā)現(xiàn),與正常組(n=30)相比,系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動期患者(n= 40)血清中的 sIL-2R水平明顯增高[(688.40± 191.50)vs(416.62 ±117.03)U/m l,P <0.01],而經(jīng)甲基強的松龍治療后,患者的sIL-2R水平趨于正常。Nakase等[9]在對53例血癌(如急性白血病、骨髓增殖病、非霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤等)和40例實體瘤(如肺癌、消化系統(tǒng)癌癥等)患者血清中sIL-2R水平進行測定后發(fā)現(xiàn),兩組數(shù)值分別為(3 587±1 333)和(949±102)U·mL-1,明顯高于正常對照組[(306 ±7)U·mL-1,n=95](P<0.01)。

    2 白細(xì)胞介素-2的應(yīng)用研究

    2.1 用于腫瘤和感染性疾病的治療

    IL-2的主要生物學(xué)功能是促進T細(xì)胞的增殖與分化,此外,IL-2也能促進B細(xì)胞增殖、分化和分泌抗體,活化自然殺傷(NK)細(xì)胞、淋巴因子激活的殺傷(LAK)細(xì)胞和細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL),增加抗原遞呈細(xì)胞表面Ⅰ類和Ⅱ類分子的數(shù)量及增強抗原遞呈作用等。由于IL-2具有廣泛的免疫學(xué)功能,目前臨床上主要用于腫瘤、感染性疾病的治療,尤其是在腎癌和癌性積液治療方面療效明顯。

    研究表明,IL-2并不能直接干預(yù)腫瘤細(xì)胞的生長或殺死腫瘤細(xì)胞,其抗腫瘤機制主要在于刺激、活化大量的效應(yīng)細(xì)胞如CTL、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞等。臨床上常將IL-2單獨或與其他化療藥聯(lián)用治療晚期腎癌、惡性黑色素瘤及癌性胸、腹腔積液等[10-11]。Dehesa 等[12]通過每周 2 次皮損內(nèi)給予IL-2來治療7名轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者,治療前受試者身上共有244處皮損,而治療后幾乎所有皮損都得到了完全或部分緩解(分別占95.9%和3.7%),僅最大的一處皮損(占0.4%)對治療無反應(yīng),且治療過程中病人表現(xiàn)出較好的耐受性。

    艾滋病的主要特征是患者體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞(CD4細(xì)胞)呈進行性減少,最終導(dǎo)致機體的免疫系統(tǒng)失去對各種病原體的抵抗力。目前,針對艾滋病的治療主要采用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(ART)或高活性抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART),這些療法能增加患者體內(nèi)CD4細(xì)胞數(shù)目并減少致病菌對機體的感染。近幾年,基于增強機體免疫的療法正被逐步用于艾滋病的治療,在HAART基礎(chǔ)上采用基于增強免疫的IL-2輔助治療,可以明顯增加患者體內(nèi)CD4細(xì)胞數(shù)目,并改善機體的免疫反應(yīng)[13-14]。此外,IL-2也可用于其他病毒如人類乳頭瘤病毒、皰疹病毒感染的輔助治療。

    2.2 用于自身免疫性疾病的治療

    如今,許多免疫學(xué)家都將IL-2看作是一種在體內(nèi)具有兩種相對立作用的細(xì)胞因子,這是因為IL-2除可作為TCGF促進T細(xì)胞的增殖分化外,還能限制T細(xì)胞的反應(yīng)并產(chǎn)生免疫耐受[15]。實驗發(fā)現(xiàn),缺乏IL-2或IL-2R基因的小鼠非但沒有出現(xiàn)明顯的免疫無能,相反還產(chǎn)生了各種嚴(yán)重的T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾?。?6-17]。Setoguchi等[17]分別給出生第10和20天的正常BABL/C小鼠腹腔注射抗IL-2單克隆抗體1mg,結(jié)果,小鼠在3個月時出現(xiàn)了明顯的自身免疫性胃炎,同時,體循環(huán)中出現(xiàn)了抗胃壁細(xì)胞抗體。隨后他們又發(fā)現(xiàn),在非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠出生后的第10和20天分別給其腹腔注射抗IL-2單克隆抗體1 mg,可加速其糖尿病的發(fā)生,并且糖尿病的發(fā)病率和胰腺炎的嚴(yán)重程度都明顯增加,同時,與對照組相比,其胃炎(90.9%vs 0%)和甲狀腺炎(54.5%vs0%)的發(fā)病率也都明顯增加。上述研究結(jié)果均表明,IL-2在維持機體的免疫耐受方面也起著重要的作用,因而可用于自身免疫性疾病的防治。

    CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+Treg)是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的一種重要亞型,主要由胸腺產(chǎn)生,并進入外周血液和淋巴組織,維持正常免疫反應(yīng)和免疫耐受的平衡[18]。CD4+CD25+Treg組成性表達(dá)CD4、CD25、Foxp3、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4(CTLA-4)[19]和糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體(GITR)等分子。正常情況下,CD4+CD25+Treg約占嚙齒動物和人外周血CD4+T細(xì)胞的5% ~10%。CD4+CD25+Treg具有免疫無能性和免疫抑制性兩大特征,其免疫無能性表現(xiàn)在對高濃度IL-2的單獨刺激、固相包被或可溶性CD3單抗以及CD3和CD8單抗的聯(lián)合作用呈無應(yīng)答狀態(tài),也不產(chǎn)生T細(xì)胞增殖分化所需的IL-2,呈現(xiàn)一種免疫惰性狀態(tài);而免疫抑制性表現(xiàn)在其經(jīng)激活后能抑制CD4+和CD8+細(xì)胞的活化與增殖,且這種抑制作用是非特異性的,不受組織相容性抗原的限制。CD4+CD25+Treg發(fā)揮免疫抑制作用的機制主要有兩種:細(xì)胞直接接觸機制和細(xì)胞因子調(diào)節(jié)機制,前者主要與Treg表面的CTLA-4和GITR有關(guān),而后者主要與分泌IL-10和TGF-β等細(xì)胞因子有關(guān)。

    事實上,因 IL-2、IL-2Rα 或 β 缺失而產(chǎn)生的各種嚴(yán)重系統(tǒng)性自身免疫性疾病都與CD4+CD25+Treg的生成減少有關(guān)[20-21],而用 IL-2 單克隆抗體中和 IL-2,可選擇性減少小鼠體內(nèi)CD4+CD25+Treg的數(shù)量[17]。Malek等[21]發(fā)現(xiàn),將一定數(shù)量的CD4+CD25+Treg轉(zhuǎn)移到IL-2β-/-小鼠體內(nèi)可以阻止自身免疫性疾病的產(chǎn)生。大量研究均已證實,IL-2對CD4+CD25+Treg在胸腺中的發(fā)育、外周功能的維持及其免疫抑制作用的發(fā)揮都起著非常重要的作用[22-25]。

    2.2.1 用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療

    系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種因自身免疫功能失調(diào)而導(dǎo)致多系統(tǒng)多器官損害的自身免疫性疾病,表現(xiàn)為,機體免疫耐受功能喪失,免疫復(fù)合物清除障礙,血清中存在多種自身抗體,如抗核抗體、抗雙鏈DNA(ds-DNA)抗體、抗組蛋白抗體等。研究發(fā)現(xiàn),SLE患者的免疫系統(tǒng)中存在著許多異常,但主要是T淋巴細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常,其中最受關(guān)注的是IL-2轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)異常和T細(xì)胞受體(TCR)信號異常[26]。

    早在1981年,Altman等就發(fā)現(xiàn)在SLE動物模型中IL-2的產(chǎn)生及活性都存在缺陷,隨后的大量研究也都證實了這一結(jié)果。近幾年的研究表明,SLE患者體內(nèi)IL-2水平及活性降低的主要原因在于T淋巴細(xì)胞內(nèi) IL-2 的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)出現(xiàn)異常[26-27]。正常情況下,IL-2的轉(zhuǎn)錄主要由結(jié)合在IL-2啟動子上的大量轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控,而這些轉(zhuǎn)錄因子的功能取決于細(xì)胞的激活狀態(tài),當(dāng)這些轉(zhuǎn)錄因子與IL-2啟動子的結(jié)合狀態(tài)發(fā)生改變或出現(xiàn)異常時就可能導(dǎo)致IL-2的合成出現(xiàn)異常。影響IL-2合成的主要因素包括:

    1 )環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)物(CREM)表達(dá)增加。在所有與SLE發(fā)病學(xué)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子中,CREM和環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)是最重要的兩種,它們通過與IL-2啟動子的-180位點結(jié)合來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄,磷酸化的CREB(pCREB)與IL-2啟動子結(jié)合可以促進轉(zhuǎn)錄,而CREM被激活后,可取代pCREB結(jié)合到啟動子上,抑制轉(zhuǎn)錄[28]。因此,胞內(nèi)CREM/pCREB比值是影響IL-2轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵因素。最近研究表明,胞內(nèi)CREM/pCREB比值主要與鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶IV(CaMK-IV)和蛋白磷酸酶2Ac(PP2Ac)這兩種酶的表達(dá)及活性有關(guān)[29-30]。CaMK-IV 的作用是在細(xì)胞核中直接促進CREM表達(dá)的增加并促進其與IL-2啟動子結(jié)合,PP2Ac則主要參與pCREM在T淋巴細(xì)胞中的去磷酸化,因此 CaMK-IV和 PP2Ac的增加將導(dǎo)致 IL-2合成減少。研究發(fā)現(xiàn),SLE患者 T淋巴細(xì)胞中CaMK-IV和PP2Ac都明顯增加。

    2 )活化T細(xì)胞核因子(NF-AT)增加。研究發(fā)現(xiàn),SLE患者體內(nèi) NF-ATc2(NF-AT的一種亞型)的轉(zhuǎn)錄、表達(dá)及其與DNA的結(jié)合活性都明顯增加,促使 NF-ATc2 與 IL-2 啟動子 AP-1 位點結(jié)合增加,而這種結(jié)合的增加對IL-2啟動子起著負(fù)性調(diào)節(jié)作用,最終導(dǎo)致 IL-2 產(chǎn)生減少[31]。

    3 )p65/p50減少。生理條件下,核因子NF-κB的p65和p50亞單位組成p65/p50二聚體,其通過與IL-2啟動子上的 NF-κB 位點結(jié)合來上調(diào) IL-2的轉(zhuǎn)錄。SLE患者T細(xì)胞中p65亞單位減少而p50亞單位增加,因此p65/p50二聚體減少,IL-2的轉(zhuǎn)錄受到抑制[32-33]。

    Humrich 等[34]發(fā)現(xiàn),在疾病早期用抗 IL-2 抗體中和SLE小鼠體內(nèi)的IL-2,可增加效應(yīng)T細(xì)胞的高反應(yīng)性,加劇Treg和效應(yīng)T細(xì)胞之間的不平衡,并加重疾病的進程;而短期(24h)內(nèi)3次腹腔注射IL-2 2μg則可以減弱這種不平衡,阻止疾病的進展并降低死亡率。究其原因,可能是SLE小鼠體內(nèi)IL-2水平的減少導(dǎo)致外周CD4+Foxp3+Treg數(shù)目減少,而Treg的減少使得效應(yīng)T細(xì)胞相對增加,這種不平衡最終加重了疾病的進程。大量的研究表明,SLE患者尤其是活動期患者的外周血中CD4+CD25+Treg數(shù)目減少或功能降低[35-36]。因此,逆轉(zhuǎn) Treg紊亂可能成為一種有前景的SLE治療方法。

    2.2.2 用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療

    目前,大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者體內(nèi)都存在著不同程度的CD4+CD25+Treg數(shù)目減少或功能降低,CD4+CD25+Treg異??赡軈⑴c了RA的發(fā)病并影響疾病進程。Ehrenstein等[37]發(fā)現(xiàn),活動期RA患者外周血Treg功能降低,表現(xiàn)在對抗CD3和抗CD28單克隆抗體的刺激反應(yīng)減弱,并且不能抑制激活的T細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌促炎因子。也有研究發(fā)現(xiàn),與正常組(n=9)相比,RA組患者(n=10)外周血中CD4+CD25+Treg的數(shù)目并沒有明顯的改變[(5.5±4.1)%vs(6.7±5.0)%,P>0.05],但RA患者關(guān)節(jié)滑液中CD4+CD25+Treg數(shù)目明顯多于外周血[(12.0±4.8)%vs(5.5± 4.1)%,P<0.01],且關(guān)節(jié)滑液中CD4+CD25+Treg表達(dá)高水平的CTLA-4、GITR和Foxp3,然而關(guān)節(jié)滑液中CD4+CD25+Treg的增殖反應(yīng)及其對效應(yīng)T細(xì)胞增殖的抑制作用均減弱[38]。另外,Vittecoq等[39]研究發(fā)現(xiàn),早期RA患者的一個免疫病理學(xué)特征是全血中的IL-2和INF-γ產(chǎn)生減少。因此,可以推斷RA患者體內(nèi)CD4+CD25+Treg數(shù)目的減少或功能的降低可能與缺乏IL-2有關(guān)。

    2.3 用作免疫佐劑及其他

    IL-2由于在激活T淋巴細(xì)胞增殖方面具有重要的作用,目前已被廣泛用作疫苗佐劑,如用作乙型肝炎疫苗、單純皰疹病毒疫苗、HIV疫苗等的制備。徐燦[40]等成功構(gòu)建了同時含幽門螺桿菌尿素酶B亞單位基因和小鼠IL-2基因的重組活減毒鼠傷寒沙門菌核酸疫苗。體內(nèi)研究表明,其對小鼠幽門螺桿菌感染具有免疫防護性,且免疫佐劑IL-2可提高核酸疫苗的免疫防護率(87.5%vs 62.5%,P<0.05)。

    研究發(fā)現(xiàn),IL-2與內(nèi)源性腦啡肽具有共同的抗原決定簇和相似的空間結(jié)構(gòu),因此它能競爭性地結(jié)合到中樞神經(jīng)系統(tǒng)中阿片受體上,產(chǎn)生中樞和外周神經(jīng)鎮(zhèn)痛作用,其中,中樞鎮(zhèn)痛作用主要通過阿片受體介導(dǎo),而外周鎮(zhèn)痛作用除阿片受體外可能還有其他分子的參與[41]。另有研究表明,IL-2可改善糖尿病大鼠血管內(nèi)皮依賴性舒張功能,這可能與激活NO通路和增加SOD有關(guān)[42]。

    3 抗白細(xì)胞介素-2受體單克隆抗體的應(yīng)用研究

    抗IL-2R單克隆抗體能顯著降低臨床器官移植中急性排斥反應(yīng)的發(fā)生,聯(lián)合用藥時可減少激素的用量,具有毒副作用小、成本效益高等特點。Basiliximab(Simulect,舒萊)和 Daclizumab(Zenapax,賽尼哌)是目前已被廣泛用于預(yù)防腎移植后急性排斥反應(yīng)發(fā)生的抗IL-2R單克隆抗體,二者均以IL-2R的α亞基為靶點,而CD25主要表達(dá)于激活的T淋巴細(xì)胞表面。靜止的T細(xì)胞僅表達(dá)中等親和力的由β和γ亞基組成的受體,激活的T細(xì)胞則可表達(dá)高親和力的 IL-2R 并分泌 IL-2,而產(chǎn)生的 IL-2通過自分泌和旁分泌作用與T細(xì)胞表面的IL-2R結(jié)合,促進T細(xì)胞的增殖與分化。應(yīng)用CD25單抗則可封閉IL-2R 中的α 鏈,使 IL-2和 IL-2R 的結(jié)合受阻,抑制激活的T細(xì)胞進入細(xì)胞增殖循環(huán),從而減少免疫應(yīng)答致急性排斥反應(yīng)的發(fā)生。

    Basiliximab是一種具有高度特異性的人/鼠嵌合抗體,可通過抗體鼠源性可變區(qū)競爭性地與ILRα亞基結(jié)合而發(fā)揮作用。由于Basiliximab可變區(qū)全部為鼠源性,所以在嵌合時保持了原來的特異性及親和力,與CD25的結(jié)合相當(dāng)緊密。同時,Basiliximab人源化成分占75%,因而具有免疫原性低、副作用小等特點。該單抗于2003年在國內(nèi)上市,臨床上常與不同的免疫抑制劑聯(lián)用,用于預(yù)防包括腎、肝、心臟等多種實體器官移植后急性排斥反應(yīng)的發(fā)生。

    Daclizumab是用于器官移植的第一個人源化單克隆抗體,含90%人IgG序列和10%鼠序列,由于抗體可變區(qū)大部分是人源性的,因此其與CD25的親和力較 Basiliximab低。該單抗由羅氏公司于1998年在美國首次上市,臨床上除用于預(yù)防腎移植的急性排斥反應(yīng)外,還廣泛用于其他實體器官移植的抗排異反應(yīng)[43]。近年來,人們對Daclizumab用于治療非感染性葡萄膜炎進行了大量的研究,早期研究表明,Daclizumab經(jīng)靜脈和皮下注射后均可安全有效地降低嚴(yán)重危及視力的非感染性中間葡萄膜炎、后葡萄膜炎或全葡萄膜炎患者對常規(guī)性全身皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑的依賴性,且耐受性良好。Reh等[44]初步考察了大劑量Daclizumab治療活動性非感染性葡萄膜炎的安全性及有效性,5名受試者于第0和14天分別接受靜脈注射Daclizumab 8和4 mg ·kg-1的誘導(dǎo)治療,若受試者在3周后未達(dá)到預(yù)定療效,則繼續(xù)皮下注射 Daclizumab 2 mg·kg-1,每4 周1次,持續(xù)52周。結(jié)果,4名受試者的玻璃體混濁現(xiàn)象在第4周時得到明顯改善,另一名受試者在第20周時也得到改善,且5人的平均視力明顯提高,即ETDRS(糖尿病視網(wǎng)膜病變早期治療研究)視力表上的目測字母數(shù)由69.2個增加到78.2個(P<0.12,Wilcoxon配對符號秩檢驗),同時患者對本品的耐受性好。此外,Sen等[45]首次嘗試將高劑量Daclizumab用于治療青少年自發(fā)性關(guān)節(jié)炎并發(fā)的后葡萄膜炎,結(jié)果表明,盡管Daclizumab有助于緩解患者的活動性炎癥,但在治療過程中需要對病人進行監(jiān)視,以防止?jié)撛诟弊饔玫陌l(fā)生,所以其安全性及有效性有待于進一步研究。此外,Daclizumab還被嘗試用于治療多發(fā)性硬化癥及其他自身免疫性疾病[46-47]。

    4 結(jié)語

    近年來,有關(guān) IL-2、CD4+CD25+Treg和自身免疫性疾病三者關(guān)系的研究日益增多,這對更加深入了解自身免疫性疾病的發(fā)病機制起到了非常重要的作用,并使得對IL-2的應(yīng)用研究由抗腫瘤治療逐漸擴展到對自身免疫性疾病的治療。目前,筆者所在實驗室也進行了這方面的研究,初步結(jié)果顯示,舌下給予重組人 IL-2(rhIL-2),對佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠具有一定的治療作用。至于IL-2對膠原性關(guān)節(jié)炎大鼠的作用,尚有待進一步研究。

    [1]劉堰,蘇暢,胡應(yīng)和,等.巴斯德畢赤酵母表達(dá)的突變型人白細(xì)胞介素-2的發(fā)酵條件與純化研究[J].生物工程學(xué)報,2005,21(3):430-434.

    [2]宋小雙,聶盼,馬永鵬,等.人白細(xì)胞介素-2突變體在大腸桿菌中的克隆表達(dá)與鑒定[J].西南大學(xué)學(xué)報,2009,31(8):93-97.

    [3]吳軍,唱韶紅,鞏新,等.人血清白蛋白與白細(xì)胞介素2的融合蛋白及其編碼基因:中國,ZL200310117068.X[P],2005-06-15.

    [4]Wang X,Rickert M,Garcia K C.Structure of the quaternary complex of interleukin-2 with itsα,β,and γcreceptors[J].Science,2005,310(5751):1159-1163.

    [5]Stauber D J,Debler EW,Horton PA,etal.Crystal structure of the IL-2 signaling complex:paradigm for a heterotrimeric cytokine receptor[J].ProcNatlAcadSciUSA,2006,103(8):2788-2793.

    [6]Arioz D T,Altindis M,Tokyol C,etal.Human papillomavirus typing and soluble interleukin-2 receptor levels in female sex workers with a negative cervical smear result[J].IntJGynaecolObstet,2009,106(3):210-212.

    [7]Barak V,SelmiC,Schlesinger M,etal.Serum inflammatory cytokines,complement components, and soluble interleukin 2 receptor in primary biliary cirrhosis[J].J Autoimmun,2009,33(3/4):178-182.

    [8]張平安,周心房,夏尊恩,等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者治療前后血清 TNF-帷糃 S255,255,255,0?、IL-6 和 sIL-2R水平變化及臨床意義[J].微循環(huán)學(xué)雜志,2010,20 (3):50-52.

    [9]Nakase K,Tsuji K,Tamaki S,etal.Elevated levels of soluble interleukin-2 receptor in serum of patients with hematological or non-h(huán)ematological malignancies[J].CancerDetectPrev,2005,29(3):256-259.

    [10] Baaten G,Voogd A C,Wagstaff J.A systematic review of the relation between interleukin-2 schedule and outcome in patients with metastatic renal cell cancer[J].EurJ Cancer,2004,40(8):1127-1144.

    [11] Petrella T,Quirt L,Verma S,etal.Single-agent interleukin-2 in the treatment of metastatic melanoma:a systematic review[J].CancerTreatRev,2007,33(5):484-496.

    [12] Dehesa L A,Vilar-Alejo J,Valeron-Almazan P,etal. Experience in the treatment of cutaneous in-transitmelanoma metastases and satellitosis with intralesional interleukin-2 [J].ActasDermosifiliogr,2009,100(7): 571-585.

    [13] de Boer A W,Markowitz N,Lane H C,etal.A randomized controlled trial evaluating the efficacy and safety of intermittent 3-,4-, and 5-day cycles of intravenous recombinant human Interleukin-2 combined with antiretroviral therapy(ART)versus ART alone in HIV-seropositive patientswith 100-300 CD4+T cells[J].ClinImmunol,2003,106(3):188-196.

    [14] Read SW,Lempicki R A,DiMascio M,etal.CD4 T Cell Survival after Intermittent Interleukin-2 Therapy is Predictive of an Increase in the CD4 TCell Countof HIV-Infected Patients[J].JInfectDis,2008,198(6):843-850.

    [15] Wang JG,Wicker L S,Santamaria P.IL-2 and its highaffinity receptor:genetic control of immunoregulation and autoimmunity [J].SeminImmunol,2009,21(6): 363-371.

    [16] Yamanouchi J,Rainbow D,Serra P,etal.Interleukin-2 gene variation impairs regulatory T cell function and causes autoimmunity[J].NatGenet,2007,39(3):329-337.

    [17] Setoguchi R,Hori S,Takahashi T,etal.Homeostatic maintenance of natural Foxp3+CD25+CD4+regulatory T cells by interleukin(IL)-2 and induction of autoimmune disease by IL-2 neutralization[J].JExpMed,2005,201 (5):723-735.

    [18] Baltcheva I,Codarri L,Pantaleo G,etal.Lifelong dynamics of human CD4+CD25+regulatory T cells:Insights from in vivo data and mathematicalmodeling[J].J TheorBiol,2010,266(2):307-322.

    [19] Jain N,Nguyen H,Chambers C,etal.Dual function of CTLA-4 in regulatory T cells and conventional T cells to prevent multiorgan autoimmunity[J].ProcNatlAcadSci USA,2010,107(4):1524-1528.

    [20] Malek TR,Bayer A L.Tolerance,not immunity,crucially depends on IL-2[J].NatRevImmumol,2004,4(9):665-674.

    [21] Malek TR,Yu A,Vincek V,etal.CD4 regulatory T cells prevent lethal autoimmunity in IL-2Rβ-deficient mice: Implications for the nonredundant function of IL-2[J].Immunity,2002,17(2):167-178.

    [22] Turka L A,Walsh P T.IL-2 signaling and CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells[J].FrontBiosci,2008,13(1): 1440-1446.

    [23] Bayer A L,Yu A,Malek T R.Function of the IL-2R for thymic and peripheral CD4+CD25+Foxp3+T regulatory cells[J].JImmunol,2007,178(7):4062-4071.

    [24] Burchill M A,Yang J Y,Vang K B,etal.Interleukin-2 receptor signaling in regulatory T cell development and homeostasis[J].ImmunolLett,2007,114(1):1-8.

    [25] Yu A X,Zhu L J,Altman N H,etal.A low Interleukin-2 receptor signaling threshold supports the development and homeostasis of T regulatory cells[J].Immunity,2008,30 (2):204-217.

    [26] Gomez-Martin D,Diaz-Zamudio M,Crispin JC,etal. Interleukin 2 and systemic lupus erythematosus:beyond the transcriptional regulatory net abnormalities[J].AutoimmunRev,2009,9(1):34-39.

    [27] Crispin J C,Tsokos G C.Novel molecular targets in the treatment of systemic lupus erythematosus[J].Autoimmun Rev,2008,7(3):256-261.

    [28] Solomou E E,Juang Y T,Gourley M F,etal.Molecular basis of deficient IL-2 production in T cells from patients with systemic lupus erythematosus[J].J Immunol,2001,166(6):4216-4122.

    [29] Juang Y T,Wang Y,Solomou E E,etal.Systemic lupus erythematosus serum IgG increases CREM binding to the IL-2 promoter and suppresses IL-2 production through CaMKIV[J].JClinInvest,2005,115(4):996-1005.

    [30] Katsiari CG,Kyttaris V C,Juang Y T,etal.Protein phosphatase 2A is a negative regulator of IL-2 production in patients with systemic lupus erythematosus[J].JClin Invest,2005,115(11):3193-3204.

    [31] Kyttaris V C,Wang Y,Juang Y T,etal.Increased levels of NF-ATc2 differentially regulate CD154 and IL-2 genes in T cells from patientswith systemic lupus erythematosus[J].JImmunol,2007,178(3):1960-1966.

    [32] Wong H K,Kammer GM,Dennis G,etal.Abnormal NF-kappaB activity in T lymphocytes from patients with systemic lupus erythematosus is associated with decreased p65-relA protein expression[J].JImmunol,1999,163 (3):1682-1689.

    [33] Herndon T M,Juang Y T,Solomou E E,etal.Direct transfer of p65 into T lymphocytes from systemic lupus erythematosus patients leads to increased levels of interleukin-2 promoter activity[J].ClinImmunol,2002,103 (2):145-153.

    [34] Humrich JY,Morbach H,Undeutsch R,etal.Homeostatic imbalance of regulatory and effector T cells due to IL-2 deprivation amplifies murine lupus[J].ProcNatlAcad SciUSA,2010,107(1):204-209.

    [35] Lee J H,Wang L C,Lin Y T,etal.Inverse correlation between CD4+regulatory T-cell population and autoantibody levels in paediatric patients with systemic lupus erythematosus[J].Immunology,2006,117(2):280-286.

    [36] Lee H Y,Hong Y K,Yun H J,etal.Altered frequency and migration capacity of CD4+CD25+regulatory T cells in systemic lupus erythematosus[J].Rheumatology,2008,47(6):789-794.

    [37] Ehrenstein M R,Evans JG,Singh A,etal.Compromised function of regulatory T cells in rheumatoid arthritis and reversal by anti-TNFalpha therapy[J].JExpMed,2004,200(3):277-285.

    [38] Mottonen M,Heikkinen J,Mustonen L,etal.CD4+CD25+T cellswith the phenotypic and functional characteristics of regulatory T cells are enriched in the synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis[J].ClinExp Immunol,2005,104(2):360-367.

    [39] Vittecoq O,Jouen-Beades F,Krzanowska K,etal.Rheumatoid factors,anti-filaggrin antibodies and low in vitro interleukin-2 and interferon-γ production are useful immunological markers for early diagnosis of community cases of rheumatoid arthritis.A preliminary study[J].JointBoneSpine,2001,68(2):144-153.

    [40]徐燦,李兆申,杜奕奇,等.以白細(xì)胞介素-2為免疫佐劑的幽門螺桿菌尿素酶B亞單位核酸疫苗的構(gòu)建及其免疫保護作用[J].胃腸病學(xué),2007,12(5):283-287.

    [41] Song P,Liu XY,Zhao ZQ.Interleukin-2-induced antinociception inmorphine-insensitive rats[J].ActaPharmacol Sin,2002,23(11):981-984.

    [42] Qian L B,Wang H P,Qiu W L,etal.Interleukin-2 protects against endothelial dysfunction induced by high glucose levels in rats[J].VascPharmacol,2006,45(6): 374-382.

    [43]Kirchner V A,Suszynski TM,Radosevich DM,etal. Anti-CD25 antibody(daclizumab)maintenance therapy in pancreas transplantation[J].TransplantProc,2010,42 (6):2003-2005.

    [44] Yeh S,Wroblewski K,Buggage R,etal.High-dose humanized anti-IL-2 receptor alpha antibody(daclizumab)for the treatment of active,non-infectious uveitis[J].JAutoimmun,2008,31(2):91-97.

    [45] Sen H N,Levy-Clarke G,F(xiàn)aia L J,etal.High-dose daclizumab for the treatment of juvenile idiopathic arthritis associated active anterior uveitis[J].AmJOphthalmol,2009,148(5):696-703.

    [46] Wynn D,Kaufman M,Montalban X,etal.Daclizumab in active relapsing multiple sclerosis(CHOICE study):a phase 2,randomised,double-blind,placebo-controlled,add-on trial with interferon beta[J].LancetNeurol,2010,9(4):381-390.

    [47] Waldmann T A.Daclizumab(anti-Tac,Zenapax)in the treatment of leukemia/lymphoma[J].Oncogene,2007,26 (25):3699-3703.

    Advances in Application of Interleukin-2 and Its Related Drugs

    CHANG Rui-xue, YAN Tian-h(huán)ua, WANG Qiu-juan, GUO Qing-long

    (DepartmentofPhysiology,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210009,China)

    Interleukin-2(IL-2)is a cytokine which plays an important and complex role in the immune regulation.IL-2 can enhance immune function by stimulating lymphocyte proliferation and increase the immune tolerance because of its ability to restrict T cell responses.Thus it can be used not only in the treatment of cancer and infectious diseases,but also in the suppression of autoimmune diseases.Advances in application of IL-2 and anti-IL-2 receptormonoclonal antibodieswere reviewed.

    interleukin-2;autoimmune disease;immune tolerance;anti-IL-2 receptormonoclonal antibody

    R 979.5

    A

    1001-5094(2011)01-0001-07

    10.3969/j.issn.1001-5094.2011.01.001

    [接受日期]2010-11-26

    *通訊作者:王秋娟,教授;

    研究方向:心血管藥理學(xué);

    Tel:025-83271341; E-mail:qjwangnj@sina.com

    **通訊作者: 郭青龍,教授;

    研究方向:腫瘤藥理學(xué);

    Tel:025-83271055; E-mail:qinglongguo@hotmail.com

    (責(zé)任編輯:范鳴)

    猜你喜歡
    介素免疫性白細(xì)胞
    白細(xì)胞
    中國寶玉石(2021年5期)2021-11-18 07:34:50
    從扶正祛邪法探討免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的防治
    心力衰竭患者白細(xì)胞介素6、CRP表達(dá)水平與預(yù)后的相關(guān)性探討
    胸腺瘤與自身免疫性疾病的研究進展
    Atg5和Atg7在自身免疫性疾病中的研究進展
    白細(xì)胞降到多少應(yīng)停止放療
    人人健康(2017年19期)2017-10-20 14:38:31
    吸煙對種植體周圍炎患者齦溝液中白細(xì)胞介素-1β表達(dá)的影響
    白細(xì)胞介素17在濕疹發(fā)病機制中的作用
    雞住白細(xì)胞蟲病防治體會
    Fas FasL 在免疫性血小板減少癥發(fā)病機制中的作用
    av.在线天堂| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 熟女人妻精品中文字幕| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产高清有码在线观看视频| 晚上一个人看的免费电影| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 男插女下体视频免费在线播放| 老司机福利观看| 亚洲久久久久久中文字幕| .国产精品久久| 成人二区视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 六月丁香七月| 精品一区二区三区人妻视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产成人a区在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产在视频线在精品| 搡老妇女老女人老熟妇| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 听说在线观看完整版免费高清| 永久网站在线| 色尼玛亚洲综合影院| 免费人成视频x8x8入口观看| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品永久免费网站| 亚洲欧美清纯卡通| 婷婷六月久久综合丁香| 看十八女毛片水多多多| 欧美国产日韩亚洲一区| 成熟少妇高潮喷水视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 国内精品美女久久久久久| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品一区www在线观看| 亚州av有码| av.在线天堂| 亚洲图色成人| 精品人妻视频免费看| 春色校园在线视频观看| 97超碰精品成人国产| 精品乱码久久久久久99久播| 国产亚洲欧美98| 久久久久国内视频| 男女那种视频在线观看| 俺也久久电影网| 国产 一区精品| 一级毛片我不卡| 精品熟女少妇av免费看| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品亚洲一级av第二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲精品久久国产高清桃花| 床上黄色一级片| 我的女老师完整版在线观看| 久久人人精品亚洲av| 成人特级黄色片久久久久久久| a级一级毛片免费在线观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品女同一区二区软件| 国产精品免费一区二区三区在线| 日韩一本色道免费dvd| 国产高清不卡午夜福利| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久久国产成人精品二区| 欧美色视频一区免费| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚州av有码| 最好的美女福利视频网| 亚洲无线观看免费| 又爽又黄a免费视频| 简卡轻食公司| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 在线免费观看的www视频| 久久久午夜欧美精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 一夜夜www| 高清日韩中文字幕在线| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲最大成人中文| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美xxxx性猛交bbbb| 欧美在线一区亚洲| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲18禁久久av| 一级a爱片免费观看的视频| 小说图片视频综合网站| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 大型黄色视频在线免费观看| 伦精品一区二区三区| 亚洲人成网站在线播| 国产成人aa在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲熟妇熟女久久| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美又色又爽又黄视频| 国产高清视频在线播放一区| 看黄色毛片网站| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 51国产日韩欧美| 国产成人影院久久av| 中国国产av一级| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产精品国产高清国产av| 看黄色毛片网站| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av免费高清在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 成人av一区二区三区在线看| 白带黄色成豆腐渣| 成人精品一区二区免费| 色尼玛亚洲综合影院| 在线看三级毛片| 99在线视频只有这里精品首页| 综合色av麻豆| 午夜a级毛片| 国产一区二区三区av在线 | 日本熟妇午夜| 国产久久久一区二区三区| 成人av在线播放网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 中国美女看黄片| 久久久久久久午夜电影| 我的女老师完整版在线观看| 香蕉av资源在线| 国产毛片a区久久久久| a级一级毛片免费在线观看| 精品久久久噜噜| 亚洲第一电影网av| 久久久久久久久久久丰满| 欧美高清性xxxxhd video| 精品一区二区三区视频在线| 天天躁日日操中文字幕| av在线天堂中文字幕| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | av卡一久久| 亚洲av一区综合| 淫秽高清视频在线观看| 一进一出好大好爽视频| 91av网一区二区| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 欧美最黄视频在线播放免费| 精品久久久久久久久久免费视频| av黄色大香蕉| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲人成网站在线播| 美女被艹到高潮喷水动态| 又爽又黄无遮挡网站| 久久久久久久午夜电影| 五月伊人婷婷丁香| 熟女电影av网| 国产精品电影一区二区三区| 插阴视频在线观看视频| 亚洲av免费在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| av黄色大香蕉| 99热全是精品| 变态另类丝袜制服| 日本五十路高清| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产成人aa在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品1区2区在线观看.| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品久久久噜噜| 欧美最黄视频在线播放免费| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲性久久影院| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产精品不卡视频一区二区| 日本成人三级电影网站| 久久热精品热| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 欧美区成人在线视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 精品一区二区免费观看| 亚洲18禁久久av| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 69人妻影院| 插阴视频在线观看视频| 亚洲人与动物交配视频| 99热这里只有精品一区| 99精品在免费线老司机午夜| 看免费成人av毛片| 久久热精品热| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 村上凉子中文字幕在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 男人舔奶头视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 热99在线观看视频| 午夜a级毛片| 热99在线观看视频| 91久久精品国产一区二区三区| 91久久精品国产一区二区成人| 国模一区二区三区四区视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 美女内射精品一级片tv| 丝袜美腿在线中文| 久久6这里有精品| 国产精品久久久久久av不卡| 日韩中字成人| 日本成人三级电影网站| 国产色爽女视频免费观看| 欧美zozozo另类| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 成人综合一区亚洲| 久久午夜亚洲精品久久| 高清日韩中文字幕在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 99热6这里只有精品| a级毛片免费高清观看在线播放| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲人成网站高清观看| 久久九九热精品免费| 日本精品一区二区三区蜜桃| 免费在线观看影片大全网站| 啦啦啦韩国在线观看视频| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲内射少妇av| 少妇被粗大猛烈的视频| 草草在线视频免费看| av免费在线看不卡| 亚洲自偷自拍三级| 国产私拍福利视频在线观看| avwww免费| 我的女老师完整版在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久久久国产网址| 国产高潮美女av| 草草在线视频免费看| 九色成人免费人妻av| 岛国在线免费视频观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 毛片女人毛片| 最新在线观看一区二区三区| 中文在线观看免费www的网站| 99热这里只有是精品50| 成人综合一区亚洲| 亚洲性久久影院| 精品熟女少妇av免费看| 色哟哟哟哟哟哟| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲美女黄片视频| 午夜a级毛片| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国国产精品蜜臀av免费| 最近手机中文字幕大全| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 99久国产av精品| 亚洲天堂国产精品一区在线| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲无线观看免费| av天堂中文字幕网| 身体一侧抽搐| 男女下面进入的视频免费午夜| 精品午夜福利在线看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 国产高潮美女av| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 插阴视频在线观看视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 一级黄片播放器| 如何舔出高潮| 成人综合一区亚洲| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 高清午夜精品一区二区三区 | 国产黄a三级三级三级人| 偷拍熟女少妇极品色| videossex国产| 热99re8久久精品国产| 亚洲天堂国产精品一区在线| 中文在线观看免费www的网站| 美女被艹到高潮喷水动态| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 男人舔奶头视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩三级伦理在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 天天躁日日操中文字幕| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品久久久久久久久久久久久| 97超碰精品成人国产| 免费看a级黄色片| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲成人久久爱视频| 观看免费一级毛片| 少妇高潮的动态图| 亚洲自拍偷在线| a级毛片a级免费在线| 久久久色成人| 男女那种视频在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 精品久久久久久久久亚洲| 观看美女的网站| 99热6这里只有精品| av专区在线播放| 1000部很黄的大片| 日本精品一区二区三区蜜桃| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日本三级黄在线观看| 国产毛片a区久久久久| 深夜a级毛片| 69人妻影院| 九九爱精品视频在线观看| 午夜日韩欧美国产| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲av免费在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 直男gayav资源| 波野结衣二区三区在线| 亚洲美女视频黄频| 男女视频在线观看网站免费| 中出人妻视频一区二区| 搞女人的毛片| 国产精品福利在线免费观看| 成人漫画全彩无遮挡| 午夜激情福利司机影院| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 波多野结衣高清作品| 精品欧美国产一区二区三| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 一级黄色大片毛片| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 白带黄色成豆腐渣| 精品国产三级普通话版| 性插视频无遮挡在线免费观看| 老司机福利观看| 99久久九九国产精品国产免费| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | av.在线天堂| 国产精品人妻久久久影院| 男人的好看免费观看在线视频| 观看免费一级毛片| 永久网站在线| 亚洲av成人av| 在线免费十八禁| 成人欧美大片| 久久久久久九九精品二区国产| 国产一区二区激情短视频| 国产成人aa在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产黄a三级三级三级人| 简卡轻食公司| 国产精品人妻久久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99在线视频只有这里精品首页| 天堂网av新在线| av.在线天堂| 哪里可以看免费的av片| 国产人妻一区二区三区在| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 嫩草影院精品99| 国产单亲对白刺激| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 乱人视频在线观看| 中出人妻视频一区二区| 日韩精品中文字幕看吧| 一区福利在线观看| 一级毛片我不卡| 中文字幕久久专区| 波多野结衣高清无吗| 国产黄色小视频在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 99久久中文字幕三级久久日本| 好男人在线观看高清免费视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲七黄色美女视频| 精品久久久久久久久久久久久| 永久网站在线| 色综合站精品国产| 亚洲人成网站在线播| 久久精品人妻少妇| 99国产精品一区二区蜜桃av| 少妇熟女欧美另类| 少妇熟女aⅴ在线视频| 12—13女人毛片做爰片一| 国产精品久久久久久精品电影| 我要搜黄色片| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 一级a爱片免费观看的视频| 一进一出好大好爽视频| 我要看日韩黄色一级片| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 免费观看的影片在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 久久亚洲精品不卡| 卡戴珊不雅视频在线播放| 高清毛片免费看| 在线观看66精品国产| 99热网站在线观看| 最近手机中文字幕大全| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 97超视频在线观看视频| 国内精品宾馆在线| 精品国内亚洲2022精品成人| 22中文网久久字幕| 日韩强制内射视频| 欧美3d第一页| 亚洲最大成人中文| 热99在线观看视频| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲人成网站高清观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 精品熟女少妇av免费看| 十八禁网站免费在线| 精品人妻熟女av久视频| 97超碰精品成人国产| 精品人妻视频免费看| 十八禁网站免费在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲美女搞黄在线观看 | 露出奶头的视频| 欧美zozozo另类| 欧美极品一区二区三区四区| 免费av观看视频| 亚洲专区国产一区二区| 最新中文字幕久久久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产高清不卡午夜福利| 国产精品,欧美在线| 国内精品宾馆在线| a级一级毛片免费在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 免费观看人在逋| 亚洲七黄色美女视频| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲在线自拍视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 最近在线观看免费完整版| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产v大片淫在线免费观看| 国产熟女欧美一区二区| 97超视频在线观看视频| 久久久色成人| 国产精品野战在线观看| 国产三级中文精品| 露出奶头的视频| 国产亚洲欧美98| 久久久久国产网址| 久久亚洲精品不卡| 亚洲va在线va天堂va国产| 久久久久久久亚洲中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 成年女人永久免费观看视频| 久久人人爽人人片av| 久久亚洲国产成人精品v| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲最大成人手机在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产乱人视频| 淫秽高清视频在线观看| 国产日本99.免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲av一区综合| 特大巨黑吊av在线直播| 伦理电影大哥的女人| 99久久精品热视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 观看免费一级毛片| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲精品国产av成人精品 | 欧美日韩精品成人综合77777| 麻豆国产av国片精品| 亚洲国产精品合色在线| 六月丁香七月| 国产 一区 欧美 日韩| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 亚洲图色成人| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲熟妇熟女久久| 麻豆乱淫一区二区| 久久久久国产网址| 99热网站在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | www.色视频.com| 亚洲最大成人手机在线| 日韩一区二区视频免费看| 97碰自拍视频| 综合色丁香网| 亚洲国产精品久久男人天堂| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 老师上课跳d突然被开到最大视频| 久久精品人妻少妇| 夜夜爽天天搞| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 日韩中字成人| 久久久国产成人免费| 亚洲欧美日韩东京热| 亚州av有码| 国产精品伦人一区二区| 日本-黄色视频高清免费观看| 乱人视频在线观看| av黄色大香蕉| 国产男靠女视频免费网站| 美女内射精品一级片tv| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 中文在线观看免费www的网站| avwww免费| 国产亚洲欧美98| 身体一侧抽搐| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲综合色惰| 日本黄色片子视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 插阴视频在线观看视频| 国产精品不卡视频一区二区| 国产精品免费一区二区三区在线| 少妇熟女欧美另类| 插逼视频在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 男人舔女人下体高潮全视频| 熟女人妻精品中文字幕| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲最大成人av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲美女黄片视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日韩av在线大香蕉| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品av视频在线免费观看| 秋霞在线观看毛片| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 久久欧美精品欧美久久欧美| 性色avwww在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 免费高清视频大片| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 久久热精品热| 最近手机中文字幕大全| 国产成人freesex在线 | 精品久久久久久久久久免费视频| 精品久久久久久久久亚洲| 国产麻豆成人av免费视频| 久久精品人妻少妇| 可以在线观看的亚洲视频| 国产高潮美女av| 1024手机看黄色片| 色综合色国产| 欧美zozozo另类| 亚洲国产精品合色在线| 91久久精品国产一区二区三区| 国产精品一区二区免费欧美| avwww免费| 又爽又黄无遮挡网站| 波多野结衣高清无吗| 精品欧美国产一区二区三| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 老女人水多毛片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 在线看三级毛片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 精品日产1卡2卡| av福利片在线观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| av专区在线播放| 亚洲真实伦在线观看| 岛国在线免费视频观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久精品91蜜桃| 欧美性猛交黑人性爽| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产毛片a区久久久久| av免费在线看不卡| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美bdsm另类| 国内精品宾馆在线| 尾随美女入室| 丰满的人妻完整版| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久久久久久久久成人| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 人妻少妇偷人精品九色| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 日日撸夜夜添| 一级黄片播放器| 日本黄色视频三级网站网址|