降鈣素原在早期膿毒癥診斷中的應(yīng)用與分析

天津市泰達(dá)醫(yī)院急診內(nèi)科(300457) 陳建萍

降鈣素原(PCT)是由 116個(gè)氨基酸組成的多肽,它的分子量約為 13 000,是降鈣素的前體,在正常的情況下是由甲狀腺產(chǎn)生的,在發(fā)生全身性感染切除甲狀腺的情況下,PCT主要是來源于甲狀腺之外的器官。膿毒癥是指由微生物入侵機(jī)體感染后所導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)綜合征 (SIRS),進(jìn)一步發(fā)展后可導(dǎo)致嚴(yán)重膿毒癥、膿毒性休克以及多器官功能衰竭,它是 ICU中患者死亡的首要原因。在近年來的研究中發(fā)現(xiàn),出現(xiàn)膿毒癥時(shí),PCT的水平將會出現(xiàn)升高的現(xiàn)象。因此,PCT被認(rèn)為是一個(gè)非常有價(jià)值的標(biāo)志物,它能夠診斷出膿毒癥及其嚴(yán)重的程度,降鈣素原在膿毒癥中的角色日益?zhèn)涫荜P(guān)注。本文將從臨床的角度來分析 PCT在早期膿毒癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2007～2009年期間本院的膿毒癥病例 90例,根據(jù)膿毒癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)將其分為膿毒癥組和對照組。膿毒癥組的患者 50例,對照組40例。在 90例患者中,男 44例,女 46例,平均年齡(63.3±19.6)歲。

1.2 檢測方法 降鈣素原采用了酶聯(lián)熒光法(ELFA),將免疫分析三明治法以及熒光檢測法結(jié)合使用。將固相容器(SPR)用作移液管裝置,并提前準(zhǔn)備好試劑封閉在試劑條里,檢測步驟都將在這個(gè)裝置中自動進(jìn)行。將樣品放到具有堿性磷酸酶標(biāo)記的抗 PCT的孔里,使此復(fù)合物在 SPR容器中進(jìn)出數(shù)次,此種操作將會使抗原同抗體緊密結(jié)合在 SPR的內(nèi)壁形成一個(gè)三明治結(jié)構(gòu)。未結(jié)合的成分將被清除,連續(xù)執(zhí)行兩個(gè)檢測步驟。在每步中,4-甲基傘磷酸鹽將會在 SPR中循環(huán)進(jìn)出。堿性磷酸酶將催化水解 4-甲基傘磷酸鹽成為 4-甲基傘形酮,此物質(zhì)將被激發(fā)產(chǎn)生熒光,能夠在 450nm波長處來測定其熒光的強(qiáng)度,并且熒光的強(qiáng)度同樣品中抗原的濃度成正比關(guān)系。等到檢測結(jié)束時(shí),可根據(jù)機(jī)器的兩個(gè)校準(zhǔn)熒光階段點(diǎn)將結(jié)果自動計(jì)算并打印出來。

1.3 試劑盒組成 SPR;單克隆大鼠抗 PCT抗體;堿性磷酸酶;TRJSNaCl Tween吐溫緩沖液;底物:二乙醇胺(堿化劑)、4-甲基傘磷酸鹽、鈉光疊氮化物。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 研究中的數(shù)據(jù)是以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差,或者中位數(shù)以及四分位數(shù)間距 M(JQ)來表示。計(jì)量資料數(shù)據(jù)先進(jìn)行 1-K-S正態(tài)性檢驗(yàn),進(jìn)行兩兩比較時(shí)采用的是 LSD法,而偏態(tài)分布所采用的是Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),兩組之間的數(shù)據(jù)正態(tài)采用的是 t檢驗(yàn),偏態(tài)采用的是 Mann-Whitney U檢驗(yàn),而計(jì)數(shù)資料采用的是 X2檢驗(yàn)。所得數(shù)據(jù)由 SPSS16.O和 Medcalc11.3統(tǒng)計(jì)軟件完成,P＜0.05為差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

90例患者,在 28天內(nèi)生存的 72例,死亡的 18例,病死率為 20%,在第 1天的 APACHEII評分是(15.8±8.0)分。病種的分布情況是,在膿毒癥組50例患者中,下呼吸道感染 28例,尿路感染 5例,下呼吸道且尿路兩部位感染 4例,化膿性腦膜炎 2例,胰腺炎 2例,腸道感染 2例,血行感染 2例,腸穿孔且彌漫性腹膜炎 2例,皮膚軟組織感染 2例,肝膿腫 1例,而其中發(fā)生膿毒性休克 8例,死亡 7例;在對照組 40例中,冠心病合并心衰 15例,低血糖昏迷6例,COPD5例,腫瘤患者 5例,營養(yǎng)不良 4例,真性紅細(xì)胞增多癥 2例,高血壓腦病 3例。膿毒癥組的年齡大于對照組(P＜0.01),兩組間的性別構(gòu)成比差異無顯著性。膿毒癥組的病死率高于對照組(P＜0.01)。膿毒癥組的 APACHE11評分和 SOFA評分都高于對照組(P＜0.01)。除此之外,在 50例膿毒癥患者中,其血、尿、便、痰以及胸腹水培養(yǎng),其中 18例患者病原學(xué)無陽性發(fā)現(xiàn),占 36%;G-菌為11例 ,占 22%;G+菌為 3例 ,占 6%;真菌為 3例,占6%。復(fù)數(shù)菌(包括真菌、G-菌、G+菌)感染為 15例,占 30%。G-菌、G+菌的 PCT水平差異無顯著性;細(xì)菌和真菌的 PCT水平差異無顯著性。

3 討 論

在近 20年的時(shí)間內(nèi),膿毒癥的病原學(xué)呈現(xiàn)出了一定的變化。19世紀(jì) 80年代中期時(shí),膿毒癥最常見的致病菌是 G-菌,但是卻出現(xiàn)了逐漸被 G+菌所取代的趨勢。目前,由真菌感染所引起的膿毒癥呈現(xiàn)了上升的趨勢,大約占膿毒癥病原學(xué)的 5%,而且由真菌感染所引起的膿毒癥病死率較高,現(xiàn)已引起臨床醫(yī)生的重視。本研究中的數(shù)據(jù)顯示,對于診斷膿毒癥方面,PCT具有更高的特異性和靈敏性。Pierre Emmanuel Charles等人[1]所做的實(shí)驗(yàn)給了我們很大的啟示,當(dāng) PCT的水平達(dá)到了 2ng/mL時(shí),我們認(rèn)為在很大程度上已經(jīng)發(fā)生了膿毒癥,進(jìn)行抗生素的治療便刻不容緩。當(dāng) PCT達(dá)到了 16ng/mL時(shí),在很大程度上應(yīng)該是 G-菌感染,這時(shí)應(yīng)該給予能夠覆蓋 G-菌窄譜強(qiáng)有力的抗生素,從而能夠減少由于抗生素廣面覆蓋,而造成的二重感染和醫(yī)療資源的浪費(fèi)現(xiàn)象的發(fā)生率。在本研究中比較了 11例G-菌和 3例 G+菌以及 13例細(xì)菌和 3例真菌的PCT水平,都沒有發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。由于研究例數(shù)較少,誤差的偏移將會較大,我們應(yīng)該持謹(jǐn)慎態(tài)度。我們知道 PCT是由 TNF-α及 IL-1誘導(dǎo)而產(chǎn)生的,兩者都是細(xì)胞因子瀑布的上游細(xì)胞因子。在以往的眾多研究中發(fā)現(xiàn),G-菌的 LPS可以誘發(fā)出細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò);但是在近些年的研究中發(fā)現(xiàn),G+菌中的金黃色葡萄球菌也可以引發(fā)出細(xì)胞因子瀑布。然而從這個(gè)角度來探討 G-菌和 G+菌感染時(shí)的 PCT水平有無差異,將有待于進(jìn)一步的動物試驗(yàn)以及臨床觀察。

通過本研究發(fā)現(xiàn),對于早期膿毒癥的診斷,PCT具有較高的特異性以及診斷靈敏性。當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌的感染后,PCT的水平在 2～4小時(shí)后開始升高,在 8～24小時(shí)后便能夠達(dá)到高峰,這種狀態(tài)將會持續(xù)數(shù)天或者數(shù)周。由于 PCT具有獨(dú)特的動力學(xué)特征,將其應(yīng)用于膿毒癥的早期診斷中具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

[1] 任成山.膿毒癥的發(fā)病機(jī)制[J].中國急救醫(yī)學(xué),2005,25(10):

[2] 劉曉蓉.膿毒癥凝血機(jī)制及組織因子通路抑制劑治療的研究現(xiàn)狀及治療進(jìn)展[J].中國急救醫(yī)學(xué),2005,25(11):

[3] 胡如雪.降鈣素原(PCT)的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2005,23(3):