非洛地平緩釋片的研制及其體外釋放研究

朱雨秋，郭圣榮

(1.上海交通大學(xué)藥學(xué)院 ，上海 200240；2.上海愛的發(fā)制藥有限公司，上海 201702)

非洛地平緩釋片的研制及其體外釋放研究

朱雨秋1,2，郭圣榮1

(1.上海交通大學(xué)藥學(xué)院 ，上海 200240；2.上海愛的發(fā)制藥有限公司，上海 201702)

目的研制非洛地平緩釋片，評價其與原研制劑的體外釋放度相似性。方法采用骨架片技術(shù)，通過研究骨架材料種類、粘度、用量，稀釋劑及制備工藝對釋放的影響，研制非洛地平緩釋片，通過相似因子法研究其與原研制劑在體外4種不同pH條件下的釋放度的差異。結(jié)果以HPMC為骨架材料，工藝采用濕法制粒法，乙醇溶液濃度為80%，制粒時間為40s，壓片硬度在50～70N時，所得的非洛地平緩釋片的釋放度與原研制劑最接近。4種不同pH條件下的釋放度的相似因子均大于50。結(jié)論研制的非洛地平緩釋片，其體外釋放與原研制劑相似。

非洛地平;緩釋片;HPMC;釋放度;相似因子法

非洛地平是第二代二氫吡啶類鈣拮抗劑，通過抑制小動脈平滑肌細胞外鈣的內(nèi)流和降低外周血管阻力用于治療高血壓；對心肌收縮力和心臟傳導(dǎo)無直接作用，故不會引起體位性低血壓[1]。

口服給藥后，非洛地平幾乎全部吸收且具有肝臟首過效應(yīng)，其相對生物利用度為20%。在給藥后2.5～5 h內(nèi)可達平均峰濃度[2]。以前應(yīng)用的是需日服2次的普通片劑，目前以緩釋制劑為主。該藥物的緩釋制劑是瑞士阿斯利康(AstraZeneca)制藥有限公司首先開發(fā)的，于1996年6月上市，商品名為波依定(plendilTM)。這是一個一日服用一次的緩釋片制劑，劑量規(guī)格分別為2.5、5、10 mg。以2.5 mg每日1次作為開始治療劑量，必要時劑量進一步增加。非洛地平緩釋制劑半衰期為25 h，服藥后血藥濃度上升緩慢、緩和，形成一平坦的非洛地平血漿濃度-時間曲線，作用持續(xù)24 h，不僅大大減少了因血壓降低反射性血管擴張引起的鈣拮抗劑常見的不良反應(yīng)，如心率加快、潮紅、頭痛，而且起效平穩(wěn)，口服吸收好，生物利用度高，不受個體差異、給藥劑量的影響，每天僅服用一次，提高了病人的順應(yīng)性[3]。

有研究表明，不同廠家的非洛地平緩釋片在體外釋放度、療效、持續(xù)時間和不良反應(yīng)的感受上有區(qū)別[4,5]，而波依定的單劑量費用明顯高于國產(chǎn)非洛地平緩釋片。本研究以波依定為對照制劑研制5 mg非洛地平緩釋片，通過相似因子法研究兩者在體外4種不同pH條件下的釋放度有無差異，從而獲得仿制波依定的最佳處方工藝。

1 處方工藝研究

1.1實驗材料與設(shè)備

1.1.1實驗材料 非洛地平原料(北京協(xié)和藥廠)；非洛地平對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100717-200501，)；非洛地平緩釋片(波依定?5 mg，阿斯利康制藥有限公司)；羥丙基甲基纖維素(日本信越化學(xué)有限公司)；微晶纖維素(日本旭化成)；乳糖(上海光明乳業(yè)有限公司)；黃原膠(山東阜豐有限公司)；海藻酸鈉(ISP國際特品公司)；Compritol 888 ATO(法國佳法賽)；硬脂酸鎂(淮南山河藥用輔料公司)。

1.1.2設(shè)備與儀器 快速攪拌制粒機(KJZ-10)、搖擺式顆粒機(YK-60)、壓片機(ZP-17)，均為上海天河制藥機械廠生產(chǎn)；片劑硬度儀(YPD-200，上海黃海機械廠)；三維運動混合機(HD15，無錫榮偉制藥機械廠)；紫外分光光度計(UV2401PC，日本島津)；溶出儀(ZRS-8G，天津大學(xué)無線電廠)。

1.2體外測定方法

1.2.1檢測波長的選擇 精密稱取非洛地平對照品約10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇適量，超聲使之溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得20 μg/ml的儲備液。再精密量取5 ml上述儲備液至10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得10 μg/ml的標準溶液，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)為空白，進行紫外掃描。發(fā)現(xiàn)非洛地平在363、239、202 nm處有最大吸收，而非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標準WS1-(X-152)-2005Z與美國藥典(USP29版)中非洛地平緩釋片均選擇362 nm為檢測波長，故我們選擇362 nm作為體外釋放的測定波長。

1.2.2儀器裝置 根據(jù)非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標準WS1-(X-152)-2005Z和美國藥典(USP29版)，釋放均采用溶出測定第2法。

1.2.3溫度控制 根據(jù)中國藥典2005版緩控釋制劑指導(dǎo)原則，模擬體溫應(yīng)控制在(37±0.5)℃。

1.2.4轉(zhuǎn)速選擇 在非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標準WS1-(X-152)-2005Z中，選用了200 r/min為溶出轉(zhuǎn)速；而在美國藥典(USP29版)中，轉(zhuǎn)速為50 r/min。體外釋放方法是模擬人體內(nèi)的消化道條件，溶出裝置轉(zhuǎn)速應(yīng)正確反映胃腸道蠕動速率。如果采用板漿法，一般以50～100轉(zhuǎn)為適宜，200 r/min過快，且長時間此轉(zhuǎn)速也易損壞溶出裝置。故參照美國藥典(USP29版)選用50 r/min。

1.2.5取樣時間點 根據(jù)中國藥典2005版緩控釋制劑指導(dǎo)原則，體外釋放速率試驗應(yīng)能反映出受試制劑時藥速率的變化特征，且能滿足統(tǒng)計學(xué)處理的需要，釋藥全過程的時間不應(yīng)低于給藥的間隔時間，且累計釋放率要求達到90%以上。緩釋制劑從釋藥曲線圖中至少選出3個取樣時間點，第1點為開始0.5～2 h的取樣時間點，用于考察藥物是否有突釋，第2點為中間的取樣時間點，用于確定釋藥特性，最后的取樣時間點，用于考察釋藥是否基本完全。根據(jù)以上原則，我們參照美國藥典(USP29版)中非洛地平緩釋片的取樣時間點，又由于非洛地平緩釋片是一個一日服用一次的緩釋制劑，我們擬定了4個取樣時間點：2、6、10和24 h，釋放度分別定為10%～30%，42%～68%，75%～95%，≥90%。

1.2.6標準曲線 精密稱取非洛地平對照品約10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇適量，超聲使之溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得20 μg/ml的儲備液。再分別精密吸取上述儲備液1、3、5、7、10 ml于10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，其濃度范圍為2～20 μg/ml，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)為空白，在362 nm處測定吸收值。以濃度C和吸收度A計算求得直線回歸方程為A=19.002 147C-0.000 443，r=0.999 941(n=5)，線性良好。

1.2.7釋放度方法的確定 按照中國藥典2005版釋放度測定法第一法，采用溶出度測定法第二法的裝置，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)500 ml為介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r/min，依法操作，在2、6、10和24 h分別取溶液5 ml濾過并即時在操作容器中補充相同溶液5 ml，取續(xù)濾液，照紫外-可見分光光度法，在362 nm的波長處測定吸收度；另精密稱取非洛地平對照品適量，用上述介質(zhì)溶解并定量稀釋成每1 ml含10 μg的溶液，同法測定。分別計算出每片在不同時間的釋放量。

1.3處方工藝篩選

1.3.1評價依據(jù) 按照確定的釋放度方法檢測被篩選處方的釋放度來進行處方工藝的研究。另外，日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗指導(dǎo)》中指出[6]，對于口服制劑，溶出特性能給出關(guān)于等效性的重要信息，所以在仿制藥的研發(fā)過程中，需研究與原研制劑的溶出比較。指導(dǎo)要求，與原研制劑的溶出曲線對比需進行4條不同的pH條件，口服緩釋制劑的4個pH通常為1.2、3.0～5.0、6.8～7.5與水。在非洛地平的處方研究中，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進行與原研的溶出比較。溶出數(shù)據(jù)使用相似因子法f2來評價其差異程度。

式中：

Ti-取樣點時試驗制劑的釋放度；

Ri-取樣點時參比制劑的釋放度；

n-取樣點的個數(shù)。

對于口服緩釋制劑，在測定時間內(nèi)，如果參比制劑的釋放≥85%，那么f2≥40被認為相似，溶出曲線無顯著差異；如果參比制劑的釋放在50%～85%之間，那么f2≥50被認為相似，溶出曲線無顯著差異；如果參比制劑的釋放<50%，那么f2≥55被認為相似，溶出曲線無顯著差異。

1.3.2處方對釋放度的影響

1.3.2.1不同骨架材料對片芯釋放度的影響 固定稀釋劑微晶纖維素處方量64 mg，乳糖處方量5 mg，分別以羥丙基甲基纖維素 4KM，海藻酸鈉，黃原膠，Compritol 888 ATO為骨架材料，制備非洛地平緩釋片，考察其釋放度，結(jié)果見圖1。

圖1 不同骨架材料的釋放曲線

從釋放結(jié)果中可以看出，以羥丙基甲基纖維素為骨架材料制備的緩釋片中藥物的釋放符合零級過程；以黃原膠為骨架材料，其藥物釋放緩慢；而海藻酸鈉與Compritol 888 ATO對藥物釋放的控制能力較差。因此，我們選擇羥丙基甲基纖維素作為非洛地平緩釋片的骨架材料。

1.3.2.2不同型號的羥丙基甲基纖維素對片芯釋放度的影響 固定稀釋劑微晶纖維素、乳糖和骨架材料羥丙基甲基纖維素的處方量分別為64、5、25 mg，分別考察羥丙基甲基纖維素的不同型號K4M, K15M與K100M對釋放的影響，結(jié)果見圖2。

圖2 不同型號羥丙基甲基纖維素的釋放曲線

釋放結(jié)果顯現(xiàn)，隨著羥丙基甲基纖維素的粘度增加，非洛地平的釋放速率減慢，當選用K4M時，釋藥速度最為合適，各時間點的釋放度符合制定的標準。因此，選用羥丙基甲基纖維素K4M 為非洛地平緩釋片的骨架材料。

1.3.2.3不同用量的羥丙基甲基纖維素K4M對釋放的影響 以羥丙基甲基纖維素K4M為骨架材料，分別考察其處方量為15、20、25 mg時的藥物釋放度，結(jié)果顯示用量25 mg最為合適，見圖3。

圖3 不同用量羥丙基甲基纖維素的釋放曲線

1.3.2.4稀釋劑對釋放的影響 在親水凝膠骨架片的制備過程中，常常需要加入一定量的稀釋劑借以調(diào)節(jié)釋藥速率和便于壓片[7]。固定骨架材料羥丙基甲基纖維素K4M處方量25 mg，在常用的幾個稀釋劑中，選用水不溶性的微晶纖維素和水溶性的乳糖，考察其單獨使用和聯(lián)合使用對釋放的影響。篩選了3個處方，分別為單獨使用微晶纖維素、乳糖69 mg，微晶纖維素64 mg加乳糖5 mg的聯(lián)合使用，結(jié)果當微晶纖維素和乳糖聯(lián)合使用時，藥物釋放速率符合制定標準，見圖4。

圖4 不同稀釋劑的釋放曲線

同時在處方中加入1%的硬脂酸鎂作為潤滑劑。

1.3.3制備工藝對釋放的影響

1.3.3.1粘合劑與潤濕劑的影響 按處方量1萬片投料，以5%PVP k30為粘合劑，濕法制粒時發(fā)現(xiàn)，物料黏度大，不宜成形也無法過篩，故采用適當潤濕劑制備軟材。我們分別以純水，70%和80%濃度的乙醇溶液400 g為潤濕劑，高速攪拌切削40 s制粒制備非洛地平緩釋片，考察各自的釋放度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著乙醇濃度的增加，釋放加快。具體結(jié)果見圖5。

圖5 不同濃度潤濕劑的釋放曲線

70%濃度的乙醇液對非洛地平緩釋片的初期，即0～6 h的釋放有較大影響，釋放數(shù)值在制定標準的下限，因此采用80%乙醇液作為潤濕劑制備軟材。

1.3.3.2潤濕劑用量的影響 按處方量1萬片投料，以80%乙醇液為潤濕劑，分別加入200、400、600 g高速攪拌切削40 s制粒制備非洛地平緩釋片，考察潤濕劑用量對釋放度的影響，在制備中發(fā)現(xiàn)乙醇液用量越多，制出的顆粒越硬，釋放也越慢，結(jié)果見圖6。

圖6 不同用量乙醇的釋放曲線

1.3.3.3壓力的影響 一般情況下，只要壓力能保證骨架片在整個釋藥過程中形狀完整，在一定范圍內(nèi)不會明顯影響釋藥速率。有研究表明[3]，當壓力較小時，緩釋片骨架不夠牢固，前期釋藥速度明顯變快，而壓力增大到一定程度后，骨架變緊密，孔隙率明顯變小從而使累積釋藥量不符合質(zhì)量要求。所以我們需要考察壓力對非洛地平緩釋片釋放的影響。

按處方量1萬片投料，加入400 g 80%乙醇液高速攪拌切削40 s制粒，加入潤滑劑后壓片，調(diào)節(jié)壓片機壓力，分別壓制硬度為30、40、50、70 N的非洛地平緩釋片，測定各自的釋放度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)當緩釋片硬度小于30 N時，釋放度有較明顯的增快；當硬度在40、50、70 N時，釋放曲線相似，無明顯變化。考慮到片劑的硬度要求以及包衣步驟對片芯硬度的需要，所以在壓制該緩釋片時，片劑硬度控制在50 N左右。結(jié)果見圖7。

圖7 不同壓力的釋放曲線

1.4制備處方、工藝與四條pH釋放度比對

1.4.1非洛地平緩釋片制備處方

表1 非洛地平緩釋片處方組成與含量

1.4.2制備工藝

步驟1：將非洛地平原料，羥丙基甲基纖維素 K4M，微晶纖維素和乳糖分別過篩70目。

步驟2：稱取1萬片處方量的非洛地平原料，羥丙基甲基纖維素 K4M，微晶纖維素和乳糖于快速攪拌制粒機中混合均勻，加入80%乙醇液400 g，高速攪拌切削40 s，過20目制粒。

步驟3：50 ℃鼓風(fēng)干燥烘干。

步驟4：20目整粒，加入處方量的硬脂酸鎂混合均勻。

步驟5：6 mm淺圓弧形沖壓片，硬度控制在50～70 N。

1.4.3四條pH釋放度比對 按照日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗指導(dǎo)》，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進行與原研波依定?的釋放比較，并使用相似因子法f2來評價其差異程度。結(jié)果4條曲線與波依定?的f2因子均大于50，體外釋放相似。具體見表2,3。

表2 非洛地平緩釋片與波依定水中釋放數(shù)據(jù)f2的比較

表3 非洛地平緩釋片與波依定在不同pH、時間點釋放數(shù)據(jù)及f2的比較

2 結(jié)論

我們通過體外釋放度試驗比較了4種骨架材料，結(jié)果羥丙基甲基纖維素(HPMC)表現(xiàn)出良好的溶出特性曲線，這種親水性凝膠骨架材料應(yīng)用較廣，性質(zhì)穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好；也比較了HPMC的3種不同黏度型號以及用量，3種不同稀釋劑的影響來確定最終的處方。處方組成為：非洛地平、HPMC K4M、微晶纖維素、乳糖和硬脂酸鎂。工藝采用濕法制粒法，對非洛地平及輔料進行制粒、壓片。我們對工藝參數(shù)進行了考察，最后確定當乙醇溶液濃度為80%，用量為400 g，制粒時間為40 s，壓片硬度在50～70 N時，所得的非洛地平緩釋片的釋放度與原研制劑最接近。

按照日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗指導(dǎo)》，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進行了與波依定?的釋放比較，并使用相似因子法f2來評價其差異程度。結(jié)果4條曲線與波依定?的f2因子均大于50，體外釋放相似。

[1] 陳新謙，金有豫，湯 光. 新編藥物學(xué)[M]. 第15版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003. 324～383.

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2010-04-28

[修回日期] 2010-09-19

Studyofpreparationandreleaserateoffelodipinesustainedreleasetablet

ZHU Yu-qiu1,2, GUO Shen-rong1

(1.School of Pharmacy, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240，China; 2.Shanghai Ethypharm Pharmaceutical Company Ltd., Shanghai 201702，China)

ObjectiveTo prepare felodipine sustained release tablet and evaluate the similitude of release rate with original preparation.MethodsMatrix technology was used. felodipine sustained release tablet was prepared through studying the influence of matrix material sorts, viscosity, quantity, fillers and process. The similitude of release rateof SR tablet were evaluated in 4 kinds of pH media with original preparation.ResultsThe release rate of felodipine sustained release tablet which was prepared by HPMC as matrix material ,applied by wet granulation with alcohol content of 80% and granulation time of 40 sec, was similar to original preparation with the hardness between 50～70 N. F2functions of release rate in 4 kinds of pH media were all exceed 50.ConclusionsRelease rate of felodipine sustained release tablet prepared was similar to original preparation.

felodipine; sustained release tablet; HPMC; release rate; f2function

朱雨秋(1976-)，女，碩士.Tel：(021)59898898,E-mail:zhu.yuqiu@ethypharm.com.cn.

R944.9

A

1006-0111(2011)02-0101-05