• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    7種小球藻氨基酸組成及多元性分析

    2011-10-18 04:17:10魏文志付立霞陳國宏
    食品科學(xué) 2011年5期
    關(guān)鍵詞:小球藻貢獻(xiàn)率海水

    魏文志,付立霞,陳國宏*

    (揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)

    7種小球藻氨基酸組成及多元性分析

    魏文志,付立霞,陳國宏*

    (揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)

    測定7種小球藻(普通小球藻(C.vul)、自養(yǎng)小球藻(C.aut)、海水小球藻(C.spp.)、微小小球藻(C.min)、蛋白核小球藻(C.pyr)、原始小球藻(C.pro)、橢圓核小球藻(C.ell))氨基酸的組成,對其營養(yǎng)進(jìn)行評(píng)價(jià),并利用多元分析法對7種小球藻的氨基酸含量差異進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示:7種小球藻氨基酸種類齊全,必需氨基酸占氨基酸總量的比例分別達(dá)到35.86%、39.75%、37.58%、36.35%、38.05%、37.98%、40.28%。必需氨基酸指數(shù)分別為66.63、79.41、67.96、71.17、57.69、70.02、65.39。聚類分析與主成分分析表明4種海水藻氨基酸含量可以聚為一類,3種淡水藻氨基酸含量可以聚為一類,主成分分析構(gòu)建了3個(gè)主成分,其貢獻(xiàn)率:主成分1為73.727%,主成分2為10.021%,主成分3為7.052%,累積貢獻(xiàn)率為90.80%。

    小球藻;氨基酸;多元分析

    小球藻(Chlorella)為綠藻門(Chlorophyta)的一類普生性單細(xì)胞藻。小球藻能利用光能自養(yǎng),適應(yīng)于不同的生長環(huán)境,因此易于培養(yǎng),可快速繁殖和生長,是地球上動(dòng)植物中唯一能在20h增長4倍的生物[1]。同時(shí)小球藻營養(yǎng)豐富,具有抗腫瘤、抗細(xì)菌、抗病毒、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、降血壓和降血脂等多種作用[2],因此受到廣泛的關(guān)注,它與螺旋藻、鹽藻、柵藻等微藻的開發(fā)利用一起構(gòu)成了微藻生物技術(shù)(microalgae biotechology),具有廣闊的發(fā)展前景[3]。

    目前國內(nèi)外對小球藻的研究主要包括培養(yǎng)條件、生理作用、分子生物學(xué)、應(yīng)用等幾個(gè)方面[4],而對不同種小球藻氨基酸差異性分析的研究尚未見報(bào)道。氨基酸是構(gòu)成機(jī)體蛋白質(zhì)的基本單位,食物中的氨基酸含量是決定蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值的重要因素。本實(shí)驗(yàn)對7種小球藻氨基酸組成和含量進(jìn)行比較分析,同時(shí)以聚類分析和主成分分析兩種多元分析方法,對7種小球藻的氨基酸含量進(jìn)行綜合分析,旨在為小球藻的營養(yǎng)評(píng)價(jià)、親緣關(guān)系和分類提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    7種小球藻的名稱和來源見表1。

    表1 小球藻的名稱、來源Table 1 Names and providers of 7 types of Chlorella

    1.2 儀器與設(shè)備

    FD-5型真空冷凍干燥機(jī) 上海離心機(jī)械研究所;HP1100型氨基酸分析儀 美國Agilent公司。

    1.3 方法

    1.3.1 小球藻的培養(yǎng)

    4 種海水小球藻(C.vul、C.aut、C.spp.、C.min)采用f/2培養(yǎng)基[5],淡水藻(C.pyr、C.pro)采用水生4號(hào)培養(yǎng)基[6],淡水藻(C.ell)采用MAV培養(yǎng)基[7]。培養(yǎng)在光生物反應(yīng)器中進(jìn)行,培養(yǎng)溫度為26℃,光照度為3000lx,光暗周期為13L:11D(光照13h,黑暗11h)。達(dá)到對數(shù)生長期時(shí)取樣,離心機(jī)離心得新鮮藻泥,蒸餾水沖洗3次,冷凍干燥,得藻粉。

    1.3.2 粗蛋白的測定

    采用凱氏定氮法[8]測定,蛋白質(zhì)含量以干質(zhì)量計(jì)。

    1.3.3 氨基酸含量的測定

    稱取蛋白質(zhì)樣品置于水解管中,加入 6mol/L 的HC1溶液,真空封口,在110℃水解24h,冷卻后定容、過濾、蒸干,再加入 0.02mol/L的HC1溶液在空氣中放置30min,氨基酸分析儀測定17種氨基酸的含量。用質(zhì)量濃度10g/100mL的氫氧化鉀水解,測定色氨酸含量。氨基酸含量以干質(zhì)量計(jì)。

    1.3.4 營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)

    小球藻營養(yǎng)價(jià)值采用必需氨基酸指數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)[9]。

    式中:A、B、C…I為小球藻必需氨基酸含量/%;AE、BE、CE…IE為全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量/%。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,對7個(gè)種的小球藻進(jìn)行聚類分析、主成分分析,研究種間氨基酸差異。

    1.4.1 聚類分析

    根據(jù)所得7個(gè)種小球藻氨基酸的種類和含量,構(gòu)建SPSS數(shù)據(jù)文件。采用的聚類方法為歐式距離(euclidean distance)的最短系統(tǒng)聚類法(nearest neighbor)進(jìn)行樣品聚類,用樹形圖顯示種間的親疏程度[10]。

    1.4.2 主成分分析

    通過軟件分析,從所有氨基酸指標(biāo)中得出3個(gè)綜合性指標(biāo),即3個(gè)主成分,計(jì)算機(jī)軟件分析輸出主成分1、主成分2、主成分3的貢獻(xiàn)率和三者的累積貢獻(xiàn)率,顯示各主成分的負(fù)荷因子即貢獻(xiàn)率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 7種小球藻藻粉的蛋白質(zhì)含量

    表2 7種小球藻的蛋白質(zhì)含量Table 2 Contents of proteins in 7 types of Chlorella (g/100 g dry weight)

    從表2可以看出,7種小球藻蛋白質(zhì)含量有明顯的差別,最低的C.vul為30.58g/100g,最高的C.pyr為53.79g/100g。4種海水種類的小球藻蛋白質(zhì)含量低于淡水種類。

    2.2 氨基酸組成

    表3 不同種小球藻氨基酸組成及含量Table 3 Amino acid composition of 7 types of Chlorella

    由表3可知,7種小球藻均含有18種氨基酸,包括人體所需的8種必需氨基酸,各種氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高低順序基本相似,都是以亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、甘氨酸等較高,而甲硫氨酸、色氨酸和半胱氨酸含量較低。必需氨基酸的含量較高,占氨基酸總量的比例分別達(dá)到35.86%、39.75%、37.58%、36.35%、38.05%、37.98%、40.28%,均接近世界衛(wèi)生組織(WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)提出的TEAA/TAA約為40%[11]。

    2.3 必需氨基酸指數(shù)評(píng)價(jià)

    通過計(jì)算小球藻必需氨基酸占粗蛋白質(zhì)的含量,與全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸的含量進(jìn)行比較,得出7種小球藻必需氨基酸指數(shù),見表4。

    表4 7種小球藻必需氨基酸組成評(píng)價(jià)Table 4 Evaluation of EAA composition of 7 types of Chlorella (mg/g crude protein)

    由表4可以看出,7種小球藻蛋白質(zhì)的必需氨基酸指數(shù)有差異,最高的C.aut為79.41,依次為C.min、C.pro、C.spp.、C.vul、C.ell,最低的 C.pyr為 57.69。

    2.4 聚類分析

    通過對7種小球藻氨基酸含量進(jìn)行聚類分析,得到氨基酸含量聚類圖(圖1)。結(jié)果表明,總體上4種海水藻可以聚為一類,3種淡水藻可以聚為一類。說明海水藻和淡水藻中的氨基酸含量存在差異。海水藻中,C.vul和 C.min氨基酸含量最為接近,然后依次為C.aut和C.spp.。淡水藻中,C.pyr與C.pro氨基酸含量接近,然后是 C.ell。

    圖1 7種小球藻聚類分析樹形圖Fig.1 Hierarchical cluster analysis dendrogram for 7 types of Chlorella

    2.5 主成分分析

    表5 主成分負(fù)荷因子及其貢獻(xiàn)率Table 5 Loading factors and contribution rates of three principal components from 7 types of Chlorella

    由表5可知,總方差的貢獻(xiàn)率分別為:主成分1為73.727%,主成分2為10.021%,主成分3 為7.052%,累積貢獻(xiàn)率為90.80%。3個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率高,說明用幾個(gè)相互獨(dú)立的因子可以概括不同種間的差異。結(jié)合圖2,可以更直觀的看出,主成分1包括Leu、Thr、Asp、Ser、Val、Gly、Lys、Tyr、His、Ala、Ile等負(fù)荷因子,主成分2包括Trp、Met等負(fù)荷因子,主成分3包括Cys等負(fù)荷因子。

    圖2 主成分因子負(fù)荷散點(diǎn)圖Fig.2 Scatter diagram for the loading factors of principal components

    3 討 論

    小球藻具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和保健功效,蛋白質(zhì)含量高是其中的原因之一。本實(shí)驗(yàn)中各種小球藻蛋白質(zhì)含量差異較大,特別是4種海水藻類低于3種淡水藻類。已有報(bào)道[12],我國常見的種類有蛋白核小球藻(C. pyr)、橢圓小球藻(C.ell)和普通小球藻(C.vul),其中蛋白核小球藻中的蛋白質(zhì)含量最高。本實(shí)驗(yàn)中,蛋白核小球藻(C.pyr)的蛋白質(zhì)含量也是最高的。除了不同種小球藻本身的蛋白質(zhì)代謝差異外,培養(yǎng)液中營養(yǎng)鹽成分對小球藻蛋白質(zhì)的含量有影響[13],特別是培養(yǎng)液中氮源對微藻蛋白質(zhì)的質(zhì)和量有直接的影響[14],本實(shí)驗(yàn)中不同的配方培養(yǎng)不同種的小球藻,可能也是不同種類小球藻蛋白質(zhì)含量差異的原因。

    蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值體現(xiàn)在氨基酸組成與含量,特別是必需氨基酸的組成與含量,7種小球藻含有8種人體必需氨基酸,而且必需氨基酸的含量較高,占氨基酸總量的比例均接近世界衛(wèi)生組織(WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)提出的TEAA/TAA約為40%,說明7種小球藻的營養(yǎng)價(jià)值較高。

    必需氨基酸指數(shù)(EAAI)用于評(píng)價(jià)食物蛋白質(zhì)的質(zhì)量,EAAI越接近100,食物蛋白與標(biāo)準(zhǔn)蛋白的必需氨基酸組成越接近,營養(yǎng)價(jià)值越高[15]。7種氨基酸中,營養(yǎng)價(jià)值相對較高的為C.aut、C.min和C.pro。

    聚類分析可將不同種群進(jìn)行初步歸類,量化種群間的差異程度,分析種群間的相似程度。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示4種海水藻可聚為一類,3種淡水藻可聚為一類,與它們蛋白質(zhì)含量上的差異相類似。海水藻和淡水藻在氨基酸含量上的差異首先應(yīng)該是二者自身遺傳物質(zhì)的差異決定的,同時(shí)朱松玲等[16]也報(bào)道,鹽度對微藻氨基酸含量有直接的影響。小球藻為單細(xì)胞生物,直接與水體進(jìn)行物質(zhì)代謝和能量交換,海水藻為在海水的培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)基中含有較多的氯化鈉等離子成分,可能影響了小球藻的物質(zhì)代謝,從而影響了氨基酸含量。

    主成分分析是將多個(gè)氨基酸含量綜合成少數(shù)幾個(gè)因子,從而得出不同種類的差異大小,并可根據(jù)不同種類的主成分值找出各種類在各主成分值上差異較大的參數(shù)。小球藻氨基酸主成分分析結(jié)果顯示7種小球藻氨基酸差異的3個(gè)累計(jì)貢獻(xiàn)率為90.80%。根據(jù)主成分分析所得的各個(gè)負(fù)荷因子的相應(yīng)貢獻(xiàn)率所作的散點(diǎn)圖顯示,Leu、Thr、Asp、Ser、Val、Gly、Lys、Tyr、His、Ala、Ile 等負(fù)荷因子對各種類小球藻氨基酸差異分析影響較大,可以作為類似研究的分析指標(biāo),主成分分析方法使不同種類小球藻氨基酸差異分析更為簡單。但不同種類小球藻氨基酸含量差異的原因,有待于進(jìn)一步深入研究。

    [1] YAMAGUCHI K. Recent advance in microalgal bioscience in Japan,with special reference to utilization of biomass and metabolites: a review[J]. Journal of Applied Phycology, 1997, 8(6): 487-502.

    [2] 孔維寶, 李龍囡, 張繼, 等. 小球藻的營養(yǎng)保健功能及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(9): 323-328.

    [3] 陳穎, 李文彬, 孫勇如. 小球藻生物技術(shù)研究應(yīng)用現(xiàn)狀及展望[J]. 生物工程進(jìn)展, 1998, 18(6): 12-16.

    [4] 胡開輝, 汪世華. 小球藻的研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),2005, 24(3): 27-30.

    [5] 梁英. 海水生物餌料培養(yǎng)技術(shù)[M]. 青島: 中國海洋大學(xué)出版社, 1998:47-48.

    [6] 成永旭. 生物餌料培養(yǎng)學(xué)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2005: 81.

    [7] 蔣霞敏, 柳敏海, 沈芝葉. 溫度、光照與鹽度對雨生紅球藻誘變株蝦青素累積的調(diào)控[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2005, 12(6): 714-718.

    [8] 黃偉坤. 食品檢驗(yàn)與分析[M]. 北京: 中國輕工業(yè)出版社, 1993: 49-51.

    [9] 邴旭文, 蔡寶玉, 王利平. 中華倒刺鲃肌肉營養(yǎng)成分與品質(zhì)評(píng)價(jià)[J].中國水產(chǎn)科學(xué), 2005, 12(2): 211-215.

    [10] 余建英, 何旭宏. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析與SPSS應(yīng)用[M]. 北京: 人民郵電出版社, 2003: 253-256; 292-298.

    [11] PELLETT P L, YONG V R. Nutritional evaluation of protein foods[M].Tokyo: The United National University Publishing Company, 1980:26-29.

    [12] 李師翁, 李虎乾. 植物單細(xì)胞蛋白資源: 小球藻開發(fā)利用研究的現(xiàn)狀[J]. 生物技術(shù), 1997, 7(3): 45-48.

    [13] 于媛, 劉艷, 楊海波, 等. 營養(yǎng)鹽對小球藻生長及胞內(nèi)蛋白質(zhì)含量的影響[J]. 大連大學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 23(6): 12-16.

    [14] 黃旭雄, 周洪琪, 袁燦東, 等. 氮源及濃度對微綠球藻營養(yǎng)價(jià)值的影響[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 12(2): 113-116.

    [15] 姜萍萍, 韓燁, 顧賽紅, 等. 五種食用菌氨基酸含量的測定及營養(yǎng)評(píng)價(jià)[J]. 氨基酸和生物資源, 2009, 31(2): 67-71.

    [16] 朱松玲, 王怡潔. 鹽度變化對杜氏鹽藻的游離氨基酸和脂肪酸含量的影響[J]. 海洋科學(xué), 2005, 29(3): 8-11.

    Multivariate Analysis of Amino Acid Composition of 7 Types of Chlorella

    WEI Wen-zhi,F(xiàn)U Li-xia,CHEN Guo-hong*(College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

    Multivariate analysis was conducted to evaluate the amino acid composition and nutritional values of 7 types of Chlorella including Chlorella vulgaris, Chlorella autotrophica, Chlorella minutissim, Chlorella spp., Chlorella pyrenoidosa,Chlorella protothecoides and Chlorella ellipsoidea. The results showed all kinds of amino acids were detected in the 7 types of Chlorella. The ratios between essential amino acids and total amino acids were 35.86%, 39.75%, 37.58%, 36.35%, 38.05%,37.98% and 40.28%, and the essential amino acid indexes were 66.63, 79.41, 67.96, 71.17, 57.69, 70.02 and 65.39 in Chlorella vulgaris, Chlorella autotrophica, Chlorella minutissim, Chlorella spp., Chlorella pyrenoidosa, Chlorella protothecoides and Chlorella ellipsoidea, respectively. Cluster analysis and principal component analysis indicated that Chlorella cultured in seawater-based medium and freshwater-based medium could be classified as two different types according to the contents of amino acids. Three principal components were analyzed to reveal a contribution rate of 73.727% for the first principal component, 10.021% for the second principal component and 7.052% for the third principal component, respectively. The cumulative contribution rate of three principal components was 90.80%.

    Chlorella;amino acid;multivariate analysis

    Q517

    A

    1002-6630(2011)05-0254-04

    2010-06-30

    魏文志(1970—),男,副教授,博士,研究方向?yàn)樯镳D料與生態(tài)。E-mail:wzwei38@sohu.com

    *通信作者:陳國宏(1963—),男,教授,博士,研究方向?yàn)檫z傳資源評(píng)價(jià)與利用。E-mail:ghchen@yzu.edu.cn

    猜你喜歡
    小球藻貢獻(xiàn)率海水
    海水為什么不能喝?
    一種通用的裝備體系貢獻(xiàn)率評(píng)估框架
    喝多少杯海水能把人“渴死”?
    關(guān)于裝備體系貢獻(xiàn)率研究的幾點(diǎn)思考
    海水為什么不能喝?
    正負(fù)極互換式小球藻光合微生物燃料電池性能
    В первой половине 2016 года вклад потребления в рост китайской экономики достиг 73,4 процента
    中亞信息(2016年10期)2016-02-13 02:32:45
    不同溶劑萃取小球藻油脂結(jié)構(gòu)及組分差異
    雙溶劑體系提取小球藻油脂的研究
    異養(yǎng)小球藻的篩選鑒定及其特性研究
    精品免费久久久久久久清纯| 午夜爱爱视频在线播放| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲中文字幕日韩| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 深夜a级毛片| 久久久精品94久久精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产免费又黄又爽又色| 日韩人妻高清精品专区| 一级毛片电影观看 | 久久人妻av系列| 黄色配什么色好看| 久久这里只有精品中国| 亚洲美女搞黄在线观看| 中文资源天堂在线| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 亚洲av一区综合| 精品人妻熟女av久视频| 日韩一区二区视频免费看| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 免费观看精品视频网站| 天堂中文最新版在线下载 | 成年女人看的毛片在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 最后的刺客免费高清国语| 日本三级黄在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 一个人免费在线观看电影| 久久99热6这里只有精品| 久久久欧美国产精品| 22中文网久久字幕| 麻豆国产97在线/欧美| 日本一二三区视频观看| 国产单亲对白刺激| av线在线观看网站| av专区在线播放| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 日韩一区二区视频免费看| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 我要搜黄色片| 国产一级毛片在线| 欧美最新免费一区二区三区| 久久久久久久久久黄片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产探花在线观看一区二区| av在线蜜桃| 长腿黑丝高跟| 久久精品国产亚洲网站| 欧美+日韩+精品| 国产 一区精品| 超碰av人人做人人爽久久| 国产精品一二三区在线看| 尾随美女入室| 欧美日韩精品成人综合77777| av视频在线观看入口| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 亚洲av免费在线观看| 欧美激情在线99| 国产淫片久久久久久久久| 最近中文字幕高清免费大全6| 一个人观看的视频www高清免费观看| 日韩av在线大香蕉| 一区二区三区四区激情视频| 免费观看人在逋| 高清av免费在线| 精品久久国产蜜桃| 免费搜索国产男女视频| 偷拍熟女少妇极品色| 69人妻影院| 性色avwww在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久久国产网址| 边亲边吃奶的免费视频| 久久亚洲精品不卡| 午夜精品一区二区三区免费看| 少妇的逼水好多| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 插逼视频在线观看| 日本与韩国留学比较| 床上黄色一级片| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 晚上一个人看的免费电影| 午夜视频国产福利| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 一级黄片播放器| av线在线观看网站| 中国美白少妇内射xxxbb| 日本-黄色视频高清免费观看| 26uuu在线亚洲综合色| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 成人二区视频| 午夜视频国产福利| 国产成人精品久久久久久| 国产精品一及| 99国产精品一区二区蜜桃av| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产精品,欧美在线| 亚洲av熟女| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲国产精品合色在线| 日韩精品青青久久久久久| 热99在线观看视频| 日本wwww免费看| 久久精品影院6| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲成人久久爱视频| 在线播放国产精品三级| 九草在线视频观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产成人免费观看mmmm| 欧美激情在线99| 成年免费大片在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 18+在线观看网站| 亚洲电影在线观看av| 亚洲av成人精品一二三区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 好男人在线观看高清免费视频| 99热这里只有精品一区| 少妇的逼水好多| 欧美一区二区精品小视频在线| 色综合亚洲欧美另类图片| 日本av手机在线免费观看| 久久精品夜色国产| 中文字幕久久专区| av天堂中文字幕网| 五月伊人婷婷丁香| 一个人免费在线观看电影| 人妻系列 视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| av.在线天堂| 亚洲综合色惰| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品蜜桃在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 99久久精品热视频| 国产免费视频播放在线视频 | 亚洲图色成人| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 在线免费观看不下载黄p国产| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲成色77777| 村上凉子中文字幕在线| 我要看日韩黄色一级片| 99热6这里只有精品| 国产欧美日韩精品一区二区| .国产精品久久| av免费观看日本| av在线天堂中文字幕| 99在线视频只有这里精品首页| 国产久久久一区二区三区| 欧美人与善性xxx| 日韩人妻高清精品专区| 日韩欧美三级三区| 午夜老司机福利剧场| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲av二区三区四区| 亚洲成人精品中文字幕电影| a级毛片免费高清观看在线播放| 2021少妇久久久久久久久久久| 免费黄网站久久成人精品| 日韩欧美在线乱码| 欧美区成人在线视频| 精品久久久久久电影网 | 99久久精品一区二区三区| 欧美三级亚洲精品| 七月丁香在线播放| 国产免费视频播放在线视频 | 国产av一区在线观看免费| www.av在线官网国产| 又爽又黄a免费视频| 久久久久久久国产电影| 国产伦一二天堂av在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 春色校园在线视频观看| 老司机福利观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 高清av免费在线| av女优亚洲男人天堂| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 国产午夜精品一二区理论片| 两个人的视频大全免费| 亚洲自偷自拍三级| 成人性生交大片免费视频hd| 在线播放国产精品三级| 老司机影院毛片| 亚洲怡红院男人天堂| 成人午夜高清在线视频| 久热久热在线精品观看| 高清视频免费观看一区二区 | 免费观看a级毛片全部| 国产精品女同一区二区软件| 久久久久性生活片| 18+在线观看网站| 一区二区三区高清视频在线| 精品一区二区免费观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲不卡免费看| 网址你懂的国产日韩在线| 五月伊人婷婷丁香| 91久久精品国产一区二区成人| 国产淫片久久久久久久久| 欧美丝袜亚洲另类| 直男gayav资源| h日本视频在线播放| 搡女人真爽免费视频火全软件| av视频在线观看入口| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲国产精品合色在线| 最新中文字幕久久久久| 一夜夜www| 色视频www国产| 国产成人freesex在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 天天躁日日操中文字幕| 观看免费一级毛片| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲内射少妇av| 久久久久性生活片| 一个人看的www免费观看视频| 99久久精品热视频| 插阴视频在线观看视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成人av在线免费| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费看av在线观看网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲怡红院男人天堂| 国产在视频线精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 又粗又爽又猛毛片免费看| 综合色av麻豆| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲无线观看免费| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲高清免费不卡视频| 国产精品久久电影中文字幕| 伦精品一区二区三区| 美女大奶头视频| 久久99热这里只频精品6学生 | 久久久久免费精品人妻一区二区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 床上黄色一级片| 在线免费十八禁| 午夜视频国产福利| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久久久久国产a免费观看| 插阴视频在线观看视频| 国产成人a区在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 91久久精品国产一区二区三区| 久99久视频精品免费| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产极品天堂在线| 免费观看人在逋| 欧美成人精品欧美一级黄| 白带黄色成豆腐渣| eeuss影院久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 欧美一区二区国产精品久久精品| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 高清视频免费观看一区二区 | 国产不卡一卡二| 免费搜索国产男女视频| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲中文字幕日韩| 国产精品一区二区三区四区久久| 能在线免费观看的黄片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产极品天堂在线| av在线播放精品| 日韩欧美国产在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 丰满乱子伦码专区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 我的女老师完整版在线观看| 成人无遮挡网站| 亚洲av成人精品一区久久| 国产三级中文精品| 一个人免费在线观看电影| 久久精品国产亚洲av天美| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产黄片视频在线免费观看| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲电影在线观看av| 有码 亚洲区| 99热这里只有是精品在线观看| 黄色配什么色好看| 高清日韩中文字幕在线| 成人av在线播放网站| 免费av观看视频| 日韩中字成人| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产久久久一区二区三区| 亚洲第一区二区三区不卡| 国国产精品蜜臀av免费| 日本黄色片子视频| 亚洲国产精品合色在线| 成人国产麻豆网| 午夜福利视频1000在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲精品456在线播放app| 三级经典国产精品| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产乱来视频区| 91狼人影院| 最新中文字幕久久久久| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日韩av不卡免费在线播放| 两个人视频免费观看高清| 亚洲天堂国产精品一区在线| 边亲边吃奶的免费视频| 中文字幕熟女人妻在线| 中文字幕免费在线视频6| 身体一侧抽搐| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产精品99久久久久久久久| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲最大成人手机在线| 免费一级毛片在线播放高清视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲精品影视一区二区三区av| 欧美一级a爱片免费观看看| 日日啪夜夜撸| 一个人观看的视频www高清免费观看| 一级爰片在线观看| 亚洲欧美精品专区久久| 一级毛片我不卡| 97超碰精品成人国产| 亚洲怡红院男人天堂| 国产真实乱freesex| 天天一区二区日本电影三级| 久久这里只有精品中国| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲性久久影院| 亚洲av男天堂| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲色图av天堂| 变态另类丝袜制服| 一级av片app| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 精品久久久久久久久久久久久| 午夜福利高清视频| 视频中文字幕在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久99热这里只频精品6学生 | 欧美日本视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产精品一区二区三区四区免费观看| 日日撸夜夜添| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 日韩国内少妇激情av| 亚洲av福利一区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 在现免费观看毛片| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久久久久久大av| 桃色一区二区三区在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 精品久久久久久久久av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 身体一侧抽搐| 观看美女的网站| 最近最新中文字幕大全电影3| 日本五十路高清| 午夜福利在线观看吧| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲四区av| 日本熟妇午夜| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 高清视频免费观看一区二区 | 97在线视频观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产三级中文精品| 久久午夜福利片| 国产午夜精品一二区理论片| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久久久网色| 少妇高潮的动态图| 国国产精品蜜臀av免费| 日本三级黄在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 一级毛片我不卡| 国产午夜精品论理片| 日韩欧美三级三区| 婷婷色av中文字幕| 人妻夜夜爽99麻豆av| av视频在线观看入口| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲怡红院男人天堂| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 午夜亚洲福利在线播放| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产三级在线视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 看免费成人av毛片| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲五月天丁香| 欧美高清成人免费视频www| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 成人漫画全彩无遮挡| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久久久精品久久久久真实原创| 韩国av在线不卡| 日本-黄色视频高清免费观看| 观看美女的网站| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲怡红院男人天堂| 干丝袜人妻中文字幕| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产精品.久久久| 18禁在线播放成人免费| 欧美高清性xxxxhd video| 午夜福利高清视频| 成人无遮挡网站| 伊人久久精品亚洲午夜| 长腿黑丝高跟| 欧美另类亚洲清纯唯美| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲欧美清纯卡通| 女人久久www免费人成看片 | 联通29元200g的流量卡| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产精品99久久久久久久久| 七月丁香在线播放| 超碰97精品在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 日韩欧美精品免费久久| 尤物成人国产欧美一区二区三区| www.av在线官网国产| 久久久精品欧美日韩精品| 日韩视频在线欧美| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产91av在线免费观看| 村上凉子中文字幕在线| 午夜爱爱视频在线播放| 精品不卡国产一区二区三区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 爱豆传媒免费全集在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 国产一区二区三区av在线| 人妻少妇偷人精品九色| 成人亚洲欧美一区二区av| 成人午夜高清在线视频| 99久久精品一区二区三区| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲欧美精品综合久久99| 两个人的视频大全免费| 丰满少妇做爰视频| 国产伦在线观看视频一区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久99热这里只有精品18| 一级av片app| 日本五十路高清| 欧美xxxx性猛交bbbb| 三级国产精品欧美在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 不卡视频在线观看欧美| 嫩草影院精品99| 成人午夜精彩视频在线观看| www.色视频.com| 欧美极品一区二区三区四区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲最大成人手机在线| 欧美最新免费一区二区三区| av在线天堂中文字幕| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲自偷自拍三级| 国产乱人偷精品视频| 成人国产麻豆网| 99热这里只有是精品在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 99热这里只有是精品50| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产在视频线精品| 国产精品.久久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲,欧美,日韩| 视频中文字幕在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| or卡值多少钱| 午夜免费男女啪啪视频观看| 一边亲一边摸免费视频| 国产在视频线在精品| 精品久久久久久久久亚洲| 亚洲国产欧美在线一区| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久久久久久久久成人| 最近视频中文字幕2019在线8| 观看免费一级毛片| 日日撸夜夜添| 国产乱人偷精品视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲人成网站在线播| 男女下面进入的视频免费午夜| 女人被狂操c到高潮| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久精品夜色国产| 日韩av不卡免费在线播放| 久久久久性生活片| 国产极品天堂在线| 国产乱来视频区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 热99re8久久精品国产| 波多野结衣高清无吗| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产老妇女一区| 禁无遮挡网站| 精品一区二区三区人妻视频| 一本一本综合久久| 国产极品精品免费视频能看的| 最近手机中文字幕大全| 国产毛片a区久久久久| 一区二区三区四区激情视频| 成年版毛片免费区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 看十八女毛片水多多多| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲成人av在线免费| 亚洲综合精品二区| 1000部很黄的大片| 国产麻豆成人av免费视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 人妻少妇偷人精品九色| 国产乱人视频| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 中文字幕av在线有码专区| 最近视频中文字幕2019在线8| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产黄片美女视频| 亚洲综合精品二区| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品一区www在线观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 免费在线观看成人毛片| 欧美日本亚洲视频在线播放| 特大巨黑吊av在线直播| 国产一区二区在线观看日韩| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产免费又黄又爽又色| 高清av免费在线| 看片在线看免费视频| 国产视频首页在线观看| 亚洲性久久影院| 毛片一级片免费看久久久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产久久久一区二区三区| av免费在线看不卡| 国产欧美日韩精品一区二区| 99九九线精品视频在线观看视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 网址你懂的国产日韩在线| 国模一区二区三区四区视频| 大话2 男鬼变身卡| 热99re8久久精品国产| 国产一区二区三区av在线| 高清毛片免费看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 联通29元200g的流量卡| 国产精品精品国产色婷婷| 精品酒店卫生间| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲欧美日韩东京热| 日日干狠狠操夜夜爽| .国产精品久久| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩精品青青久久久久久| 99久国产av精品| 色吧在线观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 18禁在线播放成人免费|