• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    7種小球藻氨基酸組成及多元性分析

    2011-10-18 04:17:10魏文志付立霞陳國宏
    食品科學(xué) 2011年5期
    關(guān)鍵詞:小球藻貢獻(xiàn)率海水

    魏文志,付立霞,陳國宏*

    (揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)

    7種小球藻氨基酸組成及多元性分析

    魏文志,付立霞,陳國宏*

    (揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)

    測定7種小球藻(普通小球藻(C.vul)、自養(yǎng)小球藻(C.aut)、海水小球藻(C.spp.)、微小小球藻(C.min)、蛋白核小球藻(C.pyr)、原始小球藻(C.pro)、橢圓核小球藻(C.ell))氨基酸的組成,對其營養(yǎng)進(jìn)行評(píng)價(jià),并利用多元分析法對7種小球藻的氨基酸含量差異進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示:7種小球藻氨基酸種類齊全,必需氨基酸占氨基酸總量的比例分別達(dá)到35.86%、39.75%、37.58%、36.35%、38.05%、37.98%、40.28%。必需氨基酸指數(shù)分別為66.63、79.41、67.96、71.17、57.69、70.02、65.39。聚類分析與主成分分析表明4種海水藻氨基酸含量可以聚為一類,3種淡水藻氨基酸含量可以聚為一類,主成分分析構(gòu)建了3個(gè)主成分,其貢獻(xiàn)率:主成分1為73.727%,主成分2為10.021%,主成分3為7.052%,累積貢獻(xiàn)率為90.80%。

    小球藻;氨基酸;多元分析

    小球藻(Chlorella)為綠藻門(Chlorophyta)的一類普生性單細(xì)胞藻。小球藻能利用光能自養(yǎng),適應(yīng)于不同的生長環(huán)境,因此易于培養(yǎng),可快速繁殖和生長,是地球上動(dòng)植物中唯一能在20h增長4倍的生物[1]。同時(shí)小球藻營養(yǎng)豐富,具有抗腫瘤、抗細(xì)菌、抗病毒、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、降血壓和降血脂等多種作用[2],因此受到廣泛的關(guān)注,它與螺旋藻、鹽藻、柵藻等微藻的開發(fā)利用一起構(gòu)成了微藻生物技術(shù)(microalgae biotechology),具有廣闊的發(fā)展前景[3]。

    目前國內(nèi)外對小球藻的研究主要包括培養(yǎng)條件、生理作用、分子生物學(xué)、應(yīng)用等幾個(gè)方面[4],而對不同種小球藻氨基酸差異性分析的研究尚未見報(bào)道。氨基酸是構(gòu)成機(jī)體蛋白質(zhì)的基本單位,食物中的氨基酸含量是決定蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值的重要因素。本實(shí)驗(yàn)對7種小球藻氨基酸組成和含量進(jìn)行比較分析,同時(shí)以聚類分析和主成分分析兩種多元分析方法,對7種小球藻的氨基酸含量進(jìn)行綜合分析,旨在為小球藻的營養(yǎng)評(píng)價(jià)、親緣關(guān)系和分類提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    7種小球藻的名稱和來源見表1。

    表1 小球藻的名稱、來源Table 1 Names and providers of 7 types of Chlorella

    1.2 儀器與設(shè)備

    FD-5型真空冷凍干燥機(jī) 上海離心機(jī)械研究所;HP1100型氨基酸分析儀 美國Agilent公司。

    1.3 方法

    1.3.1 小球藻的培養(yǎng)

    4 種海水小球藻(C.vul、C.aut、C.spp.、C.min)采用f/2培養(yǎng)基[5],淡水藻(C.pyr、C.pro)采用水生4號(hào)培養(yǎng)基[6],淡水藻(C.ell)采用MAV培養(yǎng)基[7]。培養(yǎng)在光生物反應(yīng)器中進(jìn)行,培養(yǎng)溫度為26℃,光照度為3000lx,光暗周期為13L:11D(光照13h,黑暗11h)。達(dá)到對數(shù)生長期時(shí)取樣,離心機(jī)離心得新鮮藻泥,蒸餾水沖洗3次,冷凍干燥,得藻粉。

    1.3.2 粗蛋白的測定

    采用凱氏定氮法[8]測定,蛋白質(zhì)含量以干質(zhì)量計(jì)。

    1.3.3 氨基酸含量的測定

    稱取蛋白質(zhì)樣品置于水解管中,加入 6mol/L 的HC1溶液,真空封口,在110℃水解24h,冷卻后定容、過濾、蒸干,再加入 0.02mol/L的HC1溶液在空氣中放置30min,氨基酸分析儀測定17種氨基酸的含量。用質(zhì)量濃度10g/100mL的氫氧化鉀水解,測定色氨酸含量。氨基酸含量以干質(zhì)量計(jì)。

    1.3.4 營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)

    小球藻營養(yǎng)價(jià)值采用必需氨基酸指數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)[9]。

    式中:A、B、C…I為小球藻必需氨基酸含量/%;AE、BE、CE…IE為全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量/%。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,對7個(gè)種的小球藻進(jìn)行聚類分析、主成分分析,研究種間氨基酸差異。

    1.4.1 聚類分析

    根據(jù)所得7個(gè)種小球藻氨基酸的種類和含量,構(gòu)建SPSS數(shù)據(jù)文件。采用的聚類方法為歐式距離(euclidean distance)的最短系統(tǒng)聚類法(nearest neighbor)進(jìn)行樣品聚類,用樹形圖顯示種間的親疏程度[10]。

    1.4.2 主成分分析

    通過軟件分析,從所有氨基酸指標(biāo)中得出3個(gè)綜合性指標(biāo),即3個(gè)主成分,計(jì)算機(jī)軟件分析輸出主成分1、主成分2、主成分3的貢獻(xiàn)率和三者的累積貢獻(xiàn)率,顯示各主成分的負(fù)荷因子即貢獻(xiàn)率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 7種小球藻藻粉的蛋白質(zhì)含量

    表2 7種小球藻的蛋白質(zhì)含量Table 2 Contents of proteins in 7 types of Chlorella (g/100 g dry weight)

    從表2可以看出,7種小球藻蛋白質(zhì)含量有明顯的差別,最低的C.vul為30.58g/100g,最高的C.pyr為53.79g/100g。4種海水種類的小球藻蛋白質(zhì)含量低于淡水種類。

    2.2 氨基酸組成

    表3 不同種小球藻氨基酸組成及含量Table 3 Amino acid composition of 7 types of Chlorella

    由表3可知,7種小球藻均含有18種氨基酸,包括人體所需的8種必需氨基酸,各種氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高低順序基本相似,都是以亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、甘氨酸等較高,而甲硫氨酸、色氨酸和半胱氨酸含量較低。必需氨基酸的含量較高,占氨基酸總量的比例分別達(dá)到35.86%、39.75%、37.58%、36.35%、38.05%、37.98%、40.28%,均接近世界衛(wèi)生組織(WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)提出的TEAA/TAA約為40%[11]。

    2.3 必需氨基酸指數(shù)評(píng)價(jià)

    通過計(jì)算小球藻必需氨基酸占粗蛋白質(zhì)的含量,與全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸的含量進(jìn)行比較,得出7種小球藻必需氨基酸指數(shù),見表4。

    表4 7種小球藻必需氨基酸組成評(píng)價(jià)Table 4 Evaluation of EAA composition of 7 types of Chlorella (mg/g crude protein)

    由表4可以看出,7種小球藻蛋白質(zhì)的必需氨基酸指數(shù)有差異,最高的C.aut為79.41,依次為C.min、C.pro、C.spp.、C.vul、C.ell,最低的 C.pyr為 57.69。

    2.4 聚類分析

    通過對7種小球藻氨基酸含量進(jìn)行聚類分析,得到氨基酸含量聚類圖(圖1)。結(jié)果表明,總體上4種海水藻可以聚為一類,3種淡水藻可以聚為一類。說明海水藻和淡水藻中的氨基酸含量存在差異。海水藻中,C.vul和 C.min氨基酸含量最為接近,然后依次為C.aut和C.spp.。淡水藻中,C.pyr與C.pro氨基酸含量接近,然后是 C.ell。

    圖1 7種小球藻聚類分析樹形圖Fig.1 Hierarchical cluster analysis dendrogram for 7 types of Chlorella

    2.5 主成分分析

    表5 主成分負(fù)荷因子及其貢獻(xiàn)率Table 5 Loading factors and contribution rates of three principal components from 7 types of Chlorella

    由表5可知,總方差的貢獻(xiàn)率分別為:主成分1為73.727%,主成分2為10.021%,主成分3 為7.052%,累積貢獻(xiàn)率為90.80%。3個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率高,說明用幾個(gè)相互獨(dú)立的因子可以概括不同種間的差異。結(jié)合圖2,可以更直觀的看出,主成分1包括Leu、Thr、Asp、Ser、Val、Gly、Lys、Tyr、His、Ala、Ile等負(fù)荷因子,主成分2包括Trp、Met等負(fù)荷因子,主成分3包括Cys等負(fù)荷因子。

    圖2 主成分因子負(fù)荷散點(diǎn)圖Fig.2 Scatter diagram for the loading factors of principal components

    3 討 論

    小球藻具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和保健功效,蛋白質(zhì)含量高是其中的原因之一。本實(shí)驗(yàn)中各種小球藻蛋白質(zhì)含量差異較大,特別是4種海水藻類低于3種淡水藻類。已有報(bào)道[12],我國常見的種類有蛋白核小球藻(C. pyr)、橢圓小球藻(C.ell)和普通小球藻(C.vul),其中蛋白核小球藻中的蛋白質(zhì)含量最高。本實(shí)驗(yàn)中,蛋白核小球藻(C.pyr)的蛋白質(zhì)含量也是最高的。除了不同種小球藻本身的蛋白質(zhì)代謝差異外,培養(yǎng)液中營養(yǎng)鹽成分對小球藻蛋白質(zhì)的含量有影響[13],特別是培養(yǎng)液中氮源對微藻蛋白質(zhì)的質(zhì)和量有直接的影響[14],本實(shí)驗(yàn)中不同的配方培養(yǎng)不同種的小球藻,可能也是不同種類小球藻蛋白質(zhì)含量差異的原因。

    蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值體現(xiàn)在氨基酸組成與含量,特別是必需氨基酸的組成與含量,7種小球藻含有8種人體必需氨基酸,而且必需氨基酸的含量較高,占氨基酸總量的比例均接近世界衛(wèi)生組織(WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)提出的TEAA/TAA約為40%,說明7種小球藻的營養(yǎng)價(jià)值較高。

    必需氨基酸指數(shù)(EAAI)用于評(píng)價(jià)食物蛋白質(zhì)的質(zhì)量,EAAI越接近100,食物蛋白與標(biāo)準(zhǔn)蛋白的必需氨基酸組成越接近,營養(yǎng)價(jià)值越高[15]。7種氨基酸中,營養(yǎng)價(jià)值相對較高的為C.aut、C.min和C.pro。

    聚類分析可將不同種群進(jìn)行初步歸類,量化種群間的差異程度,分析種群間的相似程度。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示4種海水藻可聚為一類,3種淡水藻可聚為一類,與它們蛋白質(zhì)含量上的差異相類似。海水藻和淡水藻在氨基酸含量上的差異首先應(yīng)該是二者自身遺傳物質(zhì)的差異決定的,同時(shí)朱松玲等[16]也報(bào)道,鹽度對微藻氨基酸含量有直接的影響。小球藻為單細(xì)胞生物,直接與水體進(jìn)行物質(zhì)代謝和能量交換,海水藻為在海水的培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)基中含有較多的氯化鈉等離子成分,可能影響了小球藻的物質(zhì)代謝,從而影響了氨基酸含量。

    主成分分析是將多個(gè)氨基酸含量綜合成少數(shù)幾個(gè)因子,從而得出不同種類的差異大小,并可根據(jù)不同種類的主成分值找出各種類在各主成分值上差異較大的參數(shù)。小球藻氨基酸主成分分析結(jié)果顯示7種小球藻氨基酸差異的3個(gè)累計(jì)貢獻(xiàn)率為90.80%。根據(jù)主成分分析所得的各個(gè)負(fù)荷因子的相應(yīng)貢獻(xiàn)率所作的散點(diǎn)圖顯示,Leu、Thr、Asp、Ser、Val、Gly、Lys、Tyr、His、Ala、Ile 等負(fù)荷因子對各種類小球藻氨基酸差異分析影響較大,可以作為類似研究的分析指標(biāo),主成分分析方法使不同種類小球藻氨基酸差異分析更為簡單。但不同種類小球藻氨基酸含量差異的原因,有待于進(jìn)一步深入研究。

    [1] YAMAGUCHI K. Recent advance in microalgal bioscience in Japan,with special reference to utilization of biomass and metabolites: a review[J]. Journal of Applied Phycology, 1997, 8(6): 487-502.

    [2] 孔維寶, 李龍囡, 張繼, 等. 小球藻的營養(yǎng)保健功能及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(9): 323-328.

    [3] 陳穎, 李文彬, 孫勇如. 小球藻生物技術(shù)研究應(yīng)用現(xiàn)狀及展望[J]. 生物工程進(jìn)展, 1998, 18(6): 12-16.

    [4] 胡開輝, 汪世華. 小球藻的研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),2005, 24(3): 27-30.

    [5] 梁英. 海水生物餌料培養(yǎng)技術(shù)[M]. 青島: 中國海洋大學(xué)出版社, 1998:47-48.

    [6] 成永旭. 生物餌料培養(yǎng)學(xué)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2005: 81.

    [7] 蔣霞敏, 柳敏海, 沈芝葉. 溫度、光照與鹽度對雨生紅球藻誘變株蝦青素累積的調(diào)控[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2005, 12(6): 714-718.

    [8] 黃偉坤. 食品檢驗(yàn)與分析[M]. 北京: 中國輕工業(yè)出版社, 1993: 49-51.

    [9] 邴旭文, 蔡寶玉, 王利平. 中華倒刺鲃肌肉營養(yǎng)成分與品質(zhì)評(píng)價(jià)[J].中國水產(chǎn)科學(xué), 2005, 12(2): 211-215.

    [10] 余建英, 何旭宏. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析與SPSS應(yīng)用[M]. 北京: 人民郵電出版社, 2003: 253-256; 292-298.

    [11] PELLETT P L, YONG V R. Nutritional evaluation of protein foods[M].Tokyo: The United National University Publishing Company, 1980:26-29.

    [12] 李師翁, 李虎乾. 植物單細(xì)胞蛋白資源: 小球藻開發(fā)利用研究的現(xiàn)狀[J]. 生物技術(shù), 1997, 7(3): 45-48.

    [13] 于媛, 劉艷, 楊海波, 等. 營養(yǎng)鹽對小球藻生長及胞內(nèi)蛋白質(zhì)含量的影響[J]. 大連大學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 23(6): 12-16.

    [14] 黃旭雄, 周洪琪, 袁燦東, 等. 氮源及濃度對微綠球藻營養(yǎng)價(jià)值的影響[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 12(2): 113-116.

    [15] 姜萍萍, 韓燁, 顧賽紅, 等. 五種食用菌氨基酸含量的測定及營養(yǎng)評(píng)價(jià)[J]. 氨基酸和生物資源, 2009, 31(2): 67-71.

    [16] 朱松玲, 王怡潔. 鹽度變化對杜氏鹽藻的游離氨基酸和脂肪酸含量的影響[J]. 海洋科學(xué), 2005, 29(3): 8-11.

    Multivariate Analysis of Amino Acid Composition of 7 Types of Chlorella

    WEI Wen-zhi,F(xiàn)U Li-xia,CHEN Guo-hong*(College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

    Multivariate analysis was conducted to evaluate the amino acid composition and nutritional values of 7 types of Chlorella including Chlorella vulgaris, Chlorella autotrophica, Chlorella minutissim, Chlorella spp., Chlorella pyrenoidosa,Chlorella protothecoides and Chlorella ellipsoidea. The results showed all kinds of amino acids were detected in the 7 types of Chlorella. The ratios between essential amino acids and total amino acids were 35.86%, 39.75%, 37.58%, 36.35%, 38.05%,37.98% and 40.28%, and the essential amino acid indexes were 66.63, 79.41, 67.96, 71.17, 57.69, 70.02 and 65.39 in Chlorella vulgaris, Chlorella autotrophica, Chlorella minutissim, Chlorella spp., Chlorella pyrenoidosa, Chlorella protothecoides and Chlorella ellipsoidea, respectively. Cluster analysis and principal component analysis indicated that Chlorella cultured in seawater-based medium and freshwater-based medium could be classified as two different types according to the contents of amino acids. Three principal components were analyzed to reveal a contribution rate of 73.727% for the first principal component, 10.021% for the second principal component and 7.052% for the third principal component, respectively. The cumulative contribution rate of three principal components was 90.80%.

    Chlorella;amino acid;multivariate analysis

    Q517

    A

    1002-6630(2011)05-0254-04

    2010-06-30

    魏文志(1970—),男,副教授,博士,研究方向?yàn)樯镳D料與生態(tài)。E-mail:wzwei38@sohu.com

    *通信作者:陳國宏(1963—),男,教授,博士,研究方向?yàn)檫z傳資源評(píng)價(jià)與利用。E-mail:ghchen@yzu.edu.cn

    猜你喜歡
    小球藻貢獻(xiàn)率海水
    海水為什么不能喝?
    一種通用的裝備體系貢獻(xiàn)率評(píng)估框架
    喝多少杯海水能把人“渴死”?
    關(guān)于裝備體系貢獻(xiàn)率研究的幾點(diǎn)思考
    海水為什么不能喝?
    正負(fù)極互換式小球藻光合微生物燃料電池性能
    В первой половине 2016 года вклад потребления в рост китайской экономики достиг 73,4 процента
    中亞信息(2016年10期)2016-02-13 02:32:45
    不同溶劑萃取小球藻油脂結(jié)構(gòu)及組分差異
    雙溶劑體系提取小球藻油脂的研究
    異養(yǎng)小球藻的篩選鑒定及其特性研究
    丰满少妇做爰视频| 午夜免费鲁丝| 国产福利在线免费观看视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 香蕉丝袜av| 国产在线观看jvid| 高清欧美精品videossex| 欧美xxⅹ黑人| 国产av一区二区精品久久| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产麻豆69| 国产av精品麻豆| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲精品国产av成人精品| xxx大片免费视频| 亚洲av国产av综合av卡| 免费在线观看完整版高清| 婷婷色av中文字幕| 丝袜美足系列| 在线av久久热| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美黑人精品巨大| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲av成人精品一二三区| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 九色亚洲精品在线播放| 搡老乐熟女国产| 亚洲av成人精品一二三区| 国产免费福利视频在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 在线观看www视频免费| 久久 成人 亚洲| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 蜜桃在线观看..| 黄色 视频免费看| 91精品国产国语对白视频| 七月丁香在线播放| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 久久天堂一区二区三区四区| 成人国产一区最新在线观看 | 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 91精品国产国语对白视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产成人精品无人区| 好男人电影高清在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲成色77777| 日韩视频在线欧美| 国产亚洲av高清不卡| 99国产精品99久久久久| 大码成人一级视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产精品九九99| 在线观看一区二区三区激情| 久久久久网色| 黄片播放在线免费| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 日本wwww免费看| 天天操日日干夜夜撸| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 中文字幕亚洲精品专区| 又黄又粗又硬又大视频| 中文字幕最新亚洲高清| 免费在线观看黄色视频的| 久久99一区二区三区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲国产精品国产精品| 九色亚洲精品在线播放| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 伦理电影免费视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 伊人亚洲综合成人网| 女性生殖器流出的白浆| 国产又爽黄色视频| 国产精品久久久久久精品古装| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 精品久久蜜臀av无| 免费观看a级毛片全部| 叶爱在线成人免费视频播放| av欧美777| 亚洲图色成人| 亚洲专区国产一区二区| 啦啦啦在线免费观看视频4| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品一国产av| 欧美激情高清一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 波多野结衣一区麻豆| 久久久久久久久久久久大奶| 黄色视频不卡| 青春草视频在线免费观看| www.自偷自拍.com| 九色亚洲精品在线播放| 国产99久久九九免费精品| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲天堂av无毛| 日韩一本色道免费dvd| 老司机影院毛片| 亚洲视频免费观看视频| 在线观看人妻少妇| 热re99久久精品国产66热6| 国产在视频线精品| 免费在线观看日本一区| 国产激情久久老熟女| 日本一区二区免费在线视频| 国产成人影院久久av| 中文字幕人妻丝袜制服| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| 999精品在线视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲国产精品一区三区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美精品一区二区大全| 80岁老熟妇乱子伦牲交| av在线老鸭窝| 91字幕亚洲| 性色av一级| 欧美精品亚洲一区二区| 超碰成人久久| 大片免费播放器 马上看| 久久青草综合色| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 首页视频小说图片口味搜索 | 五月天丁香电影| 午夜91福利影院| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 一级毛片电影观看| 777米奇影视久久| 视频区图区小说| 99香蕉大伊视频| 国产黄色免费在线视频| 永久免费av网站大全| 亚洲欧美精品自产自拍| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲视频免费观看视频| 人妻 亚洲 视频| 丁香六月天网| 18禁观看日本| 国产精品久久久久久精品古装| 国产精品99久久99久久久不卡| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲国产最新在线播放| 国产成人a∨麻豆精品| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产高清国产精品国产三级| 午夜久久久在线观看| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产欧美亚洲国产| 亚洲久久久国产精品| 亚洲,欧美,日韩| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲成人国产一区在线观看 | 国产97色在线日韩免费| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 天天添夜夜摸| 久久鲁丝午夜福利片| 精品人妻在线不人妻| 日韩欧美一区视频在线观看| 少妇精品久久久久久久| 在线观看一区二区三区激情| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 午夜福利视频在线观看免费| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲图色成人| videos熟女内射| 精品亚洲成国产av| 男女午夜视频在线观看| av在线app专区| 日本五十路高清| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲国产精品国产精品| 无遮挡黄片免费观看| 视频在线观看一区二区三区| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲av日韩在线播放| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产成人精品久久久久久| 日本五十路高清| 国产爽快片一区二区三区| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 999久久久国产精品视频| 飞空精品影院首页| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲av综合色区一区| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久久久久人人人人人| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 妹子高潮喷水视频| 蜜桃国产av成人99| 纯流量卡能插随身wifi吗| 啦啦啦在线免费观看视频4| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产成人a∨麻豆精品| 丝袜美足系列| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| a 毛片基地| 超碰97精品在线观看| av电影中文网址| 中文字幕精品免费在线观看视频| 日本欧美国产在线视频| 曰老女人黄片| 韩国高清视频一区二区三区| 另类精品久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产深夜福利视频在线观看| 99国产精品免费福利视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 女人久久www免费人成看片| 色网站视频免费| 国产三级黄色录像| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 中文字幕人妻丝袜制服| 男女免费视频国产| 免费观看人在逋| 天天添夜夜摸| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲中文字幕日韩| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 男男h啪啪无遮挡| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产精品一区二区精品视频观看| 在线观看www视频免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 一本综合久久免费| 久久久久国产精品人妻一区二区| 超碰97精品在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 精品一区二区三卡| 午夜福利,免费看| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 亚洲成人免费电影在线观看 | 日韩av不卡免费在线播放| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 久久中文字幕一级| 亚洲黑人精品在线| 国产一区二区三区av在线| 日韩制服骚丝袜av| 成人三级做爰电影| 午夜免费鲁丝| 咕卡用的链子| 狂野欧美激情性bbbbbb| 三上悠亚av全集在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 蜜桃在线观看..| 夫妻性生交免费视频一级片| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 制服人妻中文乱码| 久久精品国产综合久久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 午夜视频精品福利| avwww免费| 国产成人精品无人区| 亚洲免费av在线视频| 一本久久精品| 日韩电影二区| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 亚洲国产精品成人久久小说| 妹子高潮喷水视频| 亚洲伊人色综图| 久久天堂一区二区三区四区| 国产高清不卡午夜福利| 十八禁人妻一区二区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 午夜激情久久久久久久| 午夜免费鲁丝| 无限看片的www在线观看| 亚洲精品在线美女| 免费少妇av软件| 日本黄色日本黄色录像| 国产成人精品久久久久久| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久久久网色| videos熟女内射| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 中文字幕人妻丝袜制服| 免费观看a级毛片全部| 国产精品免费大片| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品一区二区精品视频观看| 好男人电影高清在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 男女无遮挡免费网站观看| av视频免费观看在线观看| 久热这里只有精品99| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲免费av在线视频| 我要看黄色一级片免费的| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产黄色免费在线视频| 首页视频小说图片口味搜索 | 搡老岳熟女国产| 黄色一级大片看看| 一级,二级,三级黄色视频| 最新在线观看一区二区三区 | 黄色视频在线播放观看不卡| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲久久久国产精品| 电影成人av| e午夜精品久久久久久久| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲一区中文字幕在线| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 高清视频免费观看一区二区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 黄频高清免费视频| 亚洲人成电影免费在线| 欧美精品av麻豆av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 999久久久国产精品视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 电影成人av| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 啦啦啦 在线观看视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产在视频线精品| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 99re6热这里在线精品视频| 中国美女看黄片| 大码成人一级视频| 欧美日韩av久久| 黄色视频不卡| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产高清视频在线播放一区 | av国产久精品久网站免费入址| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久精品区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 高清视频免费观看一区二区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 午夜福利视频精品| 国产日韩欧美视频二区| 一区福利在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 免费观看a级毛片全部| 人人澡人人妻人| 一级黄色大片毛片| 日本91视频免费播放| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲欧洲国产日韩| av天堂久久9| 秋霞在线观看毛片| 青春草视频在线免费观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 黄色片一级片一级黄色片| 久久99热这里只频精品6学生| 国产精品免费视频内射| 国产av一区二区精品久久| 男女下面插进去视频免费观看| 一区二区av电影网| 91精品国产国语对白视频| 美女视频免费永久观看网站| 国产av一区二区精品久久| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 午夜久久久在线观看| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲第一av免费看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 爱豆传媒免费全集在线观看| 精品国产国语对白av| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲久久久国产精品| 大香蕉久久成人网| 亚洲欧洲日产国产| 午夜两性在线视频| 欧美97在线视频| 欧美日韩综合久久久久久| 国产成人免费观看mmmm| 午夜91福利影院| 999精品在线视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 午夜av观看不卡| 多毛熟女@视频| 日韩一区二区三区影片| av欧美777| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲一区中文字幕在线| 国产在线观看jvid| 欧美精品一区二区大全| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲av成人精品一二三区| 婷婷色综合www| 亚洲av在线观看美女高潮| 大香蕉久久网| 桃花免费在线播放| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产高清视频在线播放一区 | 日韩视频在线欧美| 国产精品av久久久久免费| 国产成人91sexporn| 亚洲精品日本国产第一区| 丁香六月天网| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产高清videossex| 狂野欧美激情性bbbbbb| 免费在线观看完整版高清| 亚洲熟女精品中文字幕| 一级毛片女人18水好多 | 欧美在线一区亚洲| 中文字幕最新亚洲高清| 另类精品久久| 午夜福利,免费看| 99久久精品国产亚洲精品| 咕卡用的链子| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品三级大全| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 看免费成人av毛片| 日韩伦理黄色片| 99国产精品一区二区三区| 亚洲精品一二三| 久久久国产一区二区| 精品亚洲成a人片在线观看| 99香蕉大伊视频| 一区二区三区激情视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日韩制服骚丝袜av| 国产精品久久久久久精品电影小说| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品一区二区免费欧美 | 久久人人97超碰香蕉20202| 九草在线视频观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久久欧美国产精品| 午夜老司机福利片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久毛片免费看一区二区三区| 69精品国产乱码久久久| 国产成人a∨麻豆精品| 18禁国产床啪视频网站| 夫妻午夜视频| 亚洲第一av免费看| 精品久久蜜臀av无| 老熟女久久久| 亚洲av日韩在线播放| 免费在线观看日本一区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 男女下面插进去视频免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 飞空精品影院首页| 一级片免费观看大全| 中国国产av一级| av在线app专区| 男女边摸边吃奶| 黄色a级毛片大全视频| 日韩视频在线欧美| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲成人手机| 日韩欧美一区视频在线观看| 久久性视频一级片| 在线 av 中文字幕| 黄片小视频在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产日韩欧美视频二区| 国产免费现黄频在线看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久免费观看电影| 一级毛片女人18水好多 | 国产精品国产三级专区第一集| 久久99热这里只频精品6学生| 国产真人三级小视频在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲成人国产一区在线观看 | 国产亚洲一区二区精品| 色94色欧美一区二区| 男女国产视频网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 美女大奶头黄色视频| 美国免费a级毛片| 久久毛片免费看一区二区三区| 日本a在线网址| 亚洲国产精品一区三区| 免费黄频网站在线观看国产| 午夜av观看不卡| 亚洲一区中文字幕在线| 九草在线视频观看| 午夜激情久久久久久久| 91字幕亚洲| 大香蕉久久成人网| 丰满少妇做爰视频| 九草在线视频观看| 成人三级做爰电影| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲国产欧美一区二区综合| 午夜日韩欧美国产| 亚洲成人国产一区在线观看 | 国产亚洲av高清不卡| 看免费成人av毛片| 欧美中文综合在线视频| 99久久人妻综合| 免费看十八禁软件| 在线 av 中文字幕| 欧美激情极品国产一区二区三区| 中国国产av一级| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产色视频综合| 国产精品熟女久久久久浪| 国产欧美亚洲国产| 中文字幕最新亚洲高清| 国产野战对白在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 嫁个100分男人电影在线观看 | 91精品三级在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 纯流量卡能插随身wifi吗| 中文欧美无线码| 亚洲精品日本国产第一区| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久久久久久久免费视频了| 两个人免费观看高清视频| 操美女的视频在线观看| 婷婷色av中文字幕| 日韩大码丰满熟妇| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 丝袜美腿诱惑在线| 色视频在线一区二区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 狂野欧美激情性xxxx| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 91国产中文字幕| 亚洲五月色婷婷综合| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 高清不卡的av网站| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产精品免费大片| 精品国产一区二区三区四区第35| 视频区图区小说| 久久久久久久国产电影| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 久久精品久久久久久久性| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 一本一本久久a久久精品综合妖精| 午夜激情久久久久久久| 搡老岳熟女国产| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 99久久人妻综合| 制服诱惑二区| 亚洲av综合色区一区| 日韩人妻精品一区2区三区| 狂野欧美激情性bbbbbb| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 婷婷色综合www| 成人亚洲精品一区在线观看| 美女福利国产在线| 高清视频免费观看一区二区| 丰满迷人的少妇在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 91字幕亚洲| 日本午夜av视频| 久久久久久人人人人人| 中文欧美无线码| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 大香蕉久久成人网| 在线观看www视频免费| 日韩av不卡免费在线播放| 一级黄片播放器| 视频在线观看一区二区三区| a级毛片黄视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲人成77777在线视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 国产成人a∨麻豆精品| 黄色视频不卡| 国产99久久九九免费精品| 午夜福利,免费看| 精品一区二区三区av网在线观看 | 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产精品一二三区在线看| 国产黄频视频在线观看| 一级黄片播放器|