• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    部分稀土元素對(duì)靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)液體發(fā)酵的影響

    2011-10-18 04:17:14高興喜宮志遠(yuǎn)任鵬飛仇可新
    食品科學(xué) 2011年5期
    關(guān)鍵詞:三萜類(lèi)胞內(nèi)胞外

    姚 強(qiáng),高興喜*,宮志遠(yuǎn),任鵬飛,仇可新,劉 巖

    (1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所,山東 濟(jì)南 250100;2.魯東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264025;3.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東 青島 266109)

    部分稀土元素對(duì)靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)液體發(fā)酵的影響

    姚 強(qiáng)1,高興喜2,*,宮志遠(yuǎn)1,任鵬飛1,仇可新2,劉 巖3

    (1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所,山東 濟(jì)南 250100;2.魯東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264025;3.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東 青島 266109)

    研究5種稀土元素(鑭(La)、鈰(Ce)、釹(Nd)、鐠(Pr)、鉺(Er))對(duì)靈芝液體發(fā)酵生產(chǎn)靈芝多糖產(chǎn)量和靈芝三萜類(lèi)物質(zhì)的影響。結(jié)果表明:不同的稀土元素在適宜濃度時(shí)對(duì)靈芝多糖和靈芝三萜的產(chǎn)量均具有一定程度的促進(jìn)作用。其中稀土元素鐠對(duì)靈芝胞內(nèi)多糖、胞外多糖和胞內(nèi)三萜的生產(chǎn)促進(jìn)作用最明顯,分別在濃度為0.01、0.001mmol/L和0.1mmol/L時(shí),使三者產(chǎn)量分別達(dá)到最高的772.56、452.76mg/L和398.49mg/L,分別是對(duì)照的4.67、3.05和1.91倍;而對(duì)于胞外三萜,0.001mmol/L的鑭誘導(dǎo)效果最好,其產(chǎn)量達(dá)到610.08mg/L,是對(duì)照的2.03倍??梢?jiàn)適宜的稀土元素及濃度可顯著提高靈芝多糖和靈芝三萜的生產(chǎn)。

    稀土元素;靈芝;多糖;三萜

    靈芝(Ganoderma lucidum Karst)古稱(chēng)瑞草,是一種名貴的藥用真菌,至今已有2000多年的藥用歷史。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,靈芝具有免疫調(diào)節(jié)[1]、抗腫瘤[2-3]、保肝護(hù)肝[4]、抗病毒[5]等多種功效,其藥理活性與其關(guān)鍵藥效成分靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)密切相關(guān)[6-7]。采用液體發(fā)酵的方法獲取靈芝有效成分具有很好的工業(yè)化應(yīng)用前景,然而產(chǎn)量偏低成為主要限制因素[8]。因此,如何有效提高靈芝等食藥用菌活性物質(zhì)的產(chǎn)量一直是人們研究的熱點(diǎn)。

    稀土元素是化學(xué)元素周期表中鑭系元素及兩個(gè)相關(guān)元素鈧和釔的總稱(chēng),具有廣泛的生物學(xué)功能,能夠促進(jìn)植物的生長(zhǎng)以及細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物的合成[9-10]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),稀土元素還能夠促進(jìn)蒙古口蘑[11]、杏鮑菇[12]、靈芝[13]等食用菌的菌絲生長(zhǎng),對(duì)紅菇多糖深層發(fā)酵也具有一定的促進(jìn)作用[14]。另外,在靈芝的栽培生產(chǎn)中,向培養(yǎng)料中添加稀土微肥還能夠顯著提高靈芝的產(chǎn)量[15]和品質(zhì)[16]。目前,關(guān)于稀土元素對(duì)靈芝活性成分液體發(fā)酵影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道,本研究根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)[9-10,13-14],選擇對(duì)植物或食用菌細(xì)胞生長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物合成具有明顯促進(jìn)作用的5種稀土元素(硝酸鑭、硝酸鈰、硝酸釹、硝酸鐠和硝酸鉺),分別考察它們(La、Ce、Nd、Pr、Er)對(duì)靈芝多糖和三萜類(lèi)物液體發(fā)酵的影響。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    靈芝菌株Gl-01為昆崳山野生菌株,由魯東大學(xué)食用菌工程技術(shù)研究中心保存。

    稀土元素硝酸鑭、硝酸鈰、硝酸釹、硝酸鐠、硝酸鉺 天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;香蘭素 上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司;齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品 煙臺(tái)市藥品檢驗(yàn)所;其他試劑均為分析純。

    1.2 方法

    1.2.1 菌株活化與發(fā)酵培養(yǎng)

    將靈芝斜面菌種在PDA平板上活化,25℃培養(yǎng)7d左右,待長(zhǎng)滿(mǎn)平板后,用打孔器打取菌塊接種于200mL PDB培養(yǎng)基,于25℃、150r/min振蕩培養(yǎng)5~7d,制備液體菌種用于下一步發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。

    分別配制含有各稀土元素濃度梯度為0、0.001、0.01、0.1mmol/L的PDB培養(yǎng)基(500mL三角瓶裝液量200mL),每個(gè)濃度進(jìn)行3個(gè)重復(fù),高壓蒸汽滅菌。然后按體積分?jǐn)?shù)5%的接種量將靈芝種子液接入各培養(yǎng)基中,置于25℃、150r/min的搖床中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間為7d左右。

    1.2.2 靈芝生物量測(cè)定

    發(fā)酵結(jié)束后收集菌體,并用去離子水洗滌菌體3次,65℃烘干至恒定質(zhì)量后測(cè)量干質(zhì)量。

    1.2.3 靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)含量測(cè)定

    [17]方法進(jìn)行。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 稀土元素對(duì)靈芝生物量的影響

    圖1 稀土元素對(duì)靈芝生物量的影響Fig.1 Effects of rare earth elements on biomass of Ganoderma lucidum

    如圖1所示,5種稀土元素對(duì)靈芝生物量體現(xiàn)出不同的影響,其中稀土元素鈰(Ce)和釹(Nd)在不同測(cè)定濃度時(shí)都具有較明顯的促進(jìn)作用,且在0.01mmol/L時(shí),促進(jìn)效果最明顯,與對(duì)照組相比分別提高了19.8%和19.6%;而稀土元素鐠(Pr)只有在較高濃度時(shí)促進(jìn)效果才顯著,在濃度為0.1mmol/L時(shí),比對(duì)照組提高了36.9%。稀土元素鉺(Er)和鑭(La)對(duì)靈芝生物量的作用不明顯。

    2.2 稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)多糖生產(chǎn)的影響

    圖2 稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)多糖產(chǎn)量的影響Fig.2 Effects of rare earth elements on IPS production

    由圖2可知,稀土元素鐠對(duì)靈芝胞內(nèi)多糖(intracellular polysaccharide,IPS)的產(chǎn)量促進(jìn)效果最顯著,當(dāng)鐠在濃度為0.01mmol/L時(shí),胞內(nèi)多糖產(chǎn)量達(dá)到772.56mg/L,與對(duì)照組相比提高了4.67倍;其次是稀土元素釹,在濃度0.1mmol/L時(shí),胞內(nèi)多糖產(chǎn)量達(dá)到514.12mg/L,是對(duì)照組的3.10倍。其他稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)多糖生產(chǎn)促進(jìn)作用不顯著。

    2.3 稀土元素對(duì)靈芝胞外多糖生產(chǎn)的影響

    5種稀土元素除鉺之外,其他幾種在適宜濃度都能促進(jìn)靈芝胞外多糖(extracellular polysaccharide,EPS)的生產(chǎn),結(jié)果如圖3所示。其中稀土元素鐠促進(jìn)效果最顯著,當(dāng)鐠在濃度0.001mmol/L時(shí),靈芝胞外多糖產(chǎn)量為452.76mg/L,是對(duì)照組的3.05倍;其次,稀土元素釹對(duì)靈芝胞外多糖生產(chǎn)促進(jìn)效果最好,在濃度為0.01mmol/L時(shí),產(chǎn)量達(dá)到355.74mmol/L,是對(duì)照組的2.40倍;稀土元素鈰在濃度為0.001mmol/L時(shí)也具有較好的促進(jìn)作用;而稀土元素鑭和鉺作用效果不顯著,甚至出現(xiàn)高濃度抑制現(xiàn)象。

    圖3 稀土元素對(duì)靈芝胞外多糖產(chǎn)量的影響Fig.3 Effects of rare earth elements on EPS production

    2.4 稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)三萜生產(chǎn)的影響

    圖4 不同稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)三萜產(chǎn)量的影響Fig.4 Effects of rare earth elements on IGT production

    稀土元素對(duì)靈芝胞內(nèi)三萜(intracellular triterpenoid,IGT)產(chǎn)量的影響因稀土元素的種類(lèi)和濃度呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì),如圖4所示。其中稀土元素釹、鈰、鐠和鑭對(duì)靈芝胞內(nèi)三萜的生產(chǎn)表現(xiàn)為促進(jìn)作用,特別是稀土元素釹、鐠和鑭,促進(jìn)作用顯著,其中釹在濃度為0.001mmol/L,鑭和鐠在濃度為0.1mmol/L時(shí),胞內(nèi)三萜的產(chǎn)量分別達(dá)到341.05、347.59mg/L和398.49mg/L,分別為對(duì)照的1.64倍、1.67倍和1.91倍。而稀土元素鉺對(duì)靈芝胞內(nèi)三萜的生產(chǎn)不但沒(méi)有促進(jìn)作用,還表現(xiàn)為低濃度抑制。

    2.5 稀土元素對(duì)靈芝胞外三萜生產(chǎn)的影響

    稀土元素對(duì)靈芝胞外三萜(extracellular triterpenoid,EGT)生產(chǎn)的影響與胞內(nèi)三萜呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì),如圖5所示。對(duì)胞外三萜生產(chǎn)促進(jìn)效果最好的稀土元素為鑭和釹,且最佳濃度均為0.001mmol/L,相應(yīng)胞外三萜產(chǎn)量分別達(dá)到610.08mg/L和489.22mg/L,分別為對(duì)照的2.03倍和1.63倍。而其他幾種稀土元素對(duì)靈芝胞外三萜生產(chǎn)的促進(jìn)作用不明顯,甚至表現(xiàn)出高濃度抑制作用。

    圖5 稀土元素對(duì)靈芝胞外三萜產(chǎn)量的影響Fig.5 Effects of rare earth elements on EGT production

    3 結(jié)論與討論

    本研究結(jié)果表明,稀土元素對(duì)靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)液體發(fā)酵的影響,與稀土元素的種類(lèi)和濃度密切相關(guān),綜合來(lái)看稀土元素鐠和釹對(duì)靈芝多糖的誘導(dǎo)效果最好,而稀土元素釹、鑭和鈰對(duì)靈芝三萜誘導(dǎo)效果最好。李增利[14]在研究稀土元素對(duì)紅菇多糖液體發(fā)酵的影響時(shí)也得出了類(lèi)似的結(jié)論。相對(duì)于靈芝多糖和三萜的生產(chǎn),靈芝生物量對(duì)稀土元素的誘導(dǎo)作用不甚敏感,甚至表現(xiàn)出抑制作用,這與郭麗瓊等[15]、李增利等[14]的研究結(jié)果基本一致。

    稀土元素的作用機(jī)制可能類(lèi)似于激素,因其具有類(lèi)似鈣的原子結(jié)構(gòu)特征和理化性質(zhì),可通過(guò)激活相應(yīng)的酶系統(tǒng)而發(fā)揮作用[10,14]。然而,當(dāng)稀土元素的濃度過(guò)高時(shí),會(huì)呈現(xiàn)類(lèi)似重金屬離子的特性,并與膜蛋白結(jié)合抑制有關(guān)酶的活性[10]。本研究中,稀土元素鐠、釹、鑭等對(duì)靈芝胞外多糖、胞內(nèi)多糖以及胞外三萜的合成表現(xiàn)出的高濃度抑制,可能正是緣于此。

    本研究?jī)H就稀土元素對(duì)靈芝菌絲生長(zhǎng)以及靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)合成的影響進(jìn)行了探討,而對(duì)稀土元素的作用機(jī)制,特別是稀土元素對(duì)靈芝多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)等活性成分合成的分子機(jī)制還有待于進(jìn)一步的深入研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 劉高強(qiáng), 王曉玲. 靈芝免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J]. 菌物學(xué)報(bào), 2010, 29(1): 152-158.

    [2] SLIVA D, LABARRERE C, SLIVOVA V, et al. Ganoderma lucidum suppresses motility of highly invasive breast and prostate cancer cells[J].Biochem Biophys Res Commun, 2002, 298(4): 603-612.

    [3] STANLEY G, HARVEY K, SLIVOVA V, et al. Ganoderma lucidum suppresses angiogenesis through the inhibition of secretion of VEGF and TGF-1 from prostate cancer cells[J]. Biochem Biophys Res Commun,2005, 330(1): 46-52.

    [4] ZHANG Guoliang, WANG Yehong, NI W, et al. Hepatoprotective role of Ganoderma lucidum polysaccharide against BCG-induced immune liver injury in mice[J]. World J Gastroenterol, 2002, 8(4): 728-733.

    [5] MOTHANA R A, AWADH ALI N A, JANSEN R, et al. Antiviral lanostanoid triterpenes from the fungus Ganoderma pfeifferi[J].Fitoterapia, 2003, 74(1/2): 177-180.

    [6] LIU Jie, SHIMIZU K, KONISHI F, et al. Anti-androgenic activities of the triterpenoids fraction of Ganoderma lucidum[J]. Food Chemistry,2007, 100(4): 1691-1696.

    [7] 林志彬. 靈芝抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J]. 北京大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版, 2002, 34(5): 493-498.

    [8] 邢燕, 楊曉彤, 楊慶堯. 靈芝液體深層發(fā)酵研究進(jìn)展[J]. 工業(yè)微生物,2007, 37(3): 63-67.

    [9] WU Jianyong, WANG Chuangui, MEI Xingguo. Stimulation of taxol production and excretion in Taxus spp. cell cultures by rare earth chemical lanthanum[J]. J Biotechnol, 2001, 85(1): 67-73.

    [10] OUYANG Jie, WANG Xiaodong, ZHAO Bing, et al. Effects of rare earth elements on the growth of Cistanche deserticola cells and the production of phenylethanoid glycosides[J]. Journal of Biotechnology, 2003, 102(2): 129-134.

    [11] 陳立紅, 閆偉. 稀土對(duì)蒙古口蘑(Tricholom ongolicum)及四種菌根真菌菌絲體生長(zhǎng)的影響[J]. 內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2002, 33(3): 295-297.

    [12] 楊德俊, 馮紀(jì)南, 李強(qiáng)國(guó), 等. 稀土離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)促進(jìn)作用及增產(chǎn)效果的試驗(yàn)[J]. 食用菌, 2007, 29(5): 9-10.

    [13] 何冬蘭, 溫川蓉. 鑭和鈰對(duì)靈芝菌絲生長(zhǎng)的影響[J]. 中草藥, 1997(11):684-686.

    [14] 李增利. 稀土元素鐠、釹、鉺對(duì)紅菇多糖深層發(fā)酵的影響[J]. 食品科學(xué), 2007, 28(12): 312-316.

    [15] 郭麗瓊, 郭麗青. 稀土對(duì)靈芝生長(zhǎng)影響的初步研究[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志, 1999, 34(3): 155-157.

    [16] 張金桐, 崔德芳, 丁起盛. 稀土元素對(duì)藥用靈芝品質(zhì)影響的研究[J].中國(guó)中藥雜志, 1995, 20(9): 531-532.

    [17] 高興喜, 姚強(qiáng), 王磊, 等. 真菌激發(fā)子對(duì)靈芝液體發(fā)酵生產(chǎn)多糖和三萜類(lèi)物質(zhì)的影響[J]. 食品科學(xué), 2009, 30(23): 309-312.

    Effects of Some Rare Earth Elements on Liquid Fermentation of Ganoderma lucidum to Produce Polysaccharides and Triterpenoids

    YAO Qiang1,GAO Xing-xi2,*,GONG Zhi-yuan1,REN Peng-fei1,QIU Ke-xin2,LIU Yan3
    (1. Soil and Fertilizer Institute, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China;2. School of Life Sciences,Ludong University, Yantai 264025, China;3. School of Life Sciences, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China)

    In this study, the effects of some rare earth elements such as La3+, Ce3+, Nd3+, Pr3+and Er3+on the production of polysaccharides and triterpenoids by liquid fermentation of Ganoderma lucidum were explored. The results indicated that obvious stimulation effects of these rare earth elements on the production of polysaccharides and tritepenoids were observed. Moreover,Pr3+at concentrations of 0.01, 0.001 mmol/L and 0.1 mmol/L revealed the most obvious improvement on the production of intracellular polysaccharides (IPS), extracellular polysaccharides (EPS) and intracellular triterpenoids (IGT) with yields of 772.56, 452.76 mg/L and 398.49 mg/L, respectively. Compared with the control group, three components were increased by 4.67, 3.05 folds, and 1.91 folds due to Pr3+treatment. However, La3+at a concentration of 0.001 mmol/L showed a remarkable enhancing effect on EPS and the yield of EPS was up to 610.08 mg/L with a 2.03-fold enhancement. Therefore, the rare earth elements at appropriate concentrations can obviously increase the production of polysaccharides and triterpenoids in Ganoderma lucidum during liquid fermentation.

    rare earth elements;Ganoderma lucidum;polysaccharides;triterpenoids

    Q93.335

    A

    1002-6630(2011)05-0224-04

    2010-07-20

    山東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(Q2008D02;ZR2010CL020);“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2007BAD89B09-11);

    山東省農(nóng)業(yè)良種工程項(xiàng)目(2007LZ06-3);“泰山學(xué)者”建設(shè)工程專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目;魯東大學(xué)食(藥)用真菌創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目

    姚強(qiáng)(1979—),男,助理研究員,博士,主要從事分子育種、微生物生理生化研究。E-mail:qyaomail@163.com

    *通信作者:高興喜(1972—),男,副教授,博士,主要從事高等真菌分子生物學(xué)與代謝生理研究。E-mail:gaoxingxi@yahoo.com.cn

    猜你喜歡
    三萜類(lèi)胞內(nèi)胞外
    硝化顆粒污泥胞外聚合物及信號(hào)分子功能分析
    白芨三萜類(lèi)化合物的提取工藝優(yōu)化
    生物膜胞外聚合物研究進(jìn)展
    HIV/AIDS患者繼發(fā)鳥(niǎo)-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群感染診療進(jìn)展
    傳染病信息(2021年6期)2021-02-12 01:52:08
    懸鉤子屬三萜類(lèi)成分及其生物活性研究進(jìn)展
    中成藥(2019年12期)2020-01-04 02:02:52
    紫芝中三萜類(lèi)化學(xué)成分研究
    大孔樹(shù)脂純化馬甲子五環(huán)三萜類(lèi)成分的工藝研究
    尿感方清除受感染膀胱上皮細(xì)胞胞內(nèi)尿道致病性大腸桿菌的作用
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:27
    水華期間藻類(lèi)分層胞外聚合物與重金屬的相互作用機(jī)制研究
    姬松茸胞內(nèi)多糖和胞外多糖的抗氧化活性研究
    福建輕紡(2017年12期)2017-04-10 12:56:39
    成人av在线播放网站| 国产精品久久久久久精品电影| 国产成人欧美在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 草草在线视频免费看| 色哟哟哟哟哟哟| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 麻豆国产av国片精品| 午夜免费观看网址| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 18+在线观看网站| 免费人成在线观看视频色| 免费人成在线观看视频色| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 国产精品1区2区在线观看.| 熟女电影av网| 国产乱人视频| 国产不卡一卡二| 深夜精品福利| 久久久久久国产a免费观看| 男女视频在线观看网站免费| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 天天躁日日操中文字幕| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 日本免费一区二区三区高清不卡| 好男人电影高清在线观看| 午夜福利高清视频| 亚洲欧美日韩东京热| 午夜福利高清视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 99热这里只有是精品50| 成人欧美大片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 波野结衣二区三区在线 | 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲成人精品中文字幕电影| www.色视频.com| 国产欧美日韩精品亚洲av| 嫩草影院精品99| 制服丝袜大香蕉在线| 18禁美女被吸乳视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 在线观看日韩欧美| 一a级毛片在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 母亲3免费完整高清在线观看| e午夜精品久久久久久久| 日韩大尺度精品在线看网址| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国内精品美女久久久久久| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| xxxwww97欧美| 亚洲18禁久久av| 最好的美女福利视频网| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲av成人av| 国产成年人精品一区二区| 久久精品影院6| 午夜老司机福利剧场| 国产精品 欧美亚洲| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 2021天堂中文幕一二区在线观| 十八禁网站免费在线| 一个人免费在线观看电影| 欧美色视频一区免费| 国产亚洲欧美98| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 18禁黄网站禁片免费观看直播| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美一区二区亚洲| 日本一二三区视频观看| 精品欧美国产一区二区三| 最后的刺客免费高清国语| 中文字幕熟女人妻在线| 99精品久久久久人妻精品| 男女那种视频在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产欧美日韩精品一区二区| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产精品一及| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| or卡值多少钱| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 大型黄色视频在线免费观看| 老汉色∧v一级毛片| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲黑人精品在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 久久精品综合一区二区三区| 午夜精品在线福利| 九色国产91popny在线| 黄色日韩在线| 美女免费视频网站| 91av网一区二区| 国产黄a三级三级三级人| 青草久久国产| 午夜a级毛片| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 波多野结衣高清作品| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲七黄色美女视频| 一本一本综合久久| 欧美中文综合在线视频| 又黄又粗又硬又大视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 最近最新中文字幕大全免费视频| ponron亚洲| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 真实男女啪啪啪动态图| www.熟女人妻精品国产| 一区二区三区国产精品乱码| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美不卡视频在线免费观看| 精品久久久久久,| 国产精品日韩av在线免费观看| 九九热线精品视视频播放| 欧美黑人巨大hd| 久久午夜亚洲精品久久| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲国产精品合色在线| 此物有八面人人有两片| 嫩草影院精品99| 国产美女午夜福利| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 淫妇啪啪啪对白视频| 看黄色毛片网站| 国产成+人综合+亚洲专区| 中文字幕av在线有码专区| 人人妻人人看人人澡| 在线观看免费视频日本深夜| av国产免费在线观看| 丰满乱子伦码专区| 久9热在线精品视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 在线播放无遮挡| 真人一进一出gif抽搐免费| 狂野欧美激情性xxxx| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 在线免费观看不下载黄p国产 | 长腿黑丝高跟| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品精品国产色婷婷| 长腿黑丝高跟| 波多野结衣高清无吗| 国产真人三级小视频在线观看| 久久精品国产清高在天天线| 欧美丝袜亚洲另类 | 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲成av人片免费观看| 免费在线观看日本一区| 欧美一级a爱片免费观看看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 久久久久免费精品人妻一区二区| 一个人看视频在线观看www免费 | 麻豆国产av国片精品| 又爽又黄无遮挡网站| 国产高清videossex| 一个人看视频在线观看www免费 | 日韩有码中文字幕| svipshipincom国产片| 老司机在亚洲福利影院| avwww免费| 狠狠狠狠99中文字幕| a在线观看视频网站| 在线观看一区二区三区| 在线视频色国产色| 精品乱码久久久久久99久播| 天美传媒精品一区二区| av女优亚洲男人天堂| 级片在线观看| 国产精品99久久久久久久久| www.www免费av| 亚洲av一区综合| 亚洲人成伊人成综合网2020| 色综合婷婷激情| 免费在线观看影片大全网站| 宅男免费午夜| 免费观看的影片在线观看| av黄色大香蕉| 国产精品99久久久久久久久| 午夜免费成人在线视频| 十八禁网站免费在线| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品亚洲美女久久久| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 日本 av在线| 日本a在线网址| 国产97色在线日韩免费| 99精品在免费线老司机午夜| 成年女人看的毛片在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲av成人av| 黄片大片在线免费观看| 九色国产91popny在线| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲国产精品999在线| 成年免费大片在线观看| av专区在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| 色综合站精品国产| 亚洲成人久久爱视频| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲无线观看免费| 精品一区二区三区人妻视频| 精品国产美女av久久久久小说| 国产精品久久视频播放| 国产精品 欧美亚洲| 欧美三级亚洲精品| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久久精品大字幕| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精品亚洲一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲18禁久久av| 午夜福利成人在线免费观看| 色在线成人网| 一级黄片播放器| 在线天堂最新版资源| 免费观看人在逋| 免费人成在线观看视频色| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久精品91无色码中文字幕| 国产毛片a区久久久久| 久久久国产精品麻豆| 国产 一区 欧美 日韩| 搡老岳熟女国产| 操出白浆在线播放| 国产一区二区三区视频了| 久久6这里有精品| 国产精品野战在线观看| 午夜免费观看网址| 亚洲不卡免费看| 午夜免费成人在线视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日本免费a在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 亚洲乱码一区二区免费版| 免费看十八禁软件| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 欧美在线黄色| 欧美丝袜亚洲另类 | 国语自产精品视频在线第100页| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩大尺度精品在线看网址| 99热只有精品国产| 高清在线国产一区| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 99久国产av精品| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 最后的刺客免费高清国语| 色综合婷婷激情| 欧美在线黄色| 91av网一区二区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 99热只有精品国产| tocl精华| 国产av麻豆久久久久久久| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲内射少妇av| 久久久久性生活片| 成人国产综合亚洲| 国产精品三级大全| 国产97色在线日韩免费| 精品久久久久久久久久久久久| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久精品综合一区二区三区| 少妇的丰满在线观看| 搞女人的毛片| 久久亚洲精品不卡| 国产精品 国内视频| 日日夜夜操网爽| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产69精品久久久久777片| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久性视频一级片| 久久精品91蜜桃| 天天躁日日操中文字幕| 网址你懂的国产日韩在线| 观看美女的网站| 9191精品国产免费久久| a级毛片a级免费在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 18禁国产床啪视频网站| 最新美女视频免费是黄的| 少妇人妻一区二区三区视频| 一区二区三区高清视频在线| 成人欧美大片| 国产一区在线观看成人免费| 日韩有码中文字幕| 麻豆成人av在线观看| or卡值多少钱| 成人18禁在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 婷婷丁香在线五月| 日本成人三级电影网站| 十八禁网站免费在线| xxxwww97欧美| 黄色成人免费大全| 亚洲av免费在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 精品福利观看| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲av不卡在线观看| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲av成人av| 精品一区二区三区视频在线 | 三级国产精品欧美在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 淫秽高清视频在线观看| 免费人成在线观看视频色| 国产一区二区在线观看日韩 | 少妇的逼好多水| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲电影在线观看av| 亚洲,欧美精品.| 欧美zozozo另类| 女警被强在线播放| 免费人成在线观看视频色| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美性感艳星| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 免费在线观看影片大全网站| 舔av片在线| 人妻久久中文字幕网| 午夜福利高清视频| 精品久久久久久久末码| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 天堂动漫精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久久久久九九精品二区国产| 一个人免费在线观看电影| 真人做人爱边吃奶动态| 88av欧美| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 不卡一级毛片| 日韩av在线大香蕉| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产免费av片在线观看野外av| 1024手机看黄色片| 一本综合久久免费| 久久久久久久久大av| 很黄的视频免费| 国产极品精品免费视频能看的| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美最新免费一区二区三区 | 国产91精品成人一区二区三区| 老司机福利观看| 最好的美女福利视频网| 欧美色视频一区免费| 免费av不卡在线播放| 国产精品精品国产色婷婷| 精品国内亚洲2022精品成人| 美女黄网站色视频| 色av中文字幕| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 99国产精品一区二区三区| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 色综合欧美亚洲国产小说| av在线蜜桃| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 看免费av毛片| 久久久成人免费电影| 色综合欧美亚洲国产小说| 男女午夜视频在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产精品久久视频播放| 国产精品国产高清国产av| 搡老妇女老女人老熟妇| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 色吧在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 男女午夜视频在线观看| 免费观看的影片在线观看| 岛国在线观看网站| 我要搜黄色片| 9191精品国产免费久久| 少妇的逼好多水| 国产av一区在线观看免费| 日本五十路高清| 麻豆国产av国片精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产精品三级大全| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产99白浆流出| 岛国在线免费视频观看| 18+在线观看网站| 黄片小视频在线播放| 特大巨黑吊av在线直播| 成人国产一区最新在线观看| 久久九九热精品免费| 婷婷精品国产亚洲av| 欧美日韩乱码在线| 午夜视频国产福利| 久久人妻av系列| 色噜噜av男人的天堂激情| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产乱人视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 日本成人三级电影网站| 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久精品国产综合久久久| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产精品一及| 精品电影一区二区在线| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 性色av乱码一区二区三区2| 国内精品久久久久精免费| 国产高清激情床上av| 国产单亲对白刺激| 国产精品影院久久| 亚洲成av人片免费观看| www日本在线高清视频| 亚洲无线在线观看| av视频在线观看入口| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 两个人视频免费观看高清| 精品不卡国产一区二区三区| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产高清videossex| 长腿黑丝高跟| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲精华国产精华精| 国产一区二区三区视频了| 久久久色成人| 动漫黄色视频在线观看| 性色avwww在线观看| 黄色日韩在线| 岛国在线免费视频观看| 国产成人av激情在线播放| 99久久成人亚洲精品观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av免费高清在线观看| 小说图片视频综合网站| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲在线观看片| 婷婷六月久久综合丁香| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品一区av在线观看| 免费在线观看成人毛片| 身体一侧抽搐| 久久久久九九精品影院| 少妇熟女aⅴ在线视频| 综合色av麻豆| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品av视频在线免费观看| 91麻豆av在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产成人aa在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 青草久久国产| 欧美区成人在线视频| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲国产精品合色在线| 一个人免费在线观看电影| 香蕉久久夜色| av在线天堂中文字幕| 窝窝影院91人妻| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲av成人精品一区久久| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 最新美女视频免费是黄的| 美女黄网站色视频| 欧美大码av| 国产私拍福利视频在线观看| 高清在线国产一区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 久久伊人香网站| 久久久久久久久大av| 级片在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 韩国av一区二区三区四区| 欧美成人a在线观看| 午夜福利高清视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产黄a三级三级三级人| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲在线观看片| 亚洲熟妇熟女久久| 国产探花在线观看一区二区| 一二三四社区在线视频社区8| 免费观看精品视频网站| 亚洲熟妇熟女久久| 日日夜夜操网爽| 丰满乱子伦码专区| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一进一出抽搐gif免费好疼| 日韩免费av在线播放| 十八禁人妻一区二区| 国内精品美女久久久久久| av女优亚洲男人天堂| 国产高潮美女av| 久9热在线精品视频| 国产免费一级a男人的天堂| 十八禁人妻一区二区| 欧美区成人在线视频| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品无人区乱码1区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久久久久大av| 国产av麻豆久久久久久久| 观看美女的网站| av福利片在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 97碰自拍视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 免费电影在线观看免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日本免费a在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久久久九九精品影院| 91字幕亚洲| 日本黄色片子视频| 国产高清激情床上av| 亚洲在线自拍视频| 午夜福利免费观看在线| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 色在线成人网| 欧美中文综合在线视频| 亚洲av美国av| 波多野结衣巨乳人妻| 我要搜黄色片| 亚洲av五月六月丁香网| 美女cb高潮喷水在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 中出人妻视频一区二区| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产激情欧美一区二区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 99热精品在线国产| 午夜福利免费观看在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产成人影院久久av| 成人av一区二区三区在线看| e午夜精品久久久久久久| 国产高清激情床上av| 日本一本二区三区精品| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲午夜理论影院| 脱女人内裤的视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 在线国产一区二区在线| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲内射少妇av| 亚洲一区二区三区不卡视频| 免费看十八禁软件| 两个人的视频大全免费| 国产视频内射| 欧美在线黄色| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲在线自拍视频| 国产精品三级大全| 麻豆成人av视频| 好男人视频免费观看在线| 国产午夜福利久久久久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精华霜和精华液先用哪个| 国产综合懂色| 搡老妇女老女人老熟妇| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 观看免费一级毛片| 一级黄片播放器| 亚洲av成人av| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品久久久久久久久免| 国国产精品蜜臀av免费|