奶牛布魯菌病的血清學(xué)檢測

任 可,李 桐,張 勇

(1.包頭醫(yī)學(xué)院,內(nèi)蒙古包頭 014040;2.包頭市動物衛(wèi)生監(jiān)督所,內(nèi)蒙古包頭,014040;3.陜西英考鴕鳥股份有限公司楊凌鴕鳥示范中心,陜西楊陵 712100)

奶牛布魯菌病(Brucellosis)是由布魯菌(B rucella)引起的一種慢性人獸共患傳染病,其特征是引起奶牛生殖器官和胎膜發(fā)炎、不育、流產(chǎn)和各種組織的局部病灶[1-2]。布魯菌病歷史悠久,分布廣泛,世界動物衛(wèi)生組織(OIE)曾將其列入B類傳染病,我國將其列為二類傳染病[3-4]。據(jù)世界統(tǒng)計資料表明,1887年首次證實了本病病原體,20世紀30～60年代布魯菌病在世界范圍內(nèi)已大面積流行,全世界200多個國家中,已有160多個國家和地區(qū)有布魯菌病存在和流行,每年因布魯菌病造成的經(jīng)濟損失近30億美元,經(jīng)過十多年的努力,大部分國家宣布清除了布魯菌病[5-6]。我國布魯菌病疫情在20世紀80年代末至90年代初曾得到較好控制,但我國每年因該病造成的經(jīng)濟損失也達數(shù)億元[7-8]。近年來,奶牛布魯菌病發(fā)病率逐年呈上升趨勢,為了及時掌握疫情動態(tài),采取有效地防制措施,控制布魯菌病的發(fā)生和蔓延,以保護人畜健康,我們對部分奶牛場布魯菌感染情況進行了抽樣調(diào)查,現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 隨機抽取規(guī)模奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、中小規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶奶牛血清共1 000份。

1.1.2 診斷液 布魯虎紅凝集抗原(R型)批號:200805;布魯虎紅凝集抗原(S型)批號:200810;布魯菌試管凝集抗原(R型)批號:200807;布魯菌試管凝集抗原(S型)批號:200805;R型陽性血清批號:2008;S型陽性血清批號:2008。由農(nóng)業(yè)部動物診斷液制備中心提供。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 按照農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的《中華人民共和國國家標準動物布魯菌病診斷技術(shù)》中規(guī)定的技術(shù)要求進行操作,血清以布魯菌虎紅平板凝集試驗(RBPT)初篩,吸取0.03mL滴于潔凈玻璃板上,加入0.03 mL虎紅平板凝集抗原,混勻后4 min,陽性或疑似陽性的樣品用布魯菌試管凝集試驗(SPT)方法進行確認。

1.2.2 判斷標準 以出現(xiàn)50%凝集(++)的血清最大稀釋度作為該被檢血清的凝集價,當(dāng)凝集價1∶00以上時判為陽性,1∶50～1∶00之間判為可疑,1∶50以下判為陰性。

2 結(jié)果

個體養(yǎng)牛戶與不同規(guī)模養(yǎng)殖場布魯菌病的檢測結(jié)果見表1。由表1可知,隨機檢測的1 000頭奶牛,通過虎紅平板凝集試驗進行初檢,陽性頭數(shù)為30頭,陽性率為 3%;其中散養(yǎng)戶共檢測225頭,陽性頭數(shù)為11頭,陽性率為4.89%,中小規(guī)模養(yǎng)殖戶共檢測330頭,陽性頭數(shù)為11頭,陽性率為3.33%,規(guī)模養(yǎng)殖場共檢測445頭,陽性數(shù)為8頭,陽性率為2.02%。然后對初檢陽性的血清進行試管凝集試驗進行確診,結(jié)果表明,散養(yǎng)戶陽性率為2.67%,中小規(guī)模養(yǎng)殖場為1.52%,規(guī)模養(yǎng)殖場為1.12%。

表1 布魯菌病虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗檢測結(jié)果Table1 Rose bengalplate agglutination and tube agglutination test for b rucellosis

3 討論

本次調(diào)查是隨機抽樣對部分散養(yǎng)戶、中小規(guī)模及規(guī)模養(yǎng)殖場共1 000頭奶牛進行進行布魯菌病血清學(xué)檢測,根據(jù)結(jié)果可知,散養(yǎng)戶陽性率2.67%,中小規(guī)模養(yǎng)殖場陽性率為1.52%,規(guī)模養(yǎng)殖場陽性率為1.12%,散養(yǎng)戶布菌陽性率要比規(guī)模養(yǎng)殖場陽性率要高些,說明規(guī)?；酿B(yǎng)殖模式能比較有效地防制本病的發(fā)生,中小規(guī)模和散養(yǎng)戶奶牛陽性率也相對較低,這樣就說明中小規(guī)模的養(yǎng)殖場只要注意布魯菌病的防控措施,也能取得較好的防控效果。此次調(diào)查結(jié)果與齊景文等[9-10]調(diào)查結(jié)果基本一致。

目前布魯菌病的診斷和檢測技術(shù)主要有虎紅平板凝集試驗(RBPT),試管凝集試驗(SAT),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),補體結(jié)合試驗(CFT),乳汁環(huán)狀試驗(MRT)等[11-12]。本次調(diào)查先用虎紅平板凝集(RBPT)方法進行初篩,由于其特異性不高,而且存在人為因素影響,因而對檢測結(jié)果為陽性或可疑陽性的樣品,再使用試管凝集試驗(SAT)方法確診。CFT試驗試驗條件要求高,基層獸醫(yī)站難以應(yīng)用;試管凝集試驗是我國法定的診斷布魯菌病的方法。SAT的準確性較高,但該方法繁瑣費時,不適于現(xiàn)場操作;虎紅平板凝集操作比較簡單,和MRT是國際奶牛貿(mào)易上初步檢測的方法,但是其特異性較低,受試驗溫度和凝集時間相對較短的影響,不易準確判斷結(jié)果。所以,用RBPT檢測為陽性者,還要經(jīng)過SAT或CFT進行確診,只有這兩種檢測均為陽性者,才能最終判斷為陽性[13]。

布魯菌病是人獸共患病,危害性非常大,必須引起政府重視,但是并不是不可防治的。只要重視和加強強制性防疫,群防群控,做好防疫工作,布魯菌病就可以得到控制。一但處理不好,應(yīng)對不當(dāng),將會引發(fā)較大公共衛(wèi)生事件,嚴重時還可能會對社會經(jīng)濟發(fā)展造成巨大影響。因此,必須加強組織領(lǐng)導(dǎo),提高各級領(lǐng)導(dǎo)對布魯菌病防治工作重要性認識。將其放到更加突出位置,高度重視,全力應(yīng)對。加大宣傳力度、定期開展檢測監(jiān)測、規(guī)模各行處理程序、解決經(jīng)費不足、嚴格凈化監(jiān)督管理等,只要措施得當(dāng),政策對路,落實到位,就可以控制動物疫病的發(fā)生。

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