白掌的組培與快繁技術(shù)

江金蘭，葉 煒，羅慶國，李永清

(福建省三明市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 沙縣 360059)

白掌 (Spathiphyllum floribundum)，又名白鶴芋、苞葉芋、一帆風(fēng)順、和平芋，屬天南星科苞葉芋屬多年生常綠草本觀葉植物，由于白掌花葉兼美，輕盈多姿，生長旺盛，且又耐陰，故深受人們的青睞，常用于室內(nèi)綠化美化裝飾［1］。白掌不僅是優(yōu)良的觀葉植物，它還可以抑制人體呼出的廢氣如氨氣和丙酮，同時它也可以過濾空氣中的苯、三氯乙烯和甲醛，它的高蒸發(fā)速度可以防止鼻粘膜干燥，使患病的可能性大大降低［2］。白掌常用分株和播種繁殖，年繁殖系數(shù)低，遠(yuǎn)不能滿足商品化生產(chǎn)的要求，因此大規(guī)模生產(chǎn)常采用組織培養(yǎng)法繁殖，增殖迅速，株叢整齊，是種苗生產(chǎn)的最佳途徑。

1 材料與方法

材料從三明市農(nóng)科所引進(jìn)，試驗(yàn)于2008年在本單位生物中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，選擇生長健壯，無病蟲害的白掌側(cè)芽、葉片、葉柄為外植體。

從母株上剪取側(cè)芽 (母株少澆水，土壤保持干燥)，用清水將芽表面徹底沖洗干凈，剪去外層的苞葉，先用75%的酒精浸30 s后，再用0.1%的升汞浸泡8 min(期間不停的振蕩)后，用無菌水沖洗4～5次，備用。將側(cè)芽的葉片、葉柄剪去，側(cè)芽接種于側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (1) －(4)誘導(dǎo)叢生芽，剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (5)－(8)誘導(dǎo)愈傷組織，葉柄切成1 cm左右，葉片切成1 cm×1 cm左右，葉片的背面用刀片劃幾刀。為了避免交叉污染，每瓶培養(yǎng)基接種一個外植體。每種培養(yǎng)基接種40個樣本，定期觀察側(cè)芽、愈傷組織的萌發(fā)情況、不定芽的數(shù)量，生根的株數(shù)，以比較不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果。

誘導(dǎo)培養(yǎng)基。側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽:(1)MS+6-BA 5 mg·L－1+NAA 0.5 mg·L－1;(2)MS+6-BA 3 mg·L－1+NAA 0.2 mg·L－1;(3)1/2MS+6-BA 5 mg·L－1+NAA 0.5 mg· L－1;(4)MS+6-BA 1 mg·L－1+KT 3 mg·L－1+NAA 0.2 mg·L－1。葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織:(5)1/2MS+6-BA 5 mg·L－1+NAA 0.2 mg · L－1+2，4-D 0.4 mg·L－1;(6)MS+6-BA 5 mg· L－1+NAA 0.2 mg·L－1+2，4-D 0.4 mg·L－1;(7)MS+6-BA 3 mg·L－1+NAA 0.2 mg · L－1+2，4-D 0.2 mg·L－1;(8)MS+2，4-D 2 mg·L－1。增殖培養(yǎng)基:(9)MS+6-BA 2 mg·L－1+NAA 0.2 mg·L－1;(10)MS。生根培養(yǎng)基:(11)1/2MS+IBA 0.5 mg·L－1+AC 0.5 g·L－1;(12)1/2 MS+NAA 0.2 mg·L－1+AC 0.5 g·L－1。pH 為 5.8，培養(yǎng)溫度為(25±1)℃，光照強(qiáng)度1 500～2 000 lx，光照為每天14 h，瓊脂粉 5.5 g·L－1。

2 結(jié)果與分析

2.1 不定芽與愈傷組織的誘導(dǎo)

將側(cè)芽的葉片、葉柄剪去，側(cè)芽接種于側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (1) －(4)，剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (5) － (8)，20 d后側(cè)芽萌動，培養(yǎng)基 (1)中萌發(fā)的芽較壯，葉色濃綠，表明側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽時MS較1/2MS好，分裂素6-BA比KT誘導(dǎo)率更高，且以5 mg L－1為宜。葉片、葉柄40 d后邊緣出現(xiàn)少量愈傷組織，60 d后愈傷組織萌發(fā)不定芽，培養(yǎng)基 (6)為最適宜 (表1)，通過愈傷組織萌出不定芽的時間較側(cè)芽長，且變異率更高，故本研究以側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽方式為主。

表1 不同外植體在不同培養(yǎng)基上的出芽情況

2.2 不定芽的增殖

將側(cè)芽誘導(dǎo)的不定芽接種于增殖培養(yǎng)基 (9)－(10)中，在種苗生產(chǎn)過程中，9代以前以 (9)為主，分裂素6-BA的量慢慢降低，9代以后以不加激素的空白培養(yǎng)基 (10)為主，每隔30 d左右繼代1次。結(jié)果 (表2)培養(yǎng)基 (9)的增殖倍數(shù)達(dá)3.83，培養(yǎng)基 (10)的增殖倍數(shù)為1.93。

表2 不同培養(yǎng)基對叢生芽增殖的影響

2.3 不定芽的生根

將增殖培養(yǎng)中2 cm以上的無根苗切下接種于生根培養(yǎng)基 (11) － (12)，7 d后近基部有小根長出，30 d后生根培養(yǎng)基 (11)生根率最高，達(dá)100.0%(表 3)。

表3 不同培養(yǎng)基的生根效果

2.4 煉苗與移栽

生根培養(yǎng)30 d后，將試管苗煉苗1～2 d，洗凈根部培養(yǎng)基，用1 000倍液的甲基托布津浸泡5 min后，移栽至裝有泥炭土的穴盤中，把移栽苗放在溫室栽培架上，移栽后澆透水，覆蓋薄膜保濕，保持相對濕度90%以上，遮蔭70% ～80%，7 d后掀開薄膜，增加澆水次數(shù)，保持苗床濕潤，15 d后開始施肥噴藥，以后每7～10 d為1周期，藥劑防治以1 000倍液的甲基托布津或多菌靈噴霧，施肥以花多多2 000倍液噴施，3個月后可作為穴盤苗出售。

3 小結(jié)與討論

側(cè)芽最適宜的培養(yǎng)基為 MS+6-BA 5 mg·L－1+NAA 0.5 mg·L－1，葉片、葉柄最適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為 MS+6-BA 5 mg·L－1+NAA 0.2 mg·L－1+2，4-D 0.4 mg·L－1，繼代增殖培養(yǎng)基9代以前以MS+6-BA 2 mg·L－1+NAA 0.2 mg·L－1為宜，生根培養(yǎng)基以 1/2 MS+IBA 0.5 mg·L－1+AC 0.5 g·L－1為宜。

在外植體的消毒過程中，側(cè)芽相對于用葉片、葉柄困難，在建立無菌系的過程中，用側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽相對于用葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織產(chǎn)生不定芽容易，且變異率更低。

在試驗(yàn)和生產(chǎn)的過程中發(fā)現(xiàn)，白掌較容易生根，省去生根培養(yǎng)階段，把增殖階段的有根苗直接移栽，可以大大的降低生產(chǎn)成本，但未經(jīng)過生根培養(yǎng)的移栽苗，種苗的整齊度不一致，因此對污染率及種苗整齊度的控制仍然是生產(chǎn)過程中應(yīng)把握的重點(diǎn)。

［1］譚文澄，戴策剛．觀賞植物組織培養(yǎng)技術(shù) ［M］．北京:中國林業(yè)出版社，2000:84-141.

［2］余亞白，陳源，賴呈純，等．室內(nèi)空氣凈化植物的研究與利用現(xiàn)狀及應(yīng)用前景 ［J］．福建農(nóng)業(yè)學(xué)報，2006，21(4):425-429．