抑癌膠囊對大鼠的急性毒性試驗(yàn)

周媛

抑癌膠囊系中藥提取物和中藥生藥粉經(jīng)加工而成的中藥復(fù)方制劑，給小鼠灌胃抑癌膠囊系水混懸液LD100=22.4 g/kg LD0=3.1 g/kg，LD50平均可信限 =(9.2 ±3.6)g(粉)/kg。其主要成分為番木鱉堿和二萜類化合物HJB等，藥效學(xué)及臨床研究表明，本品具有良好的抗癌鎮(zhèn)痛作用，為確保臨床用藥的安全性，我們按二類新藥要求進(jìn)行了大鼠的急性毒性試驗(yàn)。

1 資料與方法

1.1 藥物 抑癌膠囊由衡陽市第一人民醫(yī)院提供(批號:070815)

1.2 動物 昆明種小白鼠，清潔級，體重16～18 g，雌雄各半，長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動物科技服務(wù)部提供。許可證號:2006-0001;合格證號:001467。小鼠在溫度18℃ ～26℃相對濕度55% ～70%的觀察室適應(yīng)7 d后開始試驗(yàn)，其間每天換籠消毒1次，紫外燈滅菌1次保持通風(fēng)良好。

1.3 方法

1.3.1 預(yù)試 樣品制備:取抑癌膠囊粉加適量蒸餾水用乳缽研磨加水調(diào)勻至灌胃針可以抽動為止，此時(shí)為該藥的最大灌胃濃度，其濃度為0.56 g(粉重)/ml。預(yù)試給藥:取小鼠8只隨機(jī)分為2組，每組4只雌雄各半，灌胃抑癌膠囊稱樣品40，20 ml/kg，30 min后小鼠死亡分別為4、2只。表明該藥品毒性大，可以求出LD50。由于在本次實(shí)驗(yàn)中所灌胃的藥物濃度為該品的最大濃度。因此為了求出該藥的LD100和LD0只能利用給藥體積來控制給藥劑量。

取小鼠12只隨機(jī)分為3組，每組4只雌雄各半分別灌胃抑癌膠囊樣品40、30、20 ml/kg灌胃劑量分別為 22.4、16.8、11.2 g/kg，1 h 后動物死亡情況為 4、3、1 據(jù)此初步得出抑癌膠囊的 LD100在 16.8～22.4 g/kg LD0在11.2 g/kg以下。

1.3.2 LD100與LD0的求得 取小鼠20只隨機(jī)分為2組每組10只雌雄各半，灌胃不同濃度的抑癌膠囊樣品40、30 ml/kg灌胃劑量分別為22.4、16.8 g/kg各組死亡數(shù)見表1。

另取小鼠30只隨機(jī)分為3組，每組10只雌雄各半灌胃不同濃度的抑癌膠囊樣品20 ml/kg。灌胃劑量分別為11.2、6.1、3.1 g/kg各組死亡數(shù)如表1。

表1 抑癌膠囊急性毒性試驗(yàn)預(yù)試結(jié)果

1.3.3 LD50的求得 由預(yù)試試驗(yàn)可知在求出抑癌膠囊的LD100的試驗(yàn)中采用的是該品的最大濃度及給藥體積為40 ml/kg而得出LD0時(shí)只須改變給藥濃度即可。故抑癌膠囊的LD50試驗(yàn)須采用改變給藥體積和改變給藥濃度相結(jié)合的方式進(jìn)行［1，2］。

取小鼠80只隨機(jī)分為8組每組10只雌雄各半，前3組動物灌胃最大濃度抑癌膠囊樣品(0.56 g/ml)40、30、22.5 ml/kg，后5組動物灌胃不同濃度的抑癌膠囊樣品20 ml/kg劑量分別為 22.4、16.8、12.6、9.45、7.09、5.32、3.99、2.99 g/kg 連續(xù)觀察7 d記錄死亡情況及各組死亡數(shù)。灌胃給藥0～1 h內(nèi)、動物呼吸困難、抽搐、痙攣、死亡，解剖后可見心胸出血，呈明顯的急性中毒死亡癥狀繼續(xù)觀察7 d后。抑癌膠囊8個(gè)不同劑量組死亡數(shù)分別為 10、8、6、5、4、2、1、0 只，各組存活的小鼠經(jīng)恢復(fù)后未見其他異常行為，兩便正常。處死后解剖動物肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均未發(fā)現(xiàn)明顯異常結(jié)果詳見表2。

表2 抑癌膠囊急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

2 討論

為了觀察抑癌膠囊的急性毒性制成抑癌膠囊混懸液給小鼠灌胃均能求出LD100結(jié)果得出抑癌膠囊水混懸液的LD50為9.1770 g/kg。其LD50平均可信限=(9.1770±3.6416)g/kg。95%的可信限為(7.5076～11.2176)g/kg簡約為LD50=9.2 g/kg，LD50平均可信限 =(9.2±3.6)g/kg，95%的可信限為(7.5～11.2)g/kg。

本實(shí)驗(yàn)得出抑癌膠囊樣品ip的LD50為9.1770 g/kg，表明抑癌膠囊有毒性，應(yīng)用必須按規(guī)定劑量進(jìn)行，其中毒及致死癥狀類似神經(jīng)與心血管毒性。

［1］李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1991.

［2］中藥辭海.第4卷.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，1998，1:79-85.