陸英的不同提取分離物對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響

袁志軍 易增興

(1.江西省宜春市人民醫(yī)院; 2.江西省宜春學(xué)院化生學(xué)院 江西宜春 336000)

陸英(英)Sambucus chinensis Lindl《拼音》LUYING,又名接骨草、八棱麻、走馬風(fēng)。來(lái)源為忍冬科植物蒴藿Sambucus chinensis Lindl.的全草,分布于華北、華東、華南、西南及陜西、甘肅、寧夏等省區(qū),生于山坡、路旁、溪邊、荒野灌叢中,采制:夏、秋季采收,曬干,性味:性溫,味苦[1]。由于陸英各個(gè)部分所含的有效成分不同,所以其作用也不同,以根、莖及葉入藥,具活血散瘀、祛風(fēng)除濕、通經(jīng)活絡(luò)之功效,能治扭傷、腰肌勞損、骨折、風(fēng)濕痹痛等癥,又能作獸藥治牛跌傷[1]。莖、葉含綠原酸、烏索酸、齊墩果酸、香樹(shù)酯醇、谷甾醇,并顯黃酮甙、鞣質(zhì)及還原糖反應(yīng),種子含氰甙類。陸英為民間常用藥,應(yīng)用廣泛。《本經(jīng)》:“主骨間諸痹,四肢拘攣疼酸,膝寒痛,陰痿,短氣不足,腳腫?！辫b于傳統(tǒng)文獻(xiàn)及民間多用陸英治療跌打損傷,有較好的止痛作用,故設(shè)計(jì)此提取分離方法及小鼠的鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)來(lái)證明陸英的鎮(zhèn)痛效果,以期探明陸英有效成分之所在。

1 材料

1.1 試劑

陸英原藥材于2007年8月采自宜春市袁州區(qū)湖田鄉(xiāng),取全草曬干,切斷,儲(chǔ)存,備用。氯仿：分析純,寧波市樂(lè)嘉化工有限公司,生產(chǎn)批號(hào)20080806;正丁醇：分析純,上海源景化學(xué)品有限公司,生產(chǎn)批號(hào)20090301;石油醚：分析純,天津市大茂化學(xué)試劑廠,生產(chǎn)批號(hào)20080924;乙酸乙酯：分析純,天津市博迪化工有限公司,生產(chǎn)批號(hào)20080902;醋酸：分析純,江西宏都生物化學(xué)有限公司,20080422;萘普生片;江西華太藥業(yè)有公司,生產(chǎn)批號(hào)20081216;用蒸餾水配制成0.2%萘普生。

1.2 儀器

電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化有限公司),分液漏斗;鼠籠,注射器(1mL),灌胃器(1mL)。

1.3 動(dòng)物

昆明小鼠56只,體重20～45g,由南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)部提供。

2 方法

2.1 提取分離方法

2.1.1 提取 將陸英原藥材粉碎,稱取粉末76g,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀1000mL的圓底燒瓶中,水浴溫度設(shè)為80℃,用75%乙醇500mL回流提取3次,第一次回流1h,第2,3次為每30分鐘1次,合并3提取液減壓回收溶劑,得250mL濃縮液。

2.1.2 分離 采用的是溶劑極性依次遞增分離法,即將陸英濃縮液分別用石油醚→氯仿→醋酸乙酯→正丁醇萃取,分取有機(jī)層。用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、水萃取的有機(jī)層水浴即可回收溶劑,正丁醇萃取的有機(jī)層溶劑需加熱回收(正丁醇的沸點(diǎn)高于水浴溫度)。后用5%乙醇溶解稀釋,調(diào)整濃度,配成實(shí)驗(yàn)用藥。陸英的石油醚層、氯仿層、醋酸乙酯層、正丁醇層、水層萃取物含生藥量的濃度均為2.6g/mL。

2.2 小鼠醋酸扭體鎮(zhèn)痛法

2.2.1 分組給藥 取小鼠56只,禁食12h后(不禁水),隨機(jī)分為7組,每組8只,稱重標(biāo)記。1組灌胃給藥0.9%生理鹽水溶液;2組灌胃給藥0.2%萘普生;3、4、5、6、7組分別灌胃陸英的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取分離物配制的實(shí)驗(yàn)用藥。給藥后60min左右,各小鼠腹腔注射1.0%醋酸(灌胃、腹腔注射均按0.1mL/10g小鼠體重的劑量給藥[2])。

2.2.2 觀察記錄 觀察并記錄注射醋酸溶液后15min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)(腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部扭轉(zhuǎn))。計(jì)算扭體反應(yīng)抑制率:抑制百分率(%)=(對(duì)照組平均扭體數(shù)一給藥組平均扭體數(shù))／對(duì)照組平均扭體數(shù)×100%。

3 結(jié)果及分析

采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,0.2%萘普生能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)(P＜0.01),扭體抑制率為72.82%;陸英正丁醇萃取物也能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)(P＜0.01),扭體抑制率為72.49%;陸英氯仿萃取物也能顯著減少醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)(P＜0.01),扭體抑制率僅為48.75%,而陸英的石油醚、醋酸乙酯、水萃取物這3組與生理鹽水組比較,對(duì)醋酸所致小鼠扭體次數(shù)幾無(wú)減少。陸英正丁醇萃取物的扭體抑制率較0.2%萘普生組稍低,可見(jiàn)陸英正丁醇萃取物具有較好的鎮(zhèn)痛作用;陸英氯仿萃取物的扭體抑制率較0.2%萘普生組差一半,其鎮(zhèn)痛效果相對(duì)不是很好,而其它3層相對(duì)0.2%萘普生幾乎沒(méi)有鎮(zhèn)痛作用。

5 討論

鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,陸英正丁醇萃取物和陸英氯仿萃取物能抑制醋酸刺激腹腔黏膜引起的痛反應(yīng),減少扭體鼠數(shù)和各鼠的扭體次數(shù),說(shuō)明陸英氯仿萃取物與正丁醇萃取物均有鎮(zhèn)痛效果。

6 結(jié)語(yǔ)

陸英氯仿和正丁醇萃取物均有鎮(zhèn)痛效果。陸英正丁醇萃取物作用效果相近。

[1]南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典(下冊(cè))[M].上海:上?？萍汲霭嫔?2005:2456.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:484.