遠(yuǎn)志提取物對小鼠腦內(nèi)多巴胺含量的影響

張淑萍,王昆祥,辛 華

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154003)

遠(yuǎn)志 Radix Polygalae為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志 Polygala tenuifolia Willd.或卵葉遠(yuǎn)志 Polygala L.的干燥根,具有安神益智之功效。用于心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸、神志恍惚、咳痰不爽等癥的治療[1]。遠(yuǎn)志主要含有遠(yuǎn)志皂苷元(tenuigenin)A、B、 細(xì) 葉 遠(yuǎn) 志 素 (tenuifolin)、 遠(yuǎn) 志 皂 苷(onjisaponin)A-G、遠(yuǎn)志糖苷 (tenuifolisde)A-E、遠(yuǎn)志寡糖(tenuifoliose)A-P[2]。多巴胺 (DA)是腦內(nèi)的一種神經(jīng)遞質(zhì),近些年來科學(xué)家們研究推測腦內(nèi)多巴胺含量增加可能造成帕金森氏綜合征。歷代醫(yī)書記載遠(yuǎn)志有益智功效,臨床常用于預(yù)防和治療老年癡呆癥。本研究對遠(yuǎn)志提取物對小鼠腦內(nèi)多巴胺含量的影響進(jìn)行研究,為遠(yuǎn)志的進(jìn)一步開發(fā)及臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

地西泮注射液購于藥都制藥集團(tuán)股份有限公司。遠(yuǎn)志提取物購于陜西冠宇醫(yī)藥科技有限公司。實(shí)驗(yàn)用昆明種小鼠購于佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(黑動(dòng)字:99101001)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物分組及給藥

昆明種小鼠40只,雌雄各半,隨機(jī)分為4組:空白對照組,陽性對照組 ,樣品低劑量組,樣品高劑量組,每組 10只。適應(yīng)性喂養(yǎng) 3d,第4天開始給藥,每天1次,連續(xù) 7d。空白對照組:灌服蒸餾水0.4mL;陽性對照組:灌服地西泮 lmg˙kg-1;樣品低劑量組:遠(yuǎn)志提取物9g˙kg-1;樣品高劑量組:遠(yuǎn)志提取物18g ˙kg-1。

2.2 樣品處理

2.2.1 組織樣品處理

于末次給藥后 lh,處死小鼠,取出小腦,用冷生理鹽水沖洗,濾紙拭干,精密稱重后置于含冰的酸化正丁醇中,置于帶塞刻度離心管中,勻漿,用酸化正丁醇補(bǔ)足到4mL,振蕩5min,離心5min(3000r˙min-1),取上清液 2.5mL置于另一帶塞離心管內(nèi),加5mL正庚烷和 0.1N鹽酸 1.2mL振蕩5min,離心5min,溶液分為二層。取水相0.5mL,加入0.067M pH7.2磷酸鹽緩沖液1.5mL,碘試劑0.1mL,靜置2min,加堿性亞硫酸鈉 0.5mL,靜置2min,加 6N醋酸 0.6mL,沸水浴20min,冷卻,加 45%磷酸0.lmL,沸水浴 20min,在 Ex:310nm,Em:370nm時(shí)測定 DA熒光強(qiáng)度。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液處理

取標(biāo)準(zhǔn)液0.2mL置于帶塞刻度離心管中,按“2.2.1項(xiàng)下”方法進(jìn)行操作。

2.2.3 空白溶液處理

取重蒸餾水0.2mL,置于帶塞刻度離心管中,按“2.2.1項(xiàng)下”方法進(jìn)行操作。

2.2.4 計(jì)算公式

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用兩樣本 t檢驗(yàn),所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差± s)表示,P ＜0.05表示有顯著性差異。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

對測定 DA結(jié)果與空白對照組比較,陽性對照組與樣品高劑量組均能顯著降低小鼠腦組織內(nèi) DA含量 (P＜0.05)。

表1 樣品含量測定結(jié)果(±s,n=10)

表1 樣品含量測定結(jié)果(±s,n=10)

組 別 DA平均含量(g˙kg-1)空白對照組 1.48±0.096陽性對照組 0.62±0.036低劑量組 1.27±0.070高劑量組 0.63±0.086*

4 討論

遠(yuǎn)志中可以提取到一種多巴胺受體的配基-四氫非洲防已胺。此化合物在體外可抑制 [3H]SCH23390和 [3H]螺哌隆與大鼠紋狀體膜的結(jié)合 ,它還能抑制 [3H]哌唑嗪和大鼠腦皮質(zhì)細(xì)胞膜結(jié)合 ,但不能改變 [3H]QNB及 [3H]Muscimol對膜的結(jié)合,研究顯示此抑制作用是通過競爭與非競爭混合機(jī)制而實(shí)現(xiàn)的。多巴胺是 NA的前體物質(zhì),是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì),中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響,神經(jīng)末梢的 GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用。遠(yuǎn)志(Radix Polygalae)為常用中藥,最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品,具有安神益智之功效。本研究發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)志提取物能夠降低小鼠腦內(nèi)多巴胺的含量,這可能與其發(fā)揮抑制安神作用有一定的關(guān)系,作用機(jī)理還有待于進(jìn)一步研究。

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