川楝子及其炮制品中川楝素含量測(cè)定研究*

周樂(lè)華， 李迎春，竇志英

( 1.天津市藥材集團(tuán)公司， 天津 300110 ； 2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193)

川楝子為楝科植物川楝MeliatoosendanSieb．et Zucc．的果實(shí)[1]，苦，寒；有小毒，具有舒肝、行氣止痛、驅(qū)蟲(chóng)的作用，是理氣止痛的常用中藥[2]。本研究以川楝素為檢測(cè)指標(biāo)，通過(guò)對(duì)其炮制品中川楝素的測(cè)定研究，建立了簡(jiǎn)便、可靠的高效液相色譜法測(cè)定川楝子中川楝素的含量。

1 儀器與試藥

1.1儀器 美國(guó)SoftaHPLC系統(tǒng)(6000 LDI PUMP；6000 PVW UV/VLS DETECTOR)；手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)；烘箱DHG78-1(湖北省黃石市醫(yī)療器械廠)；粉碎機(jī)(武義縣屹立工具有限公司)，F(xiàn)A 1004N型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，KQ-500E型醫(yī)用超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，HH-S型水浴鍋(鞏義市英峪予華儀器廠)。

1.2試藥 川楝子飲片(天津市中藥飲片廠，批號(hào)1001084)；川楝素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)58812-37-6)。乙腈為色譜純(天津市康科德科技有限公司)，其他試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1川楝子炮制品的制備 炒川楝子：取凈川楝子，切厚片或碾碎，置熱鍋中，用文火炒至規(guī)定程度時(shí)，取出，放涼。需炒焦者，一般用中火炒至表面焦黃色，斷面色加深為度，取出，放晾[1]。醋炙川楝子：凈川楝子加20%醋拌潤(rùn)，待醋液吸盡后，文火炒干[2]。鹽炙川楝子：凈川楝子加20%鹽，加適量水稀釋拌潤(rùn)，待鹽水吸盡后，文火炒干[2]。酒蒸川楝子：凈川楝子加30%黃酒拌潤(rùn)，罐中蒸8 h至酒盡，文火炒干。

2.2各炮制品中川楝素含量測(cè)定

2.2.1色譜條件 色譜柱為Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm, 5 μm)，流動(dòng)相為乙腈-水(30∶70)，流速為1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，柱溫為35 ℃，進(jìn)樣量10 μl。理論塔板數(shù)按川楝素峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。空白溶劑色譜圖中在與川楝素色譜峰相應(yīng)位置上無(wú)峰, 說(shuō)明此系統(tǒng)條件無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2.2溶液制備

2.2.2.1對(duì)照品溶液的制備 精密稱取川楝素對(duì)照品適量，加甲醇制成0.270 mg/ml的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2.2.2供試品溶液的制備 精密稱定川楝子生品和各炮制品粉末(過(guò)40目篩)約1 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 ml，稱定重量，在一定條件下超聲提取30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。重復(fù)提取3次，合并濾液蒸干，甲醇溶解定容至10 ml的量瓶中，搖勻即得。

2.2.3線性關(guān)系考查 精密吸取0.270 mg/ml川楝素對(duì)照品溶液，以甲醇配制質(zhì)量濃度為0.270、0.135、0.067 5、0.033 75、0.016 875和0.008 437 5 mg/ml，在上述色譜條件下測(cè)定川楝素的峰面積值，以峰面積和質(zhì)量濃度進(jìn)行回歸處理，得回歸方程Y=2064.7X+1053.3(r=0.999 9)，在0.084 375～2.70 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.2.4精密度考查 精密吸取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定川楝素的含量，結(jié)果RSD為0.146%。

2.2..5穩(wěn)定性考查 取同一供試品，分別于0、2、4、6、8和10 h進(jìn)樣測(cè)定，測(cè)得川楝素峰面積，計(jì)算RSD為2.641%。

2.2..6重現(xiàn)性考查 取同一批號(hào)樣品, 按照供試品溶液的制備方法, 分別制備6份供試品溶液, 測(cè)定川楝素的峰面積，計(jì)算RSD為1.831%。

2.2.7加樣回收率考查 精密稱定己測(cè)知含量的樣品6份各1 g，分別精密加入一定量的川楝素對(duì)照品，按含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果平均回收率100.46%，RSD為1.069%，見(jiàn)表1。

1. 川楝素 2.川楝素

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.2.8樣品含量測(cè)定 取各供試品溶液，按上述色譜條件，進(jìn)樣10 μl，測(cè)定峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 川楝子生品及不同炮制品中川楝素含量(n=6)

3 討論

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，通過(guò)四種不同炮制方法的成品川楝素含量比較，各炮制品中川楝素含量較生品均有所降低，川楝素可能是川楝子中的毒性成分之一，川楝素含量的降低可能與炮制后能降低毒性有關(guān)。其中醋品和酒品的含量較低，可能與其炮制過(guò)程中長(zhǎng)時(shí)間悶潤(rùn)，炮制時(shí)需較長(zhǎng)時(shí)間加熱干燥，從而導(dǎo)致成分破壞有關(guān)。

不同炮制品具有不同的功能與主治,與其化學(xué)成分有密切的關(guān)系。炒川楝子時(shí)川楝子炒焦后可緩和苦寒之性，降低毒性，減少滑腸之弊，以疏肝理氣止痛，用于脅肋疼痛及胃脘疼痛，如治肝郁化熱，心腹脅肋諸痛和肝腎陰虧而又肝氣橫逆所致之胸脘脅肋疼痛，吞酸吐苦。鹽川楝子能引藥下行，作用專于下焦，長(zhǎng)于療疝止痛，常用于疝氣疼痛，睪丸墜痛。醋川楝子能行氣散疲，使疏肝理氣止痛功效增加[4]。酒川楝子能理濕熱之喘悶,治療脾臟久虛, 積冷不散, 及陰氣傷寒,喘悶堅(jiān)脹, 四肢厥逆”。各制品均具抗炎作用，其中以鹽制品鎮(zhèn)痛抗炎作用最強(qiáng)[5]。

目前對(duì)川楝子的炮制研究不多，其具小毒的成分及理氣止痛的有效成分尚不清楚，需結(jié)合藥物化學(xué)和藥理實(shí)驗(yàn)等做進(jìn)一步的研究，以確保川楝子藥用的安全性和有效性。

1 中國(guó)藥典.一部．2005：29,附錄20

2 龔千峰.中藥炮制學(xué)．北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2003：117

3 趙春艷.川楝子炮制工藝改革.時(shí)珍國(guó)藥研究,1997，8(6)：531

4 王尚科.川楝子應(yīng)加醋拌炒一項(xiàng)建議.時(shí)珍國(guó)藥研究,1997，8(1)：57

5 紀(jì)青華,陸兔林. 川楝子不同炮制品鎮(zhèn)痛抗炎作用研究.中成藥, 1999, 21 (4) : 181