兩頭毛水提物對(duì)衰老小鼠心、肝及腎組織中 MDA、GSH和SOD含量的影響

張書偉，張莉蓉

鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室鄭州450001

兩頭毛(incarvillea arguta royle，IAR)為彝醫(yī)習(xí)用藥材，別名嗩吶花、炮仗花或炮仗筒等。主要分布于甘肅、四川、貴州、云南及西藏等地。來源于紫葳科角蒿屬植物毛子草的帶根莖全草，具有祛風(fēng)除濕，消炎止痛和活血散淤的功效［1］，主要用于治療肝炎、菌痢、癰腫、骨折血腫和風(fēng)濕勞傷等。研究［2-4］發(fā)現(xiàn)自由基具有抗氧化作用，且與許多疾病有關(guān)。作者采用D-半乳糖致衰老小鼠模型，應(yīng)用IAR后測(cè)定小鼠心、肝、腎中組織丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和還原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase，GSH)含量的變化，探討IAR的水提物對(duì)衰老小鼠的抗氧化活性及其可能的機(jī)制，為IAR的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)性依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 MDA、GSH測(cè)定試劑盒和SOD試劑盒(南京建成生物工程研究所)，D-半乳糖(上海恒信化學(xué)有限公司，批號(hào)2009022)，維生素E(浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，批號(hào)20100930)，Sartorius BP 211D型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，TG16-WS高速離心機(jī)(南京賽特儀器廠產(chǎn)品)，UV-2409型紫外分光光度計(jì)(日本島津)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥材及處理 IAR藥材購(gòu)于昆明市金碧路圣愛中醫(yī)館。取IAR全草粉碎，過80目篩，用10倍量(大約10 L)的蒸餾水回流提取3 h，再加8倍量(大約8 L)的蒸餾水回流提取3 h，重復(fù)一次，合并3次濾液回收，得其水提物。臨用時(shí)配制成實(shí)驗(yàn)所需濃度。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥［5］昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量(20±2)g，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。在21～24℃、相對(duì)濕度45% ～55%的環(huán)境中適應(yīng)飼養(yǎng)1周后實(shí)驗(yàn)，期間自由飲食和飲水。72只小鼠按照隨機(jī)數(shù)字表分成6組，每組12只，分別為正常組、模型組、陽性藥物維生素E組(200 mg/kg)、IAR水提物(IAR-Water)低、中和高劑量組(相當(dāng)于藥材1.9、3.8 和 7.6 g/kg)，給藥同時(shí)，模型組、陽性藥物維生素E組、IAR-Water低、中和高劑量組小鼠每天頸背部皮下注射D-半乳糖1 g/(kg·d)建立衰老小鼠模型，空白組皮下注射等量注射用水，共給藥7周。

1.4 小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量測(cè)定 給藥7周后處死小鼠，取心、肝、腎組織進(jìn)行勻漿小鼠心、肝、腎各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定所用測(cè)定方法均嚴(yán)格按所購(gòu)ELISA試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0分析數(shù)據(jù)，各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD含量的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量比較見表1。

表1 各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量(n=12)

3 討論

研究［6］表明，IAR 中含有生物堿、黃酮、神經(jīng)酰胺和三萜等多種化學(xué)成分。用叔丁基氫過氧化物為氧化劑使紅細(xì)胞氧化，加IAR提取物AB-2后，不僅可使紅細(xì)胞膜脂質(zhì)的氧化物減少，還可保護(hù)膜蛋白的巰基不致氧化聚合，其作用要優(yōu)于維生素E。IAR AB-2可防止血紅蛋白的自氧化及溶血，用電子自旋捕集法測(cè)羥自由基，結(jié)果說明AB-2可直接與羥自由基反應(yīng)，可能是自由基的清除劑。

該研究顯示，IAR-Water能使小鼠心、肝、腎中的MDA不同程度下降，提示IAR-Water可抗脂質(zhì)過氧化;能使小鼠心、肝及腎組織中的SOD和GSH不同程度升高，提示IAR-Water可清除·OH和H2O2。由此可見，IAR-Water可能通過抗脂質(zhì)過氧化，清除·OH和H2O2自由基而發(fā)揮抗氧化作用。

［1］中華本草編委會(huì).中華本草:第3卷［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999:641

［2］Luo ZY，Tang Y，You JL，et al.Protective effect of anisodamine in cultured bovine pulmonary endothelial cell injury induced by oxygen free radicals［J］.Arch Surg，1992，127(10):1204

［3］Baumgartner-Parzer SM，Wagner L，Pettermann M，et al.High-glucose-triggered apoptosis in cultured endothelial cells［J］.Diabetes，2005，44(11):1323

［4］方允輝，鄭榮梁.自由基生物學(xué)的理論與應(yīng)用［M］.北京:科學(xué)出版社，2002.

［5］張振明，許愛霞，葛斌，等.太子參水提物的抗氧化活性［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26(2):147

［6］付建軍，沈云亨，金慧子，等.兩頭毛的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2007，19(B08):343