急性腦梗死患者血小板CD62P和CD63的表達(dá)及意義

朱在卿，許貴剛，劉 洋，郭艷麗

(武警山東總隊(duì)醫(yī)院，濟(jì)南250014)

急性腦梗死(ACI)發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，高血壓病、糖尿病和高脂血癥是其發(fā)病的三大主要病因。近年來(lái)，血小板活化功能亢進(jìn)與ACI的關(guān)系日益受到重視［1］。α顆粒膜糖蛋白(CD62P)、溶酶體膜蛋白(CD63)是目前最具有特征性的血小板活化分子標(biāo)志物，檢測(cè)其表達(dá)可了解血小板的活化程度［2］。2008年1月～2011年1月，我們觀察了ACI患者血小板CD62P、CD63的表達(dá)變化，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 ACI患者50例(ACI組)，男32例，女18例;年齡50～73歲，平均62．3歲;均為首次發(fā)病，且于起病后72 h內(nèi)入院;符合1995年第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］，并經(jīng)頭部CT或MRI檢查證實(shí)。伴高血壓病39例，糖尿病18例，高脂血癥29例。排除:嚴(yán)重肝腎疾病或惡性腫瘤;近1個(gè)月內(nèi)有使用影響CD62P、CD63表達(dá)水平的藥物，如抗血小板藥物、他汀類(lèi)降脂藥物等。對(duì)照組為30例同期門(mén)診體檢人員，男18例，女12例;年齡42～73歲，平均55．2歲;排除有心腦血管意外病史者。兩組性別、年齡具有可比性。

1．2 方法

1．2．1 血小板 CD62P、CD63的檢測(cè) ACI組在入院當(dāng)天未治療前、對(duì)照組普通飲食1 d后禁食10 h，次日清晨抽空腹肘靜脈血2 ml，放入2%EDTA-Na2抗凝試管中混勻，離心，分離富血小板血漿，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求用全血流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板CD62P、CD63。對(duì)照管加入 5 μl IgG1-PE，測(cè)定管分別各加入 5 μl CD62P-PE，然后每管各加入 5 μl CD61-FITC 和 100 μl鞘液，加富血小板血漿 5 μl混勻，避光室溫孵育20 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)。每份標(biāo)本分析10 000個(gè)血小板中與熒光抗體PE-CD62P結(jié)合的陽(yáng)性血小板數(shù)，陽(yáng)性血小板百分率即為CD62P表達(dá)水平(IgG1-PE為同型對(duì)照)。CD63測(cè)定方法同CD62P。

1．2．2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11．5統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。P≤0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 兩組血小板CD62P、CD63表達(dá)比較 ACI組CD62P、CD63 表達(dá)量分別為 15．45% ±3．58%、11．26% ±2．30%，對(duì)照組分別為 4．12% ±0．84%、3．96% ±0．22%;兩組比較，P 均 ＜0．05。

2．2 血小板CD62P、CD63表達(dá)與ACI病理參數(shù)的關(guān)系 見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，血小板CD62P、CD63的表達(dá)變化與ACI合并高血壓病、糖尿病和高脂血癥均有關(guān)(P均＜0．05)。

3 討論

研究表明，血小板活化是ACI的關(guān)鍵發(fā)病機(jī)制之一。CD62P又稱(chēng)P選擇素，屬于選擇素家族黏附分子，定位于靜止血小板α顆粒和活化血小板的質(zhì)膜上。CD63為血小板溶酶體完整膜糖蛋白，相對(duì)分子量為53 000，也是血小板活化的特異性分子標(biāo)志物之一［4］。在血小板活化時(shí)，CD62P、CD63隨著活化血小板脫顆粒而移位，與血小板質(zhì)膜結(jié)合，表達(dá)增加，成為激活血小板的特異性標(biāo)志物。

表1 血小板CD62P、CD63表達(dá)與ACI病理參數(shù)的關(guān)系(%，ˉx ± s)

本研究結(jié)果顯示，ACI患者血小板活化標(biāo)記物CD62P、CD63的表達(dá)明顯增加，高于對(duì)照組，說(shuō)明在腦梗死急性期，血小板明顯活化，提示在ACI疾病發(fā)生過(guò)程中，血小板活化起了重要作用。研究結(jié)果還顯示，腦梗死伴高血壓病患者血小板CD62P、CD63表達(dá)顯著高于不伴高血壓病者，表明高血壓更易使體內(nèi)血小板活化，加重腦血管病的發(fā)生。羅助榮等［5］研究表明，血小板CD63、CD62P表達(dá)與高血壓病患者的病情嚴(yán)重程度呈一定相關(guān)性。通過(guò)比較我們發(fā)現(xiàn)，伴2型糖尿病的ACI患者血小板D62P、CD63表達(dá)明顯高于未伴糖尿病者。這表明2型糖病患者血小板活化性增高，易于形成血栓，并進(jìn)一步促進(jìn)血管病變的產(chǎn)生。本研究還顯示，伴隨高脂血癥的ACI患者血小板CD62P、CD63表達(dá)明顯高于未伴高脂血癥者。表明血脂異常是影響ACI發(fā)病及病情嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素，血膽固醇及LDL水平的增高是ACI發(fā)生和發(fā)展的主要因素。

綜上所述，ACI患者血小板CD62P、CD63的表達(dá)明顯增加，血小板活化功能明顯增強(qiáng)，尤其是伴隨高血壓病、糖尿病、高脂血癥的患者。提示及時(shí)檢測(cè)血小板CD62P、CD63，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)估，采取有效預(yù)防和治療措施，對(duì)于ACI的防治具有積極的臨床意義。

［1］王寧，吳軍，李柯靜，等．老年急性腦梗死病人血小板活化指標(biāo)的檢測(cè)及其臨床意義［J］．中西醫(yī)結(jié)合腦血管病雜志，2005，3(4):325-326．

［2］張麗娟，李普蕾，吳松寒．急性腦梗死患者血漿活化血小板的變化及其意義［J］．臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，2000，13(2):100-101．

［3］中華神經(jīng)科學(xué)會(huì)．各類(lèi)腦血管疾病診斷要點(diǎn)［J］．中華神經(jīng)科雜志，1996，29(6):379-380．

［4］Cha JK，Jeong MH，Kim JW．Statin reduce the platelet P-selectin expression in atherosclerotic ischemic stroke［J］．J Thromb Thrombolysis，2004，18(1):39-42．

［5］羅助榮，鄭德柱．血小板CD63、CD62P表達(dá)與高血壓病危險(xiǎn)度分層的關(guān)系及氯沙坦的干預(yù)作用［J］．福州總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2001，8(1):50-51．