利用外源晶體氨基酸優(yōu)化吉富羅非魚(GIFT Oreochromis niloticus)飼料氨基酸水平的池塘試驗(yàn)

程成榮 溫小波 汪文慶 王華朗 朱選 董延

我國(guó)是全世界最大的羅非魚養(yǎng)殖大國(guó)，也是羅非魚飼料的生產(chǎn)大國(guó)。近年來，羅非魚產(chǎn)業(yè)競(jìng)爭(zhēng)異常激烈，養(yǎng)殖戶經(jīng)常處于虧損的邊緣，降低養(yǎng)殖成本是保障養(yǎng)殖戶利益的最重要的手段。飼料費(fèi)用通常占到養(yǎng)殖成本的70%以上，如何減少單位增重成本是飼料廠提升產(chǎn)品質(zhì)量和優(yōu)化產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的主要策略，蛋白原料是飼料配方成本最主要的組成部分，因此它必然是精細(xì)化配方結(jié)構(gòu)需要考慮的焦點(diǎn)。本試驗(yàn)利用游離晶體DL-蛋氨酸和賴氨酸鹽酸鹽優(yōu)化氨基酸模式，以吉富羅非魚(GIFT Oreochromis niloticus)為試驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行全周期的池塘生產(chǎn)試驗(yàn)，在實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境中評(píng)估優(yōu)化飼料氨基酸對(duì)養(yǎng)殖成本的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料(見表1)

表1 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平

以淡水魚粉（羅非魚加工下腳料）、豆粕及菜粕為蛋白源，面粉為糖源，全脂米糠和羅非魚油為脂肪源，配制3種試驗(yàn)飼料,其中飼料1(對(duì)照組)含8%淡水魚粉，飼料2增加菜粕用量減少淡水魚粉至3%，同時(shí)補(bǔ)充晶體賴氨酸鹽酸鹽和蘇氨酸，飼料3在飼料2基礎(chǔ)上補(bǔ)充0.11%晶體DL-蛋氨酸。按2010年6月份的原料價(jià)格水平計(jì)算，飼料1配方成本2861元/t，飼料2和飼料3則分別為2735元/t和2781元/t。飼料原料均經(jīng)粉碎過40目篩，充分混合后經(jīng)HKJ－218型制粒機(jī)加工成2 mm的顆粒飼料，烘干后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)魚和飼養(yǎng)方法

表2 試驗(yàn)池塘及放苗

吉富羅非魚(GIFT Oreochromis niloticus)由海南某苗場(chǎng)提供。每種飼料3個(gè)重復(fù)，合計(jì)9口試驗(yàn)塘(平均面積4～5畝/塘)，水深2 m左右，每口塘平均放苗密度14～16 g/m3，試驗(yàn)魚平均初重18 g，各個(gè)重復(fù)初始體重差異不顯著（P＞0.05），具體魚苗放養(yǎng)情況見表2。每口塘配一臺(tái)投餌機(jī)及增氧機(jī)，試驗(yàn)前每口塘均進(jìn)行清塘、消毒、重新放水及培水。每天2次飽食投喂，試驗(yàn)從2010年8月1日開始至2010年11月20日結(jié)束，試驗(yàn)期間水溫在23～32℃，溶氧大于6 mg/l。

1.3 樣品采集和分析測(cè)定

試驗(yàn)期間準(zhǔn)確記錄飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，捕撈每口塘所有魚并進(jìn)行稱重，計(jì)算增重率、飼料系數(shù)。

2 結(jié)果與分析(見表3)

表3 試驗(yàn)結(jié)果及經(jīng)濟(jì)效益評(píng)估

試驗(yàn)結(jié)束后所有口塘羅非魚的成活率均在99%以上，試驗(yàn)期間沒有病害發(fā)生。經(jīng)過112 d的養(yǎng)殖，攝食飼料1的羅非魚從平均初重18.3 g/尾長(zhǎng)至574 g/尾（三口塘平均），而攝食含3%淡水魚粉但未補(bǔ)充晶體DL－蛋氨酸的飼料2的羅非魚則從平均初重18.2 g/尾長(zhǎng)至555 g/尾（三口塘平均），比攝食飼料1的羅非魚少增重約20 g/尾，相應(yīng)的每畝平均少收魚30 kg（按放1500尾/畝），但攝食飼料3的羅非魚則從平均初重18.3 g/尾長(zhǎng)至595 g/尾（三口塘平均），比攝食飼料2的羅非魚增重提高約40 g/尾，相應(yīng)的每畝增收魚60 kg（按放1500尾/畝），甚至還比攝食飼料1的羅非魚增重增加20 g/尾，從574 g/尾提高到595 g/尾。在經(jīng)濟(jì)效益方面，如果飼料價(jià)格按配方成本基礎(chǔ)上加價(jià)600元/t計(jì)算，平均魚價(jià)按2010年月11月底時(shí)的9.6元/kg，則投喂對(duì)照料(飼料1)、飼料2和飼料3的池塘銷售收入分別為6990元/畝、6780元/畝和7296元/畝，飼料費(fèi)用則分別為 3249元/畝、3311 元/畝及3413元/畝，在不扣除塘租、水電人工等費(fèi)用情況下，每畝塘毛收入分別達(dá)到3741元/畝、3469元/畝、3883元/畝，因此補(bǔ)充外源晶體氨基酸平衡優(yōu)化氨基酸水平顯著提高了養(yǎng)殖效益，分別比投飼飼料1和飼料2的池塘收入增加 142元/畝、414元/畝。

3 討論

3.1 利用外源晶體DL－蛋氨酸優(yōu)化氨基酸水平可提高實(shí)際池塘環(huán)境中的飼料生產(chǎn)水平

Jackson等(1982)報(bào)道，莫桑比克羅非魚(O.mossambicus)含硫氨基酸的最適需要量為1.27%。Santiago等(1988)報(bào)道尼羅羅非魚則為1.02%，而吉利羅非魚(T.zillii)飼料中含硫氨基酸為1.35%時(shí)生長(zhǎng)最好（Abdurraman，1999）。Lemme(2010)報(bào)道,初重為 100 g的尼羅羅非魚蛋氨酸需要量為0.67%(總含硫氨基酸為1.43%)。本研究結(jié)果表明，在實(shí)際養(yǎng)殖的池塘條件下，當(dāng)?shù)鞍彼崴綇?.50%增加到0.61%，吉富羅非魚的平均增重率從2925%提高到3146%(三口池塘平均)，說明在實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境下，盡管存在天然餌料，但人工飼料仍是最主要的養(yǎng)分來源，飼料質(zhì)量好壞直接決定養(yǎng)殖效果。近年來，已有相當(dāng)多的研究證實(shí)羅非魚可以有效利用外源晶體DL－蛋氨酸，提高生長(zhǎng)性能(Odum 等 ，1991；Deyab，2002、2003；Wilson，2004；Magdy，2006；Lim，2007；Asraf，2007；Robinson，1991)，但針對(duì)池塘養(yǎng)殖中的研究報(bào)道的結(jié)果仍偏少。本文研究表明，在實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境中，利用外源晶體氨基酸優(yōu)化飼料氨基酸水平可顯著提高養(yǎng)殖水生生物的生產(chǎn)水平。

3.2 水產(chǎn)動(dòng)物能夠利用所補(bǔ)充的晶體氨基酸提高生長(zhǎng)性能

Lim（2007）在羅非魚飼料中以DDGS替代豆粕和玉米蛋白粉時(shí)發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充0.4%晶體賴氨酸可提高魚的增重水平及飼料效率，與對(duì)照組相比差異不顯著。同樣，Webster(1991)在斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictalurus punctatus)飼料中以DDGS替代豆粕也有類似的結(jié)論。Robinson（1991）在以花生粕或棉粕為主要蛋白源的飼糧中補(bǔ)充晶體賴氨酸也有效促進(jìn)了斑點(diǎn)叉尾鮰的生長(zhǎng)。Cheng（2003）在飼糧中補(bǔ)充晶體賴氨酸和蛋氨酸顯著提高了虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的生長(zhǎng)水平。顏立成等（1996）研究發(fā)現(xiàn)，添加晶體蛋氨酸求得對(duì)蝦餌料氨基酸平衡、減少動(dòng)物性蛋白的用量，可明顯提高養(yǎng)殖效果。季文娟（2000）研究黑鯛飼料蛋白時(shí)發(fā)現(xiàn)，在實(shí)際飼料配方中應(yīng)添加適量賴氨酸和晶體蛋氨酸，以進(jìn)一步提高配合飼料的蛋白質(zhì)效率及幼魚的增重率，降低餌料系數(shù)。本試驗(yàn)也表明，飼料中添加限制性晶體DL－蛋氨酸后明顯促進(jìn)吉富羅非魚的生長(zhǎng)，減少魚粉用量時(shí)，可利用飼料中添加的游離氨基酸來提高或維持氨基酸平衡，進(jìn)而提高生產(chǎn)效益。

目前對(duì)晶體氨基酸能否被水產(chǎn)動(dòng)物所利用的最大爭(zhēng)議是吸收的同步性，而且對(duì)同步性的理解還存在相當(dāng)多的問題。Cannon(1947)最初得到這個(gè)結(jié)論時(shí)基于將小鼠的幾種必需氨基酸分別分成幾餐給飼，但這一條件和現(xiàn)實(shí)中養(yǎng)殖的投喂條件相差甚遠(yuǎn)，并且Yamamoto（1992）發(fā)現(xiàn)這種方式會(huì)造成小鼠攝食急劇減少，因此，Yamamoto認(rèn)為同步性不能作為氨基酸可否被利用的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)際上，嚴(yán)格的同步性在動(dòng)物體內(nèi)幾乎不可能做到，同時(shí)在很多時(shí)候吸收是否同步，也很難進(jìn)行比較。

同步性比較常常通過測(cè)定水產(chǎn)動(dòng)物血液中游離氨基酸濃度峰值出現(xiàn)的時(shí)間來比較，但需要注意的是血液中游離氨基酸濃度存在較大的個(gè)體差異，并且還和取樣部位相關(guān)，因此判斷氨基酸吸收后濃度隨時(shí)間變化的情況必須要基于大量樣本的生物統(tǒng)計(jì)，但往往經(jīng)過大量統(tǒng)計(jì)后，魚類血液中并不總存在游離氨基酸峰值，例如：Ambardekar（2004）給初始體重約400 g的斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictalurus punctatus)分別飼喂玉米蛋白粉、豆粕、次粉、血粉、魚粉、肉骨粉以及相應(yīng)的晶體氨基酸混合物（按相應(yīng)原料氨基酸組成配制），并測(cè)定了其后12 h內(nèi)血清中游離氨基酸濃度的變化，結(jié)果表明，攝食玉米蛋白粉、血粉和次粉及其分別相應(yīng)的晶體氨基酸混合物時(shí)，血清中各游離氨基酸無峰值出現(xiàn)（P＞0.05），攝食肉骨粉時(shí)血清中僅亮氨酸在第9 h出現(xiàn)峰值（P＞0.05），攝食相應(yīng)的晶體氨基酸混合物則無峰值出現(xiàn)（P＞0.05）。而攝食豆粕后，血清中也沒有必需氨基酸的吸收峰，攝食相應(yīng)晶體氨基酸混合物時(shí)，蘇氨酸在第 1 h（P＜0.05），精氨酸、亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸分別在第3 h出現(xiàn)峰值（P＜0.05），攝食魚粉后，血清中各游離氨基酸濃度也無峰值出現(xiàn)（P＞0.05），而攝食相應(yīng)晶體氨基酸混合物時(shí)，血清中賴氨酸在第1 h出現(xiàn)峰值（P＜0.05）。既然有很多時(shí)候并沒有所謂的吸收峰，因此很多情況下所謂吸收同步性是很難進(jìn)行比較或根本不存在。實(shí)際上，飼料中不同蛋白源在小腸中水解速度因其來源和工藝等因素存在必然的不同，因此導(dǎo)致氨基酸被吸收后出現(xiàn)在血液中的時(shí)間也不一致，因此也可能存在不同步現(xiàn)象。

關(guān)于氨基酸是否同步性問題，國(guó)內(nèi)已有報(bào)道，但由于缺少足夠的生物統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，故仍存在爭(zhēng)議。

由于氨基酸被吸收后還需要經(jīng)過肝臟的代謝或儲(chǔ)存再釋放到血液循環(huán)中（Elwyn，1970），一定程度上的不同步并不足以影響氨基酸參與蛋白合成（Yamamoto，1992），因此單純應(yīng)用血液中氨基酸峰值是否同步來判斷氨基酸是否可以被有效利用是不夠全面的，從根本上講，血液只是在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)運(yùn)輸氨基酸的載體，并且其中的游離氨基酸濃度不到整個(gè)機(jī)體游離氨基酸庫(kù)的3%，不具備代表性，肌肉中游離氨基酸池是占機(jī)體參與蛋白質(zhì)合成時(shí)最主要的游離氨基酸池。

通過補(bǔ)充晶體DL－蛋氨酸增加基礎(chǔ)飼料中蛋氨酸水平，顯著促進(jìn)初重為5 g的奧尼羅非魚(Oreochromis niloticus)生長(zhǎng)（Hua，2010），同時(shí)測(cè)定肌肉中游離氨基酸還發(fā)現(xiàn)，肌肉中游離蛋氨酸的濃度和飼料中蛋氨酸含量的提高幾乎呈線性關(guān)系，換言之，補(bǔ)充的晶體DL－蛋氨酸已順利到達(dá)肌肉氨基酸池參與蛋白合成，而沒有出現(xiàn)所謂的由于過快吸收被氧化現(xiàn)象，否則肌肉中的游離氨基酸池不應(yīng)受到飼料中外源補(bǔ)充的晶體DL－蛋氨酸的影響(見圖1）。

圖1 肌肉中游離蛋氨酸的濃度與飼料中蛋氨酸含量的關(guān)系

值得注意的是，本試驗(yàn)是直接添加晶體DL－蛋氨酸，因?yàn)樵诠I(yè)化生產(chǎn)飼料產(chǎn)品過程中，晶體DL－蛋氨酸經(jīng)調(diào)質(zhì)及制粒過程后能有效地嵌合在變性黏結(jié)的蛋白質(zhì)及碳水化合物基質(zhì)中，避免了可能存在的“吸收問題”，實(shí)際上，Takeshi（1982）通過鯉魚試驗(yàn)早已證實(shí)：飼料中少量補(bǔ)充晶體氨基酸時(shí)，晶體氨基酸沒有必要進(jìn)行包被，因?yàn)榘慌c否在生長(zhǎng)性能上無顯著性差異。

4 結(jié)論

在實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境中，通過補(bǔ)充外源晶體DL－蛋氨酸、賴氨酸鹽酸鹽等優(yōu)化吉富羅非魚飼料的氨基酸水平，可有效改善飼料品質(zhì)，并提高羅非魚生產(chǎn)性能。全程養(yǎng)殖場(chǎng)實(shí)踐表明，補(bǔ)充外源晶體DL－蛋氨酸能顯著提高養(yǎng)殖效益并降低飼料生產(chǎn)成本。實(shí)際池塘環(huán)境中，水產(chǎn)動(dòng)物能夠有效利用外源晶體氨基酸，提高生產(chǎn)性能。

22篇，刊略，需者可函索）