冠心病心絞痛患者中髓過氧化物酶的檢測

史榮輝

（溧水縣人民醫(yī)院，江蘇 南京 211200）

髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）是一種亞鐵血紅素酶，由兩條重鏈（55-64 kD）和兩條輕鏈（10-15 kD）組成的糖基化蛋白，主要存在于中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中，中性粒細(xì)胞來源于骨髓的造血干細(xì)胞，在骨髓中分化發(fā)育后，進(jìn)入血液或組織.在骨髓，血液和結(jié)締組織的分布數(shù)量比是28∶1∶25，成年人血液中中性粒細(xì)胞的數(shù)量約占白細(xì)胞總數(shù)的55%～70%.中性粒細(xì)胞屬多形核白細(xì)胞的一種，由于其數(shù)量在粒細(xì)胞中最多，因此有人將多形核白細(xì)胞指中性粒細(xì)胞.該細(xì)胞內(nèi)含許多彌散分布的細(xì)小的淺紅或淺紫色的特有顆粒，顆粒中含有髓過氧化物酶，酸性磷酸酶，吞噬素，溶菌酶等。

髓過氧化物酶是中性粒細(xì)胞所特有，即使在有強(qiáng)吞噬作用的巨噬細(xì)胞中也極少或完全沒有這種酶。在細(xì)胞化學(xué)上，一般將這種髓過氧化物酶作為中性粒細(xì)胞的標(biāo)志。中性粒細(xì)胞具有很強(qiáng)的趨化作用.所謂趨化作用，就是細(xì)胞向著某一化學(xué)物質(zhì)刺激的方向移動(dòng).對中性粒細(xì)胞起趨化作用的物質(zhì)，稱為中性粒細(xì)胞趨化因子，中性粗細(xì)胞膜上有趨化因子受體，受體與趨化因子結(jié)合，激活胞膜上的鈣泵，細(xì)胞向前方伸出片足，使細(xì)胞移向產(chǎn)生趨化因子的部位它參與多種疾病的發(fā)生，如動(dòng)脈粥樣硬化（As）、冠心病、白血病等。

不穩(wěn)定型心絞痛（unstable angina pain，UAP）和穩(wěn)定型心絞痛患（stable angina pain，SAP）者中均可能存在髓過氧化物酶水平的變化。本研究擬通過測定確診的47例不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）患者、39例穩(wěn)定型心絞痛患者（SAP）和40例正常對照組的MPO水平，根據(jù)根據(jù)MPO水平的高低將各心絞痛患者分成不同組別，在120d內(nèi)進(jìn)行隨訪，比較心血管事件的發(fā)生情況，探討髓過氧化物酶的表達(dá)水平對心絞痛患者預(yù)后評估的意義[1-3]。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 研究對象

入選標(biāo)準(zhǔn):選擇2010年3月至2011年4月在我院住院的確診不穩(wěn)定型心絞痛（unstable angina pain，UAP）患者47例：符合冠心病不穩(wěn)定型心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)，心電圖示以R波為主的導(dǎo)聯(lián)出現(xiàn)ST段壓低＞0.1mV和（或）T波倒置（變異型心絞痛則ST段抬高），持續(xù)1min以上，間歇1min以上；但無心肌肌鈣蛋白和心肌酶譜的動(dòng)態(tài)變化，并除外穩(wěn)定型心絞痛和心肌梗死。穩(wěn)定型心絞痛患者39例：符合冠心病穩(wěn)定型心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)；冠狀動(dòng)脈造影提示冠狀動(dòng)脈及其主要分支（左主干、前降支、較大對角支、右冠脈）狹窄≥50%，在過去的1～3個(gè)月內(nèi)心絞痛的發(fā)作，相對穩(wěn)定，緩解因素及發(fā)作頻率無顯著變化的，心絞痛發(fā)作，心電圖顯示R波為基礎(chǔ)的指導(dǎo)相關(guān)的ST段壓低＞0.1mV和（或）T波倒置，非肌鈣蛋白和心肌酶的動(dòng)態(tài)。正常對照組為門診健康體檢者40例。

1.2 標(biāo)本收集及檢測

各組入選者均于入院當(dāng)日從肘靜脈采集血液4mL，采用肝素抗凝，分離血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定外周血MPO水平，采用加拿大HCB公司ELISA試劑盒，所有操作步驟均嚴(yán)格按公司所提供的試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對所收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間均數(shù)比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料的比較用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 MPO水平檢測結(jié)果

3個(gè)組別研究對象MPO水平比較見表1。UAP組MPO水平明顯高于SAP組、對照組（P＜0.05），而SAP組與對照組之間的MPO水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 3個(gè)組別患者M(jìn)PO水平比較表

2.2 UAP組分級別隨訪

由于UAP組的MPO檢測具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此根據(jù)測得的MPO水平，將UAP組分為三個(gè)級別進(jìn)行隨訪，三個(gè)級別的分組情況見表2。

表2 分組情況表

2.3 隨訪結(jié)果

在120d內(nèi)對三個(gè)級別的患者進(jìn)行隨訪，比較較為嚴(yán)重的心血管不良事件的發(fā)生率的差異。較為嚴(yán)重心血管不良事件包括心臟性猝死、心肌梗死、心絞痛、血管重建、繼發(fā)性心力衰竭等。隨訪結(jié)果見表3。

表3 隨訪結(jié)果表

2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

隨訪結(jié)果表明：MPO水平的高低能夠反映心絞痛患者，在近期發(fā)生心血管不良事件危險(xiǎn)性大小，可以作為不穩(wěn)定型心絞痛患者預(yù)后評估的一個(gè)重要參考指標(biāo)。

3 討 論

髓過氧化物酶和冠狀動(dòng)脈疾病，冠狀動(dòng)脈心臟病是最常見的心血管疾病，動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是冠心病形成的重要的病理基礎(chǔ)。動(dòng)脈粥樣硬化通常發(fā)生在低密度脂蛋白的氧化脂質(zhì)的巨噬細(xì)胞，然后成為泡沫細(xì)胞，發(fā)病機(jī)制中的泡沫細(xì)胞形成中起著關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)，髓過氧化物酶的形成可以促進(jìn)AS病變的作用，產(chǎn)生自由基和多種反應(yīng)物質(zhì)髓過氧化物酶，促進(jìn)斑塊形成和不穩(wěn)定的進(jìn)展加快，從而導(dǎo)致許多并發(fā)癥，如急性冠脈綜合征（ACS）。研究髓過氧化物酶的缺陷，心血管疾病的個(gè)人風(fēng)險(xiǎn)顯著下跌。髓過氧化物酶水平升高和冠狀動(dòng)脈疾病的危險(xiǎn)不僅敏感性相關(guān)，但也可以預(yù)測心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)的早期風(fēng)險(xiǎn)。后續(xù)隨訪，發(fā)現(xiàn)這些患者基線髓過氧化物酶水平的獨(dú)立預(yù)測的30d治療后6個(gè)月，不良心臟事件（心肌梗死，再梗死，或死亡）的風(fēng)險(xiǎn)性。Bald us等，調(diào)查1050名ACS患者在未來6個(gè)月內(nèi)發(fā)生死亡或M I的情況，結(jié)果顯示隨著髓過氧化物酶的升高（＞350μg/L）心血管發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（校正HR=2.25，95%，CI 1.32～3.82，P=0.003）。Mocatta等對512名急性M I患者進(jìn)行5年的前瞻性研究，提出髓過氧化物酶可獨(dú)立預(yù)測患者隨后5年的病死率（OR=1.8，95%，CI 1.0～3.0，P=0.034）。由此說明髓過氧化物酶能為ACS患者提供長期的預(yù)后信息，獨(dú)立有效地預(yù)測不良心血管事件發(fā)生，指導(dǎo)臨床醫(yī)師采取及時(shí)有效的治療措施。

本文通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定性心絞痛患者的MPO水平?jīng)]有明顯的變化，而MPO的檢測能夠在很大程度上反映不穩(wěn)定型心絞痛患者發(fā)生心血管不良事件的危險(xiǎn)性，可以為臨床提供有價(jià)值的臨床診斷依據(jù)。

[1] Chang P Y,Wu T L,Hung C C,et al.Development of an ELISA for my eloperoxidase on m icroplate: Normal reference values and effect of temperature on specimen preparation[J].Clin Chim Acta,2006,373(1-2): 158-163.

[2] Sugiyama S,Kugiyama K,Aikawa M,et al.Hypochlorous acid, a macrophage product, induces endo the lialapoptosis and tissue factor expression-involvement of m y-eloperoxidase-mediated oxidant in plaque erosion and thrombogenesis[J].A rterioscler Thromb Vasc Bio,2004,24(7): 1309-1314.

[3] Brennan M L,Penn M S,Van Lente F,et al.Prognostic value of my-Eloperoxidase in patients with chest pain[J].N Engl J Med,2003,349(17): 1595-1604.