分光光度法測定阿奇霉素分散片的含量

郝萬福

阿奇霉素為新一代15元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。其結(jié)構(gòu)和紅霉素相似，但與紅霉素相比，其化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，口服吸收好、耐胃酸，血藥濃度尤其是組織內(nèi)藥濃度比紅霉素高且半衰期較長，抗菌譜比紅霉素廣，抗菌作用強(qiáng)。2005年版《中國藥典》(二部)規(guī)定其含量測定方法[1]為微生物效價(jià)測定法，此法操作煩瑣、耗時(shí)。筆者選用分光光度法測定阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試劑

CHB-1抗生素效價(jià)測量儀(北京潮聲);島津UV-2201型紫外分光光度計(jì)(日本島津);阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為30352-200405，含量每毫克相當(dāng)于936單位);阿奇霉素分散片(本廠生產(chǎn)，批號(hào)為 0510001、0510002、0512004);鹽酸、磷酸氫二鈉為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 檢測波長的選擇 精密稱取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品適量，加乙醇(每2 mg約加入乙醇1 ml)使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋成每ml中約含50 μg，阿奇霉素的溶液，精密量取5.0 ml，精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫。以溶出介質(zhì)為空白，在190 nm～700 nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果阿奇霉素在482 nm處有最大吸收，且輔料在此波長處無吸收，故選擇482 nm作為測定波長。

2.2 線性關(guān)系試驗(yàn) 精密稱取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品50 mg置100 ml量瓶中，加乙醇25 ml超聲使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品溶液。精密量取該溶液適量，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋成阿奇霉素濃度分別為 20 μg/ml、30 μg/ml、40 μg/ml、50 μg/ml、80 μg/ml 的溶液，分別精密量取5.0 ml，各精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫。分別在482nm處測定其吸收度，以濃度C(μg/ml)對(duì)吸收度(A)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為C=95.308A+4.2142，r=0.9936，n=5。結(jié)果表明阿奇霉素的濃度在20～80 μg/ml范圍內(nèi)與吸收度呈良好線性關(guān)系。

2.3 精密度與穩(wěn)定性試驗(yàn) 取上述線性回歸分析中顯色后的對(duì)照品溶液(阿奇霉素濃度為50 μg/ml)依法測定吸收度5次，結(jié)果吸收度的RSD為0.11%(n=5)，表明儀器精密度良好。

將顯色后的該溶液放置 1、2、3、4、8、10、24 h，在 482 nm處測定其吸收度。結(jié)果吸收度的RSD為0.54%，表明溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的樣品5份，按樣品含量測定項(xiàng)下方法測定，結(jié)果含量的RSD為0.80%，表明方法重現(xiàn)性較好。

2.5 回收率的測定 精密稱取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品適量，按阿奇霉素分散片處方比例加入其他輔料，照“樣品含量測定”項(xiàng)下測定阿奇霉素含量，計(jì)算回收率。高、中、低3個(gè)濃度的回收率分別分為99.2%，99.0%，99.8%;RSD＜0.42%。

表1 樣品含量測定結(jié)果(標(biāo)示量的%)

2.6 樣品含量測定 取阿奇霉素分散片20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于阿奇霉素50 mg)，置10 ml量瓶中，加入乙醇25 ml超聲使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻再精密量取5 ml，精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫，在482nm處測定其吸收度。另取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品，同法測定，按吸收度計(jì)算。并與2005年版《中國藥典》(二部)的微生物效價(jià)測定結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果(見表1)。

3 討論

3.1 阿奇霉素易溶于無水乙醇和稀鹽酸中，筆者曾采用三種不同pH值的溶劑作為溶出人質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用0.1 mol/L磷酸氫二鈉溶液(0H約為9.39)和0.1 mol/L鹽酸溶液作為溶出介質(zhì)時(shí)，所測得的阿奇霉素含量均偏高，故以pH6.0的磷酸鹽緩沖液作為溶劑，結(jié)果滿意。

3.2 用分光光度法測定阿奇霉素分散片的含量與微生物效價(jià)測定的結(jié)果比較一致，而前者簡便、快速、準(zhǔn)確，適合于對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(二部).北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:293.