葡萄柚莖尖微芽嫁接脫毒成苗技術(shù)研究初報(bào)

李 麗 羅君琴 徐建國 孫建華 柯甫志 聶振朋

（浙江省柑橘研究所 臺(tái)州黃巖 318020）

1 材料與方法

1.1 供試品種（系）

紅肉葡萄柚、黃肉葡萄柚。

1.2 砧木苗培養(yǎng)

莖尖微芽嫁接采用沙田柚和枳為砧木，挑選果皮完好無霉?fàn)€的果實(shí)，先用自然水沖洗去果皮表面的雜質(zhì)，在無菌條件下，用75%酒精擦洗作表面消毒，反復(fù)2～3次。切去果皮，取出飽滿的種子，用無菌的1mol/L的氫氧化鈉溶液浸泡10min，軟化種子表面的果膠，用清水沖洗直到果膠去除干凈。在無菌慮紙上剝除種子的內(nèi)外種皮，胚根朝下置于固體的MS培養(yǎng)基中，每試管接5～6顆種子。標(biāo)好品種和日期，置于25±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)14～20d，獲得黃化苗供嫁接用。

1.3 莖尖微芽嫁接

晴朗的上午10：00左右，于健壯無病的葡萄柚樹株上，剪取3～5cm的未自剪的春梢，置于有清水的三角瓶中封口保濕。拿回實(shí)驗(yàn)室用洗潔精清洗干凈嫩芽表面的雜質(zhì)，在無菌條件下，用5%（v/v）的次氯酸鈉溶液對(duì)嫩芽作表面消毒8min。切去砧木頂端和部分根端，留莖長2cm左右，然后用刀片在離砧木上切口0.5cm處切出三角形創(chuàng)口，在體視顯微鏡下用嫁接刀尖剝?nèi)”Ａ羯L錐及2～3個(gè)葉原基的莖尖，快速將其放到砧木的三角形切口中，用刀背按壓使莖尖與砧木的橫切口完全接合。嫁接好的試管苗置入濾紙橋支撐的MT液體培養(yǎng)基中進(jìn)行光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25±1℃，光照為1500～2000Lx，培養(yǎng)時(shí)間為12h/d。

1.4 除萌

嫁接后7～10d，砧木陸續(xù)萌蘗，生長迅速與接穗競爭營養(yǎng)，如不及時(shí)除萌，會(huì)嚴(yán)重影響接穗正常生長，當(dāng)萌蘗長到2cm以上時(shí)，接穗因得不到足夠的營養(yǎng)而褐化死亡現(xiàn)象明顯增多。一般經(jīng)過2～3次除萌，莖尖與砧木接口愈合充分的接穗開始生長，此時(shí)萌蘗不再發(fā)生。

1.5 嫁接成活苗的移栽

莖尖嫁接萌動(dòng)開始后約21d左右，待接穗長出4～5片葉后，便移栽到網(wǎng)室大棚中。首先將待移栽的嫁接苗在實(shí)驗(yàn)室的自然散射光下煉苗3～5d。在此間準(zhǔn)備好培養(yǎng)土，成分為2/3珍珠巖+1/3東北泥炭，經(jīng)高壓滅菌后備用。移栽時(shí)將嫁接苗從試管中取出，洗凈根部的培養(yǎng)液，移入無菌的培養(yǎng)土中。用1/2MT營養(yǎng)液+800倍多菌靈混合液澆透定根。再將培養(yǎng)缽移入裝有霧噴設(shè)施的防蟲網(wǎng)室中進(jìn)行隔離養(yǎng)護(hù)，保持網(wǎng)室80%～90%的濕度。移栽后每隔7d澆一次1/2MT營養(yǎng)液+800倍多菌靈混合液，14d左右待嫁接苗新根長出，移栽成活，便開始新葉生長，看護(hù)培養(yǎng)得當(dāng)，嫁接苗生長迅速，21d左右接穗即可長到5cm以上。

2 結(jié)果與分析

葡萄柚不同品系與砧木組合嫁接成活率差異較大。紅肉葡萄柚和黃肉葡萄柚莖尖微芽嫁接成活率品系間的無明顯差異，不同砧木間則表現(xiàn)出明顯的差異性。采用沙田柚為砧木，兩品系的葡萄柚嫁接成活率最高，都達(dá)70.0%左右，黃肉系相對(duì)較高達(dá)70.6%；而枳為砧木，紅肉葡萄柚和黃肉葡萄柚的嫁接成活率明顯較低，前者為15.0%，后者為11.8%（見表1）。其原因可能是葡萄柚與柚類嫁接親和性較好。

表1 不同砧木對(duì)葡萄柚莖尖微芽嫁接成活率的影響

3 小結(jié)

研究表明，在田間常規(guī)條件下，枳是中國目前應(yīng)用最多、最廣的柑橘砧木，對(duì)多數(shù)柑橘品種親和力強(qiáng)，成活率高。枳是溫州蜜柑、椪柑、金柑、甌柑等常規(guī)半矮化砧；枳砧梁平柚、五步柚、晚白柚等，表現(xiàn)親和性好，矮化，生長正常，早結(jié)豐產(chǎn)；但它對(duì)本地早、柳橙、蕉柑、萊姆、湯姆森臍橙、麻豆文旦、八朔蜜柑、尤力克檸檬、馬敘無核葡萄柚、鄧肯葡萄柚等則不親和。

利用組織培養(yǎng)，試管微環(huán)境條件下，進(jìn)行兩種葡萄柚與砧木組合的莖尖嫁接試驗(yàn)，結(jié)果表明，試管微環(huán)境下，枳對(duì)葡萄柚也表現(xiàn)出親和性差，這與田間條件下的表現(xiàn)一致。而以沙田柚為砧木的嫁接親和性較佳。