孵化溫度對中華鱉性別分化的影響

巫旗生，王曉清，曾亞英，馬 曉，何橫忠

（湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，長沙 410128）

甲魚又稱團魚，學名為中華鱉（Trionyx sinensis），是一種名貴食用水產(chǎn)動物[1]。甲魚營養(yǎng)豐富，含有蛋白質(zhì)、脂肪、鈣、鐵、動物膠、角蛋白及多種維生素，是不可多得的滋補品，甲魚還可入藥，在國內(nèi)外市場上十分暢銷，深受水產(chǎn)養(yǎng)殖戶歡迎。甲魚的性別與其生長速度存在較大的聯(lián)系，雄魚生長較雌性快20%以上，且繁殖過程中，中華鱉的雌、雄配種比例可達到6∶1，甚至10∶1，因此，在生產(chǎn)上需要有選擇性地繁殖雌鱉或雄鱉。

目前，學者們已報道了許多龜鱉目動物中存在著溫度影響子代性比的現(xiàn)象（TSD），認為孵化溫度是影響鱉、龜、鱷魚等爬行動物性別的主要因子。一部分學者認為中華鱉的雄性孵化率隨溫度上升而降低，另一部分學者則認為中華鱉的雄性孵化率是隨溫度的上升而上升的，且認為孵化溫度影響中華鱉的性別[2－6]。對于中華鱉的性別決定機制是否由孵化溫度決定的，至今尚無有力的證據(jù)。因此，本試驗研究了孵化溫度對中華鱉性別決定的影響，以此來探明中華鱉的性別決定機制，為我國的中華鱉良種選育提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

受精中華鱉卵300粒（長沙鑫煌水產(chǎn)科技有限公司臨湘中華鱉養(yǎng)殖基地），試驗分組情況見附表。孵出后的稚鱉前期采用小雜魚剁碎投喂，后期以投喂稚鱉飼料為主。

附表 不同孵化溫度產(chǎn)生的子代性別比

1.2 試驗方法

1.2.1 控溫孵化

將中華鱉卵埋在裝滿細沙的塑料盆中，分別放置于溫度為22、25、28、32和35℃的恒溫孵化箱中孵化。采用在恒溫孵化箱內(nèi)灑水和在孵化盆的細沙表面噴水的方法來維持孵化濕度，使其相對濕度保持約85%。

1.2.2 稚鱉飼養(yǎng)

將不同溫度下孵出的稚鱉放置在同一溫室的不同池子中，池內(nèi)設(shè)有曬被臺供幼鱉休憩。用恒溫加熱棒加熱，使水溫保持在30℃。在相同條件下采用常規(guī)的飼養(yǎng)管理方法，飼養(yǎng)過程中需及時清除剩余餌料，防止殘餌污染水質(zhì)，并定期進行消毒。

1.2.3 性別的鑒定

將稚鱉飼養(yǎng)到個體性別特征較明顯時，進行性別的鑒定[7]。雌鱉尾部較短，不能自然伸出裙邊外或外露很少，體型圓，體高高，背甲呈卵圓形，前后基本一致，腹部中間的軟甲，十字形后肢間距較寬；雄鱉尾部較長，能自然伸出裙邊外，體型稍長，體高隆起而薄，背甲呈長卵圓形，后部較寬，腹部中間的軟甲，曲玉形，后肢間距較寬較窄。

2 結(jié)果與分析

2.1 孵化結(jié)果

不同溫度組孵化積溫變化和孵化率的結(jié)果見圖1、2。

圖1 不同溫度組孵化積溫變化趨勢

由圖1可見，通過用恒溫孵化箱對中華鱉卵進行孵化，不同溫度組所需的孵化時間及孵化積溫各不相同。除22℃組未能進行正常孵化外，其他溫度組均能正常孵化。其中，25℃組孵化所用時間最長，約87 d；35℃組孵化時間最短，約41 d。中華鱉卵孵化積溫為 34 440～52 200 ℃·h－1。

圖2 不同溫度組的孵化率

由圖2可見，在不同孵化溫度下，孵化率各不相同。除22℃組的中華鱉卵不能進行正常孵化外，在一定溫度范圍內(nèi)孵化率隨溫度升高而增大，最高孵化率達到了96%。

2.2 性別鑒定結(jié)果

性別鑒定結(jié)果見圖3。

從圖3可見，孵化溫度對中華鱉性別分化是有明顯影響的，在一定孵化溫度范圍內(nèi)，雄性個體的孵化比例隨溫度升高而增大，雌性個體的孵化比例隨溫度升高而降低。其中，25℃組的雄性個體孵化率最低，為27.27%；雌性個體孵化率最高，為72.73%。而35℃組的雄性個體孵化率最高，為67.57%；雌性個體孵化率最低，為32.43%。

圖3 可進行性別鑒定的中華鱉雌雄比例

2.3 顯著性檢驗

不同的孵化溫度產(chǎn)生不同的子代性別比，X2檢驗結(jié)果顯示，在25、32和35℃孵化溫度下差異顯著，子代性別比與♂∶♀=1∶1的假設(shè)出現(xiàn)偏差；而28和30℃則差異不顯著，符合1∶1假設(shè)。

3 討論

劉筠等認為，中華鱉的胚胎發(fā)育適宜溫度范圍為22～36℃[8]。試驗發(fā)現(xiàn)，中華鱉的孵化溫度為22℃，其胚胎不能正常發(fā)育。本試驗證明了孵化溫度影響中華鱉的孵化率，28～32℃為其最適孵化溫度，符合相關(guān)報道[9－12]。

目前認為兩棲爬行動物性別決定的方式有基因型性別決定和環(huán)境性別決定[13－16]。具有TSD機制動物的特征表現(xiàn)為孵化溫度影響著子代性別比，而孵化溫度可以決定稚鱉的性別比、影響孵化周期的長短和孵化率的高低[17－20]。

本試驗發(fā)現(xiàn)，中華鱉的雄性率隨溫度的升高而增大，雌雄率隨溫度的升高而降低，說明孵化溫度影響中華鱉的子代性別比。但是，根據(jù)X2檢驗結(jié)果又不能說明孵化溫度是中華鱉的性別決定機制。因此，孵化溫度對中華鱉的性別決定是有顯著影響的，至于中華鱉的性別決定機制問題，尚需進一步研究。

有關(guān)中華鱉性別決定的研究不僅有助于豐富脊椎動物性別決定的理論，而且有助于人類能按照自己的意愿有效地控制爬行動物的性別。通過人為控制中華鱉的孵化溫度來獲得較高比例的雄性個體或雌性個體，可以提高養(yǎng)殖中華鱉所帶來的經(jīng)濟效益，具有重要的理論研究價值及實際應用意義。

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