芍藥苷對荷瘤小鼠化療的減毒增效作用研究

惠愛武 馮文革 趙 崗 楊甫昭 曹兆軍 褚亞軍 陜西省中醫(yī)藥研究院 (西安 710003)

惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的主要疾病之一,化療是治療腫瘤的有效手段,但單純化療會抑制骨髓造血系統(tǒng),損害機體的免疫系統(tǒng),導致預后不良而加速患者的死亡[1]。尋找實現(xiàn)增效減毒的輔助藥物刻不容緩,芍藥苷具有免疫調(diào)節(jié)作用,對腫瘤等有較強的抑制作用[2]。本實驗通過建立小鼠體內(nèi)移植性實體瘤模型,對芍藥苷與 CTX聯(lián)合應用的抗腫瘤作用進行實驗研究,為芍藥苷作為化療輔助藥的開發(fā)利用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 ICR小鼠,由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供,體重 18～ 22g,實驗動物質(zhì)量許可證號:SCXK(陜 )2007-001。

1.2 實驗瘤株 小鼠 S180肉瘤細胞株,由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心引進。

1.3 實驗藥物 芍藥苷:購自中國藥品生物制品檢定所,批號:200933,含量為 98.1%;環(huán)磷酰胺(CTX),江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn),批號:08040321。

1.4 實驗儀器 電子天平:型號:BS210S精確度:0.1mg北京賽多利斯天平廠;普通光學顯微鏡:olympus生產(chǎn);SW-CJ-2D型雙人凈化工作臺,型號:NO.0504192,蘇州凈化設(shè)備有限公司生產(chǎn)

1.5 試驗方法 按文獻方法[3～5],取生長 7～ 10d,且健康狀況較佳的移植性 S180種瘤小鼠,頸椎脫臼法拉頸處死種瘤小鼠,在潔凈工作臺內(nèi)制備瘤細胞懸液 (1×107個 /mL),每只小鼠無菌條件下腋下接種 S180瘤細胞懸液 0.2mL,計瘤細胞數(shù)約為 2× 106個。次日按體重隨機分為 5組,分別為荷瘤對照組(常水 10mL/kg)、CTX(20mg/kg)和 芍 藥 苷 30mg/kg+CTX20mg/kg組、芍藥苷 15mg/kg+ CTX20mg/kg組和芍藥苷 7.5mg/kg+ CTX20mg/kg組 ,接種 S180后次日開始給藥。環(huán)磷酰胺采用腹腔注射,受試藥物 ig給藥,每天 1次,連續(xù)給藥10d。末次給藥后次日,自小鼠內(nèi)眥靜脈叢采血,取血 20 μL加入到 0.38mL 2%冰醋酸溶液中搖勻,常規(guī)計數(shù)外周血白細胞總數(shù)。稱體重后處死小鼠,剖取瘤塊稱重,計算抑瘤率。同時剝離左側(cè)股骨,用 5mL2%冰醋酸溶液沖出骨髓內(nèi)細胞,常規(guī)計數(shù)細胞總數(shù),即為一根股骨中骨髓有核細胞數(shù)。抑瘤率=(對照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/對照組平均瘤重×100%。

2 結(jié) 果

2.1 芍藥苷對荷瘤小鼠化療增效的影響 與荷瘤對照組比較,CTX組與芍藥苷+CTX各組荷瘤小鼠瘤重明顯降低(P＜0.01),并且芍藥苷 30mg/kg加環(huán)磷酰胺組對瘤重的抑制作用優(yōu)于單用環(huán)磷酰胺(P＜0.05),說明芍藥苷可以明顯增強CTX抗小鼠肉瘤 S180的作用(表 1)。

表1 芍藥苷與 CTX合用對小鼠 S180肉瘤的抑制作用(±s)

表1 芍藥苷與 CTX合用對小鼠 S180肉瘤的抑制作用(±s)

注:與荷瘤對照組相比:▲P＜0.01;與 CTX組相比:△ P＜0.05。

組 別 劑 量 動物數(shù)(只) 瘤 重(g) 抑制率(%)荷瘤對照組 常水 10mL/kg 10 2.62±0.59 CTX組 20mg/kg 10 0.52±0.17▲ 80.15芍藥苷+ CTX 30mg/kg+ 20mg/kg 10 0.33± 0.18▲△ 87.40芍藥苷+ CTX 15mg/kg+ 20mg/kg 10 0.39± 0.21▲ 85.11芍藥苷+ CTX 7.5mg/kg+20mg/kg 10 0.42± 0.22▲ 83.97

2.2 芍藥苷對荷瘤小鼠化療減毒的影響 與荷瘤對照組比較,CTX組小鼠的體重及外周血白細胞和骨髓有核細胞數(shù)明顯降低(P＜0.01)。芍藥苷+ CTX各組可使小鼠體重明顯增加,外周血白細胞數(shù)和骨髓有核細胞數(shù)顯著回升(P＜0.05～ 0.01),且升高白細胞的作用有明顯的劑量關(guān)系,劑量越大,升高白細胞效果越明顯。 (表 2)

表2 芍藥苷對小鼠 S180肉瘤化療的減毒作用(±s)

表2 芍藥苷對小鼠 S180肉瘤化療的減毒作用(±s)

與荷瘤對照組相比:▲P＜0.01與 CTX組比較:△ P＜0.05;◇P＜0.01

?

3 討 論

化學藥物、放射等治療方法能直接殺傷腫瘤細胞,抑制腫瘤生長,是目前腫瘤治療的主要手段,但其伴隨而來的諸多不良反應,尤其對肝臟、腎臟、骨髓造血功能的影響尤為顯著,使其臨床應用受到了極大的限制。如何提高腫瘤對化療藥物的敏感性并減輕化療藥物的不良反應是目前腫瘤治療領(lǐng)域中越來越引起人們重視并值得探討的問題。本研究證明,芍藥苷和環(huán)磷酰胺合用具有對抗環(huán)磷酰胺所致體重下降、白細胞降低和骨髓抑制等毒性反應,提高 CTX的抗腫瘤效果。且升高白細胞的作用有明顯的劑量關(guān)系,劑量越大,升高白細胞效果越明顯。因此有希望將芍藥苷開發(fā)成更適合于臨床的、安全有效的抗腫瘤中藥制劑。這將是一個重大地研究課題。

[1] Takeda K,SmythM J,Cretney E,et al.Critical role for tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand in immune surveillance against tumo r development[J]1 J E xpM ed,2002,195(2):1612-1691

[2] 于小紅,于 洋,華 東.赤芍總苷對荷瘤小鼠抗腫瘤作用的免疫機理研究[J].江西中醫(yī)學院學報,2005,17(1):61-26.

[3] 袁國紅,龐曉靜,馬鶴超.當歸補血湯對荷瘤小鼠的影響及對環(huán)磷酰胺化療的增效減毒作用,中西醫(yī)結(jié)合學報,2008,6(1):83-88.

[4] 田衛(wèi)衛(wèi),李 偶,黃映紅,等.補虛化瘀方對聯(lián)合化療荷瘤小鼠骨髓造血功能的影響[J].中藥新藥與臨床藥理,2003,14(1).

[5] 曹利平,劉 巍,陳 濤,等.固金消瘤膠囊抗小鼠lew is肺癌增效減毒作用研究[J].陜西中醫(yī),2009,30(3):368-370.