2型糖尿病大鼠陰莖海綿體內(nèi) Hcy與 ADM A/DDAH的相關(guān)性研究

何 雷,秦文波,趙桂林,黨永飛,何 娜

(1.佳木斯大學(xué)附屬醫(yī)院泌尿外科,黑龍江 佳木斯 154003;2.河北省任丘市人民醫(yī)院,河北 任丘 062500)

糖尿病性勃起功能障礙的發(fā)病機(jī)制目前還不十分清楚,其研究主要集中在陰莖內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能損害、神經(jīng)因素、內(nèi)分泌因素及社會(huì)心理因素等,對(duì)糖尿病性勃起功能障礙的研究將有助于改善人們的生活質(zhì)量。目前有關(guān)Hcy和 ADM A/DDAH通路的研究主要集中在循環(huán),消化和中樞神經(jīng)系統(tǒng),而對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)的研究還少有報(bào)道。本文旨在通過實(shí)驗(yàn)闡述 2型糖尿病伴隨的高同型半胱氨酸血癥與陰莖勃起功能之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物模型構(gòu)建

取 2到 3個(gè)月齡雄性 Wistar大鼠 60只,隨機(jī)取 10只為正常對(duì)照組,給予正常喂養(yǎng)。余 50只大鼠給予高糖高脂飲食,4周后,按 30mg/kg一次性于尾靜脈注射鏈脲佐菌素(STZ),72h后割尾取血檢測(cè)外周血血糖,血糖＞ 16.67mmol/L,并出現(xiàn)多飲、多食、多尿,體重減輕即確定 DM模型復(fù)制成功。正常喂養(yǎng)的 10只大鼠為正常對(duì)照組(A組),制造 DM模型后篩選出 40只 DM大鼠再隨機(jī)分為 4組,每組10只,分別為糖尿病大鼠組(B組);糖尿病大鼠胰島素治療組 (C組);糖尿病大鼠葉酸、維生素 B12治療組 (D組);糖尿病大鼠左旋精氨酸治療組 (E組)。

1.2 給藥方法

C組每日早餐前在大鼠頸部皮下注射中效胰島素 10～20U/kg;D組每日葉酸 0.5mg/kg和維生素 B1250μ g/kg灌胃;E組每日左旋精氨酸 50mg/kg灌胃;對(duì)照組灌等量生理鹽水干預(yù)?？偨o藥時(shí)間為 8周。

1.3 檢測(cè)方法

12周后用乙醚麻醉后采空腹大鼠尾靜脈外周血,用氧化酶法測(cè)定血糖。同時(shí)進(jìn)行 APO實(shí)驗(yàn),在大鼠頸背部皮下注射阿樸嗎啡 100μ g/kg,注射后觀察 30min并記錄陰莖勃起率,龜頭充血及陰莖體增長(zhǎng),增粗為陰莖勃起 1次。相同時(shí)間點(diǎn)采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血漿中 Hcy。處死大鼠后解剖陰莖組織剪碎、勻漿,離心后取上清液部分用試劑盒行 NOS,DDAH活性測(cè)定,用高效液相色譜測(cè)定 ADM A含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包,結(jié)果以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差 (±s)表示,組間比較用t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn),P＜0.05為有顯著差異。

2 結(jié)果

12周后試驗(yàn)各組大鼠血糖值及陰莖海綿體組織中 Hcy、NOS的含量、ADM A的含量及 DDAH的活性值分別與陰莖勃起率(X)之間的對(duì)照關(guān)系見表 1。

表 1 12周后各組大鼠檢測(cè)指標(biāo)的比較 (±s)

表 1 12周后各組大鼠檢測(cè)指標(biāo)的比較 (±s)

大鼠分組 A組 B組 C組 D組 E組血糖值 4.73± 0.54 24.12± 2.13 5.06± 0.47 5.25± 0.48 3.86± 0.34 Hcy含量 9.45± 1.21 23.41± 3.42 12.76± 1.54 9.98± 1.39 10.23± 1.67 NOS含量 11.33± 0.30 5.54± 0.53 9.28± 0.31 10.18± 0.29 10.52± 0.20 ADM A含量 0.32± 0.09 0.74± 0.05 0.28± 0.03 0.28± 0.04 0.31± 0.04 DDAH含量 162.3± 0.5 101.7± 0.5 141.8± 0.3 140.2± 0.4 143.3± 0.4勃起率 X(%) 100 28.6 75.0 71.4 75.0

(1)A組與 B組比較有顯著性差異 (P＜0.05),提示 2型糖尿病大鼠陰莖海綿體組織中 NOS和 DDAH活性下降,Hcy和 ADM A含量上升,勃起率下降 ,各測(cè)量值之間有顯著性差異。(2)C、D、E組與 B組比較 (P＜0.05),提示經(jīng)胰島素,維生素 B12、葉酸及左旋精氨酸治療的 2型糖尿病大鼠陰莖海綿體組織中 NOS和 DDAH活性上升 ,Hcy和 ADM A含量下降,勃起率改善,各測(cè)量值之間有顯著性差異。 (3)A組與 C、D、E組比較 (P＞ 0.05),提示經(jīng)胰島素,維生素 B12、葉酸及左旋精氨酸治療的 2型糖尿病大鼠陰莖海綿體組織中 NOS、Hcy、ADM A、DDAH和勃起率與正常對(duì)照組無顯著性變化。

3 討論

糖尿病性 ED是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥,有研究表明DM患者 ED的發(fā)生率在美國高達(dá) 50%,DM患者 ED的發(fā)生率比非 DM人群高 3倍[1]。糖尿病作為誘發(fā)陰莖勃起障礙流行病學(xué)上的重要危險(xiǎn)因子,已越來越引起人們的重視。與一般人群相比,DM男性患者發(fā)生 ED年齡更早,發(fā)病率和患病率更高,治療更困難[2]。通過本實(shí)驗(yàn)可以看出葉酸、V B12、左旋精氨酸、胰島素在 Hcy代謝過程中都有積極的作用可改善勃起功能障礙,所以降低血漿中 Hcy水平對(duì)于減少 DM ED的發(fā)病率具有十分重要的意義。因此,臨床上可以嘗試通過補(bǔ)充葉酸、VB12、左旋精氨酸預(yù)防治療高同型半胱氨酸血癥,減少 DM ED的發(fā)病。同時(shí)可以看出胰島素治療組在降低 Hcy效果不如葉酸、V維生素 B12及 L-精氨酸治療組的原因可能是 STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠在血糖升高的同時(shí),體內(nèi)胰島素的作用或 /和胰島素抵抗明顯降低 ,或是 Hcy代謝的復(fù)雜調(diào)節(jié)性及研究對(duì)象中存在的影響血漿 Hcy水平的其它因素等。有研究認(rèn)為,長(zhǎng)期應(yīng)用葉酸、VB12可明顯降低血 Hcy濃度,而延緩高 Hcy血癥[3]。盡管如此,目前尚無統(tǒng)一的治療方案,而且對(duì)于降低 Hcy后能否降低 DMED危險(xiǎn)性尚缺乏大規(guī)模的臨床試驗(yàn)。國外已將補(bǔ)充飲食中的葉酸、VB12、L-精氨酸做為降低 Hcy血癥以減少動(dòng)脈硬化發(fā)生的一種手段[4],對(duì)糖尿病患者特別是 Hcy水平較高者有規(guī)律地補(bǔ)充葉酸、VB12、L-精氨酸可能會(huì)降低 Hcy水平,從而延緩糖尿病患者大血管并發(fā)癥的發(fā)生,有助于治療 DM ED,改善性功能,提高生活質(zhì)量。因此,我們建議對(duì) DM患者檢測(cè)血漿 Hcy水平,以早期發(fā)現(xiàn)高危人群,及早干預(yù)并控制代謝異常,這可能對(duì)預(yù)防或延緩 DMED并發(fā)癥的發(fā)生具有一定意義[5]。綜上所述,2型糖尿病大鼠血漿中 Hcy顯著升高,陰莖海綿體內(nèi) NOS、DDAH活性明顯下降,ADM A含量顯著升高,胰島素和葉酸、維生素 B12及 L-精氨酸的干預(yù)治療可以降低 Hcy,并使 NOS的活性提高,進(jìn)而勃起功能改善。故可以推測(cè)高同型半胱氨酸血癥可通過 ADM A/DDAH通路競(jìng)爭(zhēng)性抑制 NOS的活性,使 NO含量降低最終導(dǎo)致勃起功能障礙,但其具體機(jī)制還有待于進(jìn)一步深入的研究。

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